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下午好!
首先,感謝大家給我這個機會,向大家匯報自己本學期的思想和工作。我不會用華麗的辭語修飾,但它們確能見證我們一學期的工作。陳述如下:
本學期我立足本職,給自己定好位,配合學校領導開展教學工作。
一、作為一名數(shù)學教師,我同其他教師一樣,盡職盡責,努力完成自己的各項教學常規(guī)工作。在每月一次的常規(guī)檢查時,從沒有出現(xiàn)一次不按時上交、晚交的情況。課堂教學方面,我盡量做到不因為其他工作而耽誤學生的課,耽誤孩子的課我會盡可能給孩子補上;我盡全力打造自己的高效課堂;我會讓孩子們在快樂中學習。課堂上不放棄每一個孩子。在這次的期末測試中,就連我班最不愛做作業(yè)的陳文言也得了個良好。這個成績是我預料之外的。
二、我在教學管理方面具體做了以下幾方面的工作。
第一、參與學校管理制度和考核辦法的修訂。學期初,配合校領導完善修訂了教學管理制度,制定了優(yōu)秀年級組考核辦法。
第二、組織教師學習培訓,提升教師教學水平。
1、開學初,組織全體教師進行業(yè)務培訓。具體做了以下工作:聘請冠縣書法協(xié)會的林東旭老師為我們進行了書法培訓;聘請聊城陽光小學的任靜老師和劉益民老師為我們培訓作文指導課;組織教師進行年級間的教材培訓;教學常規(guī)培訓;對年輕教師進行全方位的培訓。
2、重視教師自身學習成長,鼓勵教師積極參加業(yè)務學習,為教師學習提供各種方便和優(yōu)惠。目的就在于打造一支學習型、理念新、業(yè)務精的教師隊伍。
3、加強教師課堂技藝的提高。為有效提升教師的課堂教學技藝,我們組織舉辦了武訓實驗小學第一屆課堂教學大賽。
4、針對教育教學中出現(xiàn)的問題,及時召開教師座談會。本學期我們利用利用午間休息的時間,組織了青年教師座談會、課改年級的座談會3次、藝體學科的座談會、六年級教師的座談會、備課改革座談會、三備二磨座談會。
5、期中后,堅持每周四的課改研討活動。從桌凳擺放到小組建設到課堂上的小組合作學習個方面,推進了我校課堂教學改革的進程,課堂特色悄然形成。
6、依據(jù)“三備二磨”的教研模式,組織了骨干團隊進行教研。
7、師帶徒。本學期帶徒兩名:孫景樓和陳婷。定期走進他們的課堂聽課指導和為他們上好示范課。幫助他們提高。
三、組織教學檢查和考核工作
1、認真抓好常規(guī)工作的檢查工作,做到教學精細化管理。
為保證教學質(zhì)量的有效提高和教學任務的圓滿完成,加強檢查分析的力度,有問題及時整改。教務處嚴格備課、作業(yè)及批改、教案、計劃、學習筆記等各個環(huán)節(jié)的管理,組織年級組長進行檢查,檢查后及時總結,并與相關教師交換意見,有效促進了我校教學質(zhì)量的提高。
2、加大對課堂常規(guī)的檢查。通過組織學生檢查和抽查相結合的方式,有效促進了語文課前一首詩、數(shù)學口算、英語口語、課前一首歌的落實。
3、抓讀書寫字姿勢的落實。組織年級組長分組進行不定期的對各班讀書寫字姿勢進行檢查。是學生的姿勢由督促慢慢形成自覺。
4、加大對藝體學科的檢查與考核。學期初,制定音體美教學計劃,加強了過程性管理,加大了檢查力度,比如,每天下午的一首歌,由原來的督促檢查到現(xiàn)在的聽到預備鈴響文藝委員自覺前臺領歌,學生的自覺行為習慣以養(yǎng)成。體育的古詩韻律操二至六年級學生在大課間已成為我校的一道風景;美術畫展吸引了孩子們的目光,陶冶了美的情操。學期末,音體美各科考核順利完成.
