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本文作者:胡嫦談家金葉建仁潘玉雯作者單位:南京林業(yè)大學(xué)森林資源與環(huán)境學(xué)院
植物線蟲在自然界里分布廣泛,幾乎每一種栽培植物都受到線蟲的寄生與危害。近10多年來,我國園林苗木生產(chǎn)規(guī)模不斷擴大,出口園林苗木業(yè)發(fā)展迅速,但苗木上的寄生線蟲一直限制其出口創(chuàng)匯。為了查明園林苗木根際寄生線蟲的種類,筆者從江蘇省常州地區(qū)一苗木出口基地采集多種園林苗木的根際土壤,對其中的寄生線蟲進行了分離鑒定,以期為進一步研究線蟲病害的檢疫和防治奠定基礎(chǔ)。
1材料與方法
1.1樣品的采集
2010年4月6日從江蘇省常州地區(qū)金壇市一苗圃內(nèi)采集24種園林苗木的根和根際土壤。24種園林苗木是:蒲葦(1年生),蘆竹(5年生),黃菖蒲(2年生),銀邊麥冬(3年生),金邊麥冬(2年生),花菖蒲(2年生),鳶尾(3年生),海壽花(1年生),金邊絲蘭(6年生),金森女貞(半年生),銀枝小蠟(1年生),扶芳藤(半年生),紅花月季(2年生),亞菊(1年生),灑金桃葉珊瑚(半年生),常春藤(半年生),濃香茉莉(1年生),美麗月見草(1年生),天人菊(1年生),紅花繼木(1年生),金邊黃楊(1年生),花葉玉簪(3年生),熊掌木(2年生),萱草(2年生)。每種苗木隨機采集3株,每株采集根和根際土壤500g作為一份樣品,共采集樣品72份,帶回實驗室后及時分離。
1.2線蟲的分離鑒定
根際土壤樣品中植物線蟲的分離采用淘洗———過篩———改良貝曼漏斗法分離[1]。分離出來的線蟲置于60~65℃水浴中處理2~3min,溫和殺死,然后用FG固定液(40%甲醛、甘油、蒸餾水的質(zhì)量比為10∶1∶89)進行固定。固定后的線蟲制成臨時玻片標本,在光學(xué)顯微鏡下根據(jù)形態(tài)特征描述(質(zhì)量特征)和形態(tài)特征測計值(數(shù)量特征)進行線蟲種類的鑒定。線蟲形態(tài)特征測計采用deMan公式。線蟲分類鑒定主要根據(jù)謝輝[2]分類系統(tǒng),同時參照Hunt[3]的分類系統(tǒng)。
2結(jié)果與分析
通過對72份根和根際土壤樣品中的寄生線蟲進行分離鑒定,初步發(fā)現(xiàn)6種根際線蟲,分別是不確定矮化線蟲,有頭矮化線蟲,同形真滑刃線蟲,燕麥真滑刃線蟲,辣椒絲尾墊刃線蟲和沼澤絲尾墊刃線蟲。
2.1不定矮化線蟲(圖1A)分類地位:墊刃目Tylenchida刺科Belonolaimidae矮化屬Tylencho-rhynchus[4]。
測量值:♀(n=20)L=692.1±62(553.1~818.5)μm;a=28.7±2.7(24.8~34.6);b=5.1±0.5(4.5~6.3);c=13.0±3.2(5.3~17.7);c''''=4.0±2.2(2.5~10.6);V=56.1±2.4(53.4~62.1);V''''=61.4±5.0(58.1~76.5);St=17.7±3.9(11.0~22.7)μm;MBL=16.9±2.2(14.2~20.8)μm;MBW=10.6±2.0(5.7~13.6)μm;tail=51.7±7.9(40.2~68.8)μm。