四、組織安排各類展示、比賽活動,提升學校影響力,促進師生發(fā)展。
1、組織開展校內(nèi)各種比賽活動,促進師生發(fā)展。以年級組為單位,進行了普通話比賽、英語口語大賽、數(shù)學計算技能比賽。英語教師點讀比賽
2、組織安排了市、縣的各類展示、比賽活動。具體有:四六年級學生的現(xiàn)場作文、五年級學生的普通話比賽、三年級學生的繪畫、書法比賽、市里的三次書法展示。
五、組織參與學校的重大活動和重要事項
1、順利完成新生一年級的入學工作,并建立健全了學籍檔案,圓滿完成縣普教科安排的各項學籍工作。
2、重大活動,如每學期教材的發(fā)放、為迎接縣督導、期中、期末考試的組織、等,
2、接待外單位來我?;顒?。如電教站在我校組織的電教優(yōu)質(zhì)課活動、小學教研室在我校組織的全縣小學生繪畫、作文比賽、數(shù)學區(qū)域性教研活動2次、語文區(qū)域性教研活動等。
以上每一項工作的完成都離不開在座的學校領導、年級組長以及老師的大力支持和幫助,在這里我要說聲謝謝。謝謝你們的支持。
不足與反思
1、缺乏創(chuàng)新意識,在教學管理工作中,一味求穩(wěn),所以在很多事情的處理上缺乏開拓精神。
2、個別工作的安排的不夠具體細致,落實不是很到位,。
3、由于事務繁雜,在個別情況下處理問題可能犯急躁主義,尤其是抓教學這一塊,與老師們打交道比較多,有時可能難以控制情緒,態(tài)度欠妥,請老師們諒解。
4、學習不夠,水平有待提高。
5、許多的事情做過之后沒有及時整理保留相關資料,沒有及時把搞過的活動報道出去。
下一步的改進措施:各項工作都做到:布置-檢查-落實、一絲不茍、
回首過去我的感受是:一直在奔跑著。我的收獲是:團結就是力量。
展望未來,我將一如既往的用心、真心為我的學生和老師們服務。
一、 做到了認真?zhèn)湔n。
不但備學生而且備教材備教法,根據(jù)教材內(nèi)容及學生的實際,針對四年級教學目標的不同:在培養(yǎng)興趣的基礎上訓練學生認讀單詞的能力,還讓學生模仿教材說英語,培養(yǎng)學生的語音語調(diào);四年級是在保持興趣的基礎上學習新知識,加大聽寫單詞的力度。認真寫好教案。對每一課都做到“有備而來”,每堂課都在課前做好充分的準備,并制作各種利于吸引學生注意力的有趣教具,課后及時對該課做出總結,寫好教學后記,并認真搜集每課書的知識要點,歸納成集。
二、提高課堂教學技能
增強上課技能,提高教學質(zhì)量,使講解清晰化,條理化,準確化,情感化,生動化,做到線索清晰,層次分明,言簡意賅,深入淺出。在課堂上特別注意調(diào)動學生的積極性,加強師生交流,充分體現(xiàn)學生的主作用,基本做到了讓學生學得容易,學得輕松,學得愉快;注意精講精練,同時在每一堂課上都充分考慮每一個層次的學生學習需求和學習能力,以舊引新,活動的設計體現(xiàn)梯度和層次讓每一位學生在感知,實踐,參與,合作中實現(xiàn)任務的目標,體驗到成功的喜悅,讓各個層次的學生都得到提高。
三、虛心學習,取長補短
在教學上,有疑必問。通過參加校、區(qū)市組織的各種互評聽評活動,取長補短,不斷充實自己的教育教學理論水平,提高教學能力。
四、認真批改作業(yè)
布置作業(yè)做到精讀精練。有針對性,有層次性。
對學生的作業(yè)批改及時、認真,分析并記錄學生的作業(yè)情況,將他們在作業(yè)過程出現(xiàn)的問題做出分類總結,進行評講,并針對有關情況及時改進教學方法,做到有的放矢。
五、堅持用英語組織課堂教學
目前,由于課堂仍是絕大部分學生學習英語、使用英語唯一的方式和場所,教師更應該注重傳達知識和信息的形式,為學生營造良好的學習語言的環(huán)境。我在運用英語進行教學時較能注意所用英語語言的可接受性、簡明性、階段性和實用性。具體做法是:
1、用英語組織課堂教學。課堂教學用語盡管大部分相同,我注意不斷適量增加新用語,逐步擴大用語量,使學生保持興趣,經(jīng)歷挑戰(zhàn),從而日積月累,在不知不覺中得到提高。
2、用英語授課。不管上對話課還是課文課,我都堅持使用英語。盡量采用學生學過的詞匯,但難免有不少學生不懂的詞匯,如在用英語介紹課文背景知識時,這時輔之于實物、掛圖、簡筆畫、表情、手勢、表演等,或者借助板書形式加以說明??傊?,注意所用的語言略高于學生現(xiàn)有水平。
3、力求自己的語音、語調(diào)、語言規(guī)范和準確,并根據(jù)不同年級的學生我就調(diào)整語速的快慢。
現(xiàn)將我任職德育副校長一年來的工作、學習、管理等情況作如下述職,請各位領導和同事對我進行評議。
過去的一年我協(xié)助*校長,主要分管德育工作、初一年級部以及寄宿部工作?;仡欉@一年來的工作,我在縣局領導、校領導及各位同事的關心、支持和幫助下,立足崗位,扎實工作,潛心教育教學,不斷創(chuàng)新,不管在工作、學習和管理上都取得了較大的進步,較好地完成了分管的各項工作。下面我的述職主要有兩部分內(nèi)容:一是工作匯報,二是工作反思。
一年來,校園環(huán)境干凈整潔、學生守紀情況良好,良好習慣初步養(yǎng)成,所有學生勤奮好學,積極進取,無重大違紀事件發(fā)生,感謝全體班主任老師付出的辛勤勞動,在學校最小的管理單元中做出了最大的貢獻;七年級的優(yōu)生數(shù)在縣統(tǒng)考中占有較大優(yōu)勢,感謝初一年級全體任課教師,是你們滿腔熱情地忘我工作,創(chuàng)造了令人滿意的成績。尤其值得一提的是在英語組缺人的情況下,王茹主任、胡雪峰、張穎、羅紅老師承擔了3個班的英語教學,并且成績顯著。事非經(jīng)過不知難,其中辛苦勞累,一言難盡。她們是過去一年教學工作繞不過去的彎。周汝春老師、葛振東主席雖年近半百,但工作滿腔熱情,業(yè)績優(yōu)秀。孫建國老師為語文組出謀劃策,工作出色。我為擁有這樣出色的七年級團隊和優(yōu)秀的同事而感到慶幸,他們高超的教學水平提高了我的業(yè)務,他們高度的責任感提升了我的境界,他們高尚的人格凈化了我的心靈,不斷地給我鼓勵、智慧、靈感和勇氣。
【關鍵詞】 雙黃連片;流感病毒;腺病毒;肺炎;肺指數(shù)
Antiviral activity of shuanghuanglian tablet against influenza A1 virus FM1 and adenovirus ADV3 in mice SHEN Si.yao,LIU Jun.hui,TIAN Yan.ru,et al.Department of Pathogenic Biology and Immunology,School of Medicine,Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061 China
【Abstract】 Objective To study the protective effects of shuanghuanglian tablet on influenza viral pneumonia and Adenoviral pneumonia in mice.Methods Viral pneumonia model established by influenza A1 virus FM1 and adenovirus ADV3 in mice.The mice were randomly divided into some groups:normal control group,shuanghuanglian tablethigh dose group(2.4 g/kg),shuanghuanglian tabletmiddle dose group(1.2 g/kg),shuanghuanglian tablet low dose group(0.6 g/kg),virazole group(50 mg/kg)and normal control group.The mice were treated for 7 days,one time per day.Mortality wasobserved.Antiviral activities of shuanghuanglian tabletwere tested by survival time,pulmonary.index,and influenza virus tiler of lung in vivo.Results Compared with virazole group,shuanghuanglian tabeltcould obviously decrease mice mortality(P
【Key words】 Shuanghuanglian tablet;Influenza A1 virus FM1;Adenovirus ADV3;Pneumonia;Pulmonary.index
雙黃連是由雙花(金銀花)、黃芩和連翹三味中藥提取制成的中藥制劑,主要用于抗病毒、細菌感染和增強免疫力,治療由病毒或細菌感染所致疾病,經(jīng)過多年臨床觀察,療效確切。雙黃連片是雙黃連制劑中便于攜帶、療效可靠的劑型,是抗病毒和細菌感染的理想藥物,具有較廣泛的應用前景。為了進一步觀察雙黃連片對呼吸道病毒的作用,本實驗試驗模擬自然感染,將流感病毒和腺病毒用滴鼻的方式感染小鼠,建立小鼠病毒性肺炎模型,然后連續(xù)灌胃雙黃連片1周,通過死亡保護率、生命延長率、肺指數(shù)、肺炎抑制率和小鼠肺部病毒含量的測定等指標,了解雙黃連片在動物體內(nèi)抗流感病毒和腺病毒的作用,為臨床應用提供一定的實驗依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實驗藥物 雙黃連片,20片/盒,0.5 g/片;陜西白鹿制藥股份有限公司生產(chǎn),批號:060437。
1.1.2 對照藥物 病毒唑注射液,0.1 g/1 ml/支,南京第三制藥廠出品,批號:20051004
1.1.3 實驗動物 ICR封閉群小鼠,體質(zhì)量(20±2)g,雌雄各半。由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供。
1.1.4 病毒株 甲型流行性感冒病毒鼠肺適應株FM1,腺病毒ADV3株,均購自中國醫(yī)學科學院北京病毒研究所,本室液氮保存。
1.2 實驗方法
1.2.1 病毒滴度測定 將FM1接種于9~11 d胚齡雞胚尿囊腔,0.2 ml/胚,35℃孵育72 h;連續(xù)傳代2次,收獲雞胚尿囊液。用血凝實驗測定混合的尿囊液中FM1的血凝效價?;旌夏蚰乙翰《镜味葹? 280 Hμ/ml。病毒液分裝,保存于.80℃?zhèn)溆?。將腺病毒ADV3用Hela細胞單層連續(xù)傳代2次,收獲細胞培養(yǎng)液。收獲的新鮮病毒液分裝,凍藏于.80℃冰箱備用。
1.2.2 病毒毒力(LD50)測定 ICR小鼠100只,隨機分10組,每組10只,雌雄各半。用Hank’s液分別將FM1病毒液和ADV3病毒液自原液濃度起做10倍梯度稀釋,稀釋度分別為1、10.1、10.2、10.3、10.4。用乙醚對小鼠進行淺麻醉。每一稀釋度病毒滴鼻感染一組小鼠,0.03 ml/只,正常對照組用生理鹽水滴鼻,0.03 ml/只。小鼠感染病毒后連續(xù)飼養(yǎng)觀察7 d,逐日記錄小鼠死亡數(shù)及活動情況。當正常對照組小鼠無異常,全部存活時,按Bliss法計算FM1和ADV3對ICR小鼠的LD50及其95%可信區(qū)間。
1.2.3 小鼠病毒性肺炎造模 采用10×LD50的病毒量滴鼻感染ICR小鼠。
1.2.4 死亡保護率和生命延長率測定 FM1病毒試驗組ICR小鼠60只,隨機分6組:高、中、低劑量雙黃連片實驗組、病毒唑?qū)φ战M、肺炎模型組和正常對照組,每組10只,雌雄各半。除正常對照組外,其他組小鼠淺麻醉狀態(tài)下滴鼻感染10×LD50 FM1,0.03 ml/只。高、中、低劑量雙黃連片實驗組小鼠分別灌胃2.4、1.2、0.6 g/kg雙黃連片藥液,病毒唑?qū)φ战M小鼠灌胃50 mg/kg病毒唑注射液,肺炎模型組和正常對照組小鼠0.5 ml/20 g生理鹽水灌胃。1次/d,連續(xù)給藥7 d。逐日觀察記錄各組小鼠發(fā)病死亡數(shù)。ADV3病毒試驗組ICR小鼠60只,隨機分6組:高、中、低劑量雙黃連片實驗組、病毒唑?qū)φ战M、肺炎模型組和正常對照組,每組10只,雌雄各半。除正常對照組外,其他組小鼠淺麻醉狀態(tài)下滴鼻感染10×LD50 ADV3,0.03 ml/只。給藥同上。統(tǒng)計各組小鼠存活時間,計算小鼠生命延長率和小鼠死亡保護率。
生命延長率(%)=(實驗組存活時間.模型組存活時間)/模型組存活時間×100%
死亡保護率(%)=(模型組死亡率.實驗組死亡率)/模型組死亡率×100%
1.2.5 肺指數(shù)測定 小鼠造模、分組及給藥同上。給藥7天期間死亡的小鼠在死亡后立即秤取體質(zhì)量(g)和肺臟重量(g)。給藥7日后仍然存活的小鼠斷頸處死,秤取體質(zhì)量和肺臟重量。計算肺指數(shù)和肺炎抑制率。
肺指數(shù)=肺臟重量(g)/體質(zhì)量(g)×100
抑制率(%)=(模型組肺指數(shù).實驗組肺指數(shù))/模型組肺指數(shù)×100%
1.2.6 病毒感染小鼠肺部組織中流感病毒含量的測定 將上述實驗小鼠的肺臟稱重,按每0.1 g肺組織加1 ml的比例加入生理鹽水,組織勻漿器中研磨制成的勻漿液,1500 rpm/10 min離心,取上清液用血凝實驗測定流感病毒的滴度(血凝單位Hμ/g)。
1.2.7 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS10.0版本進行數(shù)據(jù)處理。計量資料比較采用ANOVA.LDS, 計數(shù)資料比較采用秩和檢驗,質(zhì)反應指標用χ2檢驗,以P
2 結果
2.1 對流感病毒性肺炎小鼠的保護作用 流感病毒FM1給小鼠滴鼻后,連續(xù)觀察7 d,F(xiàn)M1感染的肺炎小鼠死亡發(fā)生在感染后的第3、4和5 d。模型組小鼠在第3、4和5 天分別死亡4、4和2只,死亡率100%。雙黃連片3個劑量組的小鼠死亡數(shù)隨著劑量的增加而減少,對流感病毒性肺炎小鼠的死亡保護率分別為100%、80%和50%;小鼠的存活時間隨著劑量的增加逐漸增高,與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P
2.2 對腺病毒性肺炎小鼠的保護作用 腺病毒ADV3給小鼠滴鼻后,連續(xù)觀察7 d,感染的肺炎小鼠死亡發(fā)生在感染后的第3~5天。模型組小鼠在第3、4和5 d分別死亡3、6和1只,死亡率100%。表2結果顯示,雙黃連片3個劑量組的小鼠死亡數(shù)隨著劑量的增加而減少,對腺病毒性肺炎小鼠的死亡保護率分別為80%、60%和40%;小鼠的存活時間隨著劑量的增加逐漸增高,與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P
3 討論
雙黃連是我國醫(yī)學的傳統(tǒng)方劑,具有辛涼解表、清熱解毒之功效?,F(xiàn)代醫(yī)學研究表明,雙黃連具有廣譜抗菌、抗病毒、增強免疫力等多種生物活性。在臨床應用較廣泛,主要有注射液、粉針劑、片劑等多種劑型。雙黃連片劑由于其攜帶方便,服用簡單,療效確切,且沒有明顯的毒副作用,深受廣大醫(yī)生和患者的喜愛,在臨床治療上得到廣泛應用。
據(jù)文獻報道,雙黃連有明顯的體內(nèi)、體外抗病毒作用[4]和廣泛的抑菌、殺菌作用[7]。本實驗通過建立小鼠病毒性肺炎模型,觀察了雙黃連片在小鼠體內(nèi)抗流感病毒和腺病毒的作用,通過比較發(fā)現(xiàn),其抗病毒效果明顯優(yōu)于臨床常用抗病毒藥物病毒唑,因此雙黃連片是一種較好的高效低毒的抗病毒藥物,我們的研究為其臨床應用和進一步研究提供了一定的實驗依據(jù)。
由病毒或細菌感染所引起的呼吸道疾病,從臨床表現(xiàn)及三大常規(guī)檢查,有時很難區(qū)分;而病原學診斷又受到諸多因素的限制,所以在臨床治療中,濫用抗生素的現(xiàn)象較為普遍,并由此產(chǎn)生了菌群失調(diào)、耐藥性和抗生素的毒性反應等嚴重的不良反應和副作用。綜合實驗結果表明,雙黃連具有明顯的抗流感病毒和腺病毒作用,確如有些文獻指出:它能很好的彌補抗生素和抗病毒藥物的不足[8.10],將會廣泛用于病毒感染引起的呼吸系統(tǒng)疾病的預防和治療。
參考文獻
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摘要:目的:研究悅肝膠囊對酒精性肝損傷小鼠肝臟的保護作用。方法:km種小鼠隨機分正常組、模型組(56度二鍋頭白酒14 ml・kg-1・d-1)、東寶肝泰組(0.8 g・kg-1・d-1,56度二鍋頭白酒14 ml・kg-1・d-1)、悅肝膠囊大劑量組(10 g・kg-1・d-1,56度二鍋頭白酒14 ml・kg-1・d-1)、悅肝膠囊中劑量組(5 g・kg-1・d-1,56度二鍋頭白酒14 m1・kg-1・d-1)、悅肝膠囊小劑量組(2.5 g・kg-1・d-1,56度二鍋頭白酒14 ml・kg-1・d-1)、連續(xù)灌胃6周,眼球采血,進行生化測定丙氨酸轉(zhuǎn)移酶(alt)、甘油三酯(tg)、超氧化物歧化酶(sod)、丙二醛(mda);取出肝左葉按組織化學方法觀察琥珀酸脫氫酶(sdh)、酸性磷酸酶(acp)活性,油紅o法顯示中性脂肪。結果:悅肝膠囊可明顯抑制alt活性巴(p<0.05),降低tg、mda含量(p<0.05),提高sod活性(p<0.05);組織化學觀察表明,損傷組sdh活性下降,acp活性增高,脂滴增多。悅肝膠囊可減輕上述肝損傷程度。結論:悅肝膠囊對酒精中毒小鼠肝臟損傷有一定的防治作用。
關鍵詞:悅肝膠囊; 酒精性肝損傷; 組織化學; 生物化學
據(jù)文獻報道[1],酒精性肝病的發(fā)病率與酒精消耗平行,飲酒量越大其發(fā)病率越高,酒精中毒對肝臟的損害較其它組織、器官更嚴重,悅肝膠囊主要由葛根、丹參、西洋參、麥冬等中藥組成。臨床資料表明此方具有改善肝炎患者癥狀、恢復肝功能、調(diào)節(jié)免疫功能的作用。為探討悅肝膠囊的作用機理本實驗觀察了悅肝膠囊對酒精所致的肝損傷小鼠血清氧自由基相關指標及其對肝細胞酶活性變化的影響。
1 材料和方法
1.1 實驗動物km種雄性小鼠,體重為(20±2)g,延邊大學醫(yī)學院實驗動物科提供,于室溫18~20 ℃普通飼料喂養(yǎng),自由攝食、飲水。動物合格證:scxk2002-2005。
1.2 藥物與試劑悅肝膠囊由延邊大學長白山天然藥物研究中心提供。制備方法:葛根30 g,丹參30 g,麥冬20 g,西洋參20 g,加蒸餾水煮1 h后過濾,濾出液備用,把原藥再煮1 h后過濾,把第1次濾出液和第2次濾出液混合,濃縮成100 ml即得。實驗用酒為北京二鍋頭酒廠生產(chǎn)的56度二鍋頭白酒。東寶肝泰為中國通化東寶藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品。alt,tg試劑盒為中生北控生物科技有限公司產(chǎn)品。sod,mda試劑盒為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。
1.3 主要儀器日本olympus萬能顯微鏡,芬蘭mk-3酶標儀,德國zkl5超低溫高速離心機,北京天地百年科技有限公司td一2000真彩色病理細胞顯微分析系統(tǒng),美國starlet221恒冷箱切片機。
1.4 方法將60只km種小鼠隨機分為正常組、酒精損傷組、東寶肝泰組、悅肝膠囊大劑量組、悅肝膠囊中劑量組、悅肝膠囊小劑量組。藥物對照組給予0.8 g/kg體重東寶肝泰,藥物組分別給予10,5,2.5 g/kg 體重悅肝膠囊,正常組、模型組以等體積生理鹽水灌胃,30 min 后除正常組外其余組均給予56度二鍋頭白酒14 ml/kg體重灌胃。小鼠連續(xù)灌胃6周,于末次灌胃24h ,眼球采血,分離血清,用酶標儀測sod活性和mda含量;快速斷頭處死小鼠,取出肝左葉進行組織化學觀察。
1.5 觀察指標alt活性采用賴氏法;tg含量按酶比色法;血清sod活性按黃嘌呤氧化酶法;mda含量按硫代巴比妥酸法。
肝組織冰凍切片,切片厚約8 μm,進行組織化學染色。亞鐵氰化鉀法顯示琥珀酸脫氫酶,gomori法顯示酸性磷酸酶活性,油紅o法顯示中性脂肪,在萬能相差顯微鏡下觀察并拍片。
1.6 統(tǒng)計學方法所有數(shù)據(jù)以±s表示,應用spss10.0統(tǒng)計軟件進行方差分析。
2 結果
2.1 組織化學
2.1.1 琥珀酸脫氫酶(sdh)染色結果sdh活性在光鏡下顯示為紫藍色顆粒。正常組sdh活性強,顆粒多,染色深。模型組sdh活性減弱,紫藍色顆粒減少,染色淺。藥物對照組及藥物組sdh活性均較模型組增強,顆粒多,染色深。
2.1.2 酸性磷酸酶(acp)染色結果acp活性呈棕黑色沉淀。正常組acp活性弱,酶顆粒染色較淺,均勻一致。模型組acp活性增強,顆粒多,染色深。藥物對照組與藥物組acp活性均減弱,顆粒染色較淺。
2.1.3 中性脂肪用油紅o法染色,在正常小鼠肝細胞內(nèi)可見少量桔紅色的圓形脂滴,而模型組小鼠肝細胞內(nèi)顯示較多的大小不一的圓形脂滴。悅肝膠囊組脂滴減少。
2.2 血清學改變見表1~2。
表1 各組血清alt,tg比較(略)
與正常組比較,#p<0.01,與損傷組比較*p<0.01
表2 各組血清sod活性和mda含量比較(略)
與正常組比較,*p<0.05,與模型組比較,#p<0.05
3 討論
酒精性肝病是由于長期大量飲酒所致的肝臟疾病?,F(xiàn)代醫(yī)學認為其可能的發(fā)病機制為機體的免疫反應異常,自由基的產(chǎn)生和脂質(zhì)過氧化,生物膜的損傷,肝細胞代謝紊亂等[2]。
在本實驗中觀察到酒精性肝損傷時肝血清內(nèi)alt活性和tg含量有明顯變化,其酶活性和含量變化可反映酒精導致肝損傷的嚴重程度。酒精中毒引起的肝損傷與酒精的代謝產(chǎn)物乙醛的直接毒性有關[3~4],乙醛可使肝細胞內(nèi)線粒體受損,而使肝細胞對脂肪的分解功能低下,此時機體可動員皮下脂肪組織的脂肪酸向肝內(nèi)轉(zhuǎn)移,致使血清tg含量增高。本實驗結果表明:模型組與正常組、東寶肝泰組、悅肝膠囊組相比較血清tg含量均有顯著差異,p<0.01;組織化學染色顯示損傷組肝細胞內(nèi)可見較多的桔紅色脂滴沉著,其余各組均見少量脂滴。說明悅肝膠囊對肝臟脂質(zhì)代謝起到一定的調(diào)節(jié)作用,可能主要通過悅肝膠囊中的丹參促進了脂肪在肝中的氧化作用,從而降低了肝脂的含量[5]。alt主要分布于線粒體內(nèi),且其活性是肝細胞損害的敏感指標[6]。當肝組織發(fā)生損傷或炎癥時,因能量障礙而致細胞膜通透性增加,使肝細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)氨酶釋放入血引起血清轉(zhuǎn)氨酶活性升高,并在一定程度上反映肝細胞壞死和損傷程度[7]。悅肝膠囊可明顯降低酒精所致肝損傷的alt升高,具有恢復肝功能作用。
超氧化物歧化酶(sod)作為體內(nèi)重要的抗氧化酶,它能使超氧化物陰離子自由基變?yōu)檫^氧化氫和氧離子,從而減少脂質(zhì)過氧化反應,使機體細胞和組織免受損傷。當機體氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡時就會產(chǎn)生大量的自由基,最終形成過氧化脂質(zhì)的分解產(chǎn)物之一是丙二醛(mda),因此通過測定mda可以間接反映體內(nèi)自由基產(chǎn)生和損傷程度,可以說自由基所引起的脂質(zhì)過氧化反應仍是誘發(fā)酒精性肝損傷的重要原因之一[8]。酒精性肝損傷的組織損傷與sod、mda之間存在密切關系。本實驗結果表明:模型組與正常組、東寶肝泰組、悅肝膠囊組相比較sod活性、mda含量均有顯著差異,p<0.05。說明酒精引起的肝損傷中有大量自由基產(chǎn)生,悅肝膠囊能使酒精性肝損傷小鼠肝血清sod活性增強,抑制mda活性,并使之含量降低,可能與方中西洋參的抗氧化作用有關[9]。
陳子馨等[10]提出酶組織化學是在研究酒精性肝損傷中具有早期及特征性的指標,是必不可少的重要檢測手段。琥珀酸脫氫酶(sdh)是在檸檬酸循環(huán)中,催化琥珀酸與延胡索酸之間反應的一種酶。它存在于所有有氧呼吸細胞的線粒體內(nèi)膜,是線粒體內(nèi)膜的標志酶。sdh活性的變化與線粒體損傷同時出現(xiàn),與線粒體的數(shù)目平行升降。因此,sdh可代表線粒體能量代謝,sdh的活性變化可作為線粒體損傷程度檢測的敏感指標之一。酸性磷酸酶(acp)主要存在于溶酶體內(nèi),是溶酶體的標志酶,當溶酶體膜受損、膜的穩(wěn)定性降低時溶酶體膜的通透性增強,屏障作用減弱,致使acp等水解酶滲入胞質(zhì),酶活性增強[11],一方面參與吞噬消化變性壞死結構,另一方面水解正常細胞結構,加速細胞變性壞死過程。本實驗在灌入酒精后,sdh活性明顯降低、acp活性則明顯增強。而悅肝膠囊卻能使sdh活性增強,抑制acp活性。說明悅肝膠囊可能通過減輕線粒體損傷和保護溶酶體膜而對肝臟起到保護作用。其確切的機理有待于進一步研究。
悅肝膠囊中的葛根[12,13]可健脾化濕,疏肝活血,生津解渴,增加腦及冠狀血管血流量的作用,是民間百姓解酒毒的常用藥;丹參解酒瀉毒,理氣運脾,活血化瘀,具有保肝降酶,減輕肝細胞變性壞死,為解酒保肝藥;西洋參、麥冬、五味子起到輔助解酒的作用,諸藥合用具有解酒醒脾、益氣養(yǎng)胃的功效。并通過促進肝臟脂質(zhì)代謝,制脂質(zhì)過氧化,提高抗氧化酶活性,起到保肝作用。通過本實驗證明悅肝膠囊有明顯的保肝作用,為尋找有效的抗ald的中藥制劑提供了實驗依據(jù)。
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