形態(tài)描述:雌蟲圓筒形,中等大小,蟲體經(jīng)溫?zé)釟⑺篮笊韵蚋姑鎻澢贁?shù)呈開放螺旋形。體環(huán)較細。唇區(qū)半圓形,稍縊縮或明顯縊縮,少數(shù)不縊縮。頭架稍硬化。口針強壯,基部球圓形,前緣向后傾斜。中食道球發(fā)達,卵形,與食道體部分開。食道峽部窄,食道腺梨形,與腸交界清楚。單卵巢,卵母細胞單列,受精囊圓形,排列對稱,充滿圓形精子。尾近圓筒形,末端圓,有環(huán)紋。雄蟲未見。寄主為蒲葦、金森女貞、銀枝小蠟、濃香茉莉、美麗月見草。
2.2有頭矮化線蟲(圖1B)分類地位:墊刃目刺科矮化屬[5]。
測量值:♀(n=25)L=639.9±41.7(640.2~811.0)μm;a=27.5±2.6(23.3~35.7);b=5.3±0.4(4.6~6.4);c=13.3±2.9(10.7~22.9);c''''=3.6±1.6(2.5~3.6);V=56.2±2.4(51.7~63.9);V''''=61.2±4.4(56.12~79.6);St=21.2±2.4(10.6~23.6)μm;MBL=18.0±2.0(12.7~21.2)μm;MBW=11.6±1.4(10.0~13.37)μm;tail=52.62±7.3(48.0~66.5)μm。形態(tài)描述:雌蟲蟲體經(jīng)溫?zé)釟⑺篮髲澢伞癈”形,體紋細。頭部較高,唇區(qū)圓,突出,基部縊縮。頭架較弱,口針強壯,基部球圓形,向后傾斜。中食道球卵圓形,中食道球瓣發(fā)達。食道腺長梨形,與腸交界明顯。陰門橫裂,雙生殖腺,對伸,卵母細胞單行排列;受精囊小,內(nèi)有精子有時不明顯。尾近圓錐形,尾端無環(huán)紋,形狀不一,但常呈心形突出于體環(huán)。雄蟲未見。寄主為黃菖蒲、金邊麥冬、花葉玉簪、金邊絲蘭、金森女貞、扶芳藤、紅花月季、熊掌木、亞菊、常春藤、銀枝小蠟、濃香茉莉、美麗月見草、金邊黃楊。
2.3同形真滑刃線蟲(圖1C)分類地位:滑刃目Aphelenchida真滑刃科Aphelenchidae真滑刃屬Aphelenchus。
測量值:♀(n=18)L=629.7±81.4(514.7~817.8)μm;a=30.0±2.8(23.2~33.7);b=5.5±0.9(4.2~7.7);b''''=4.5±1.5(2.8~9.5);c=26.6±3.8(16.4~31.6);c''''=2.4±0.3(1.9~3.1);V=76.1±1.2(73~78.1);V''''=79.1±1.6(75.5~82.4);St=15.0±3.0(8.6~19.8)μm;MBL=17.8±2.2(14.6~21.6)μm;MBW=12.2±1.9(9.6~16.8)μm;tail=22.8±4.2(18.4~34.1)μm。形態(tài)描述:雌蟲體圓筒形,溫?zé)釟⑺篮笊熘被蚵韵蚋姑鎻澢sw表環(huán)紋較細。唇區(qū)低,前端平圓,不縊縮。口針較長,無口針基部球。食道前體部圓筒形,后段接近中食道球處稍縊縮;中食道球大,橢圓形,食道峽部很短。食道腺長葉狀,從背面覆蓋腸。陰門橫裂,位于體中后部,陰門唇稍突出,陰道稍向前傾斜。單卵巢,前伸,卵母細胞單行排列。尾圓錐形,末端鈍圓或稍平。尾較長,為18.4~34.1μm。雄蟲未見。寄主為蒲葦、銀邊麥冬、金邊麥冬、鳶尾、花葉玉簪、金森女貞、扶芳藤、亞菊、灑金桃葉珊瑚、銀枝小蠟、濃香茉莉、美麗月見草、天人菊、紅花繼木。
2.4燕麥真滑刃線蟲(圖1D)分類地位:滑刃目真滑刃科真滑刃屬。
測量值:♀(n=25)L=723.7±98.9(590.6~817.4)μm;a=31.7±1.7(29.2~35.0);b=5.8±0.7(4.6~6.9);b''''=4.1±0.5(3.1~5.0);c=28.6±2.9(22.6~33.4);c''''=2.2±0.3(1.8~2.9);V=76.7±1.4(74.1~79.8);V''''=79.5±1.6(76.5~82.5);St=15.3±2.8(11.3~19.5)μm;MBL=18.9±3.1(15.0~23.0)μm;MBW=11.7±2.0(8.5~16.1)μm;tail=22.4±4.1(15.3~29.5)μm。♂(n=6)SP=27.9±2.7(27.1~29.6)μm;Gub=15.7±1.4(13.8~16.4)μm。形態(tài)描述:雌蟲蟲體圓筒形,兩端稍變細。經(jīng)溫?zé)釟⑺篮舐韵蚋姑鎻澢陉庨T稍前處體最寬。體表環(huán)紋細。唇區(qū)低,前端平圓,不縊縮。口針較長,長11.3~19.5μm。口針基部稍變粗,無基部球。食道體部圓筒形,中食道球大,呈卵圓形,食道峽部很短,食道腺長葉狀,從背面覆蓋腸,覆蓋長度為體寬的3倍左右。陰門橫裂,位于體中后部74%~80%處,陰道壁厚,稍向前傾斜,陰門唇突起。單卵巢,前伸,常延伸到體中部之前,接近食道腺的末端。卵母細胞部分單行排列,部分雙行排列。肛門前唇突起。尾較短,圓筒形,末端半圓或?qū)拡A形。雄蟲體前部與雌蟲相似。交合刺細,長27~30μm,成對。引帶長14~16μm。尾圓錐形。有交合傘,具有4對交合傘脊,肛門區(qū)1對,尾端3對。寄主為蒲葦、金邊麥冬、金森女貞、亞菊、常春藤、濃香茉莉、天人菊。
2.5辣椒絲尾墊刃線蟲(圖1E)分類地位:墊刃目Tylenchida墊刃科Tylenchidae絲尾墊刃屬Filen-chus[6-7]。
測量值:♀(n=50)L=488.0±79.7(374.2~634.2)μm;a=30.5±2.6(25.4~35.2);b=5.7±0.6(4.8~7.0);c=5.4±0.3(4.1~6.3);c''''=10.3±1.2(8.2~12.4);V=63.7±1.9(59.4~67.3);V''''=78.2±2.5(73.7~84.6);St=7.7±1.3(6.2~11.0)μm;MBL=8.92±1.8(6.8~12.7)μm;MBW=5.4±1.3(3.1~7.4)μm;tail=89.3±10.7(73.0~112.1)μm。形態(tài)描述:雌蟲蟲體小,經(jīng)溫?zé)釟⑺篮笙x體向腹面彎曲或略直,蟲體兩端漸變細。角質(zhì)層環(huán)細。頭部連續(xù)或微縊縮,前端窄、平或平圓,頭架骨化弱。口針弱,基部球小,呈凸緣狀。食道前體部近柱狀;中食道球紡錘形,肌肉質(zhì),瓣弱;峽部細。食道腺長梨形,與腸交界清楚。陰門橫裂,陰門唇無變化。陰道斜向前伸。單卵巢,前伸,卵母細胞單行排列;受精囊卵圓形,縊縮不明顯。尾細長,圓錐形,尾直或后部不規(guī)則彎,尾端銳尖或鈍尖,尾稍長于肛陰距。雄蟲未見。寄主為蒲葦、蘆竹、黃菖蒲、銀邊麥冬、萱草、金邊麥冬、鳶尾、花菖蒲、海壽花、熊掌木。
2.6沼澤絲尾墊刃線蟲(圖1F)分類地位:墊刃目墊刃科絲尾墊刃屬[8]。
測量值:♀(n=25)L=512.1±58.0(457.0~685.6)μm;a=33.8±2.3(31.2~38.5);b=5.9±0.6(5.2~7.3);c=4.2±0.6(2.8~5.6);c''''=14.9±2.4(11.0~19.5);V=58.4±3.2(50.2~63.0);V''''=77.2±3.8(62.9~81.3);St=12.7±1.4(11.5~15.2)μm;MBL=9.2±1.6(5.0~13.0)μm;MBW=4.8±1.0(3.0~7.0)μm;tail=123.6±21.0(95.0~177.3)μm。形態(tài)描述:雌蟲蟲體經(jīng)溫?zé)釟⑺篮笊詮澢膊恐毙危攮h(huán)紋。體前部漸尖,唇區(qū)無縊縮,表皮紋細弱。口針長11.5~15.2μm,口針基部球明顯。中食道球紡錘形,中食道球腔明顯,球形。食道腺倒梨形,與腸分界明顯。卵巢直形。尾較長,尾端尖銳。雄蟲未見。寄主為蘆竹、黃菖蒲、萱草、鳶尾、玉簪、花菖蒲、海壽花、灑金桃葉珊瑚、金邊麥冬。
3結(jié)論與討論
從常州金壇一苗圃地24種園林苗木采集的72份根及根際土壤樣品,初步分離鑒定出6種線蟲。
已有報道從同一苗圃地采集10種園林苗木根際土壤樣品分離鑒定出雙宮螺旋線蟲、林伯滑刃線蟲和喜悅平滑墊刃線蟲3種寄生線蟲[9]。矮化線蟲屬已報道130多種,主要在根部外寄生,但是在某些條件下也可以侵入根內(nèi)轉(zhuǎn)為內(nèi)寄生。不確定矮化線蟲的寄主有煙草、玉米、茶等,在廣東、貴州等均有分布[6,10]。筆者在蒲葦、金森女貞、銀枝小蠟、濃香茉莉和美麗月見草上分離發(fā)現(xiàn),這5種園林苗木均為不確定矮化線蟲的新寄主,同時該種線蟲亦為江蘇省新記錄種。有頭矮化線蟲的寄主有牡丹、香菜等,在天津、新疆等均有分布。筆者在黃菖蒲、金邊麥冬、花葉玉簪、金邊絲蘭、金森女貞、扶芳藤、月季、熊掌木、亞菊、常春藤、銀枝小蠟、濃香茉莉、美麗月見草和金邊黃楊上分離發(fā)現(xiàn)。這14種園林苗木均為有頭矮化線蟲的新寄主,同時該種線蟲亦為江蘇省新記錄種。真滑刃線蟲屬世界報道約30個種,我國有10多種[2]。同形真滑刃線蟲的寄主有馬鈴薯、檸檬等,在我國北京、遼寧、山西等均有分布。另外,有報道在江蘇的楊樹根際土壤中分離到該線蟲[11]。
筆者在蒲葦、銀邊麥冬、金邊麥冬、鳶尾、花葉玉簪、金森女貞、扶芳藤、亞菊、灑金桃葉珊瑚、銀枝小蠟、濃香茉莉、美麗月見草、天人菊和紅花繼木上分離發(fā)現(xiàn)。這14種園林苗木均為同形真滑刃線蟲的新寄主。燕麥真滑刃線蟲的寄主植物眾多,生長于包括芭蕉、菠蘿、辣椒等在內(nèi)的70多種植物根際土壤中,在我國分布上海、天津、山西、遼寧等14個省市,在江蘇省多種苗木根際土壤中也分離得到[12]。另外,有報道該線蟲可危害多種蘑菇[10]。筆者在蒲葦、金邊麥冬、金森女貞、亞菊、常春藤、濃香茉莉和天人菊上分離發(fā)現(xiàn)。除濃香茉莉外,其余6種均為燕麥真滑刃線蟲的新寄主。絲尾墊刃屬線蟲的有效種有80多種,我國報道的有10多種[2]。辣椒絲尾墊刃線蟲的寄主有辣椒、西瓜等,在我國香港、上海等均有分布[6,13]。筆者在蒲葦、蘆竹、黃菖蒲、銀邊麥冬、萱草、金邊麥冬、鳶尾、花菖蒲、海壽花和熊掌木上分離發(fā)現(xiàn)。這10種園林苗木均為辣椒絲尾墊刃線蟲的新寄主,同時該種線蟲亦為江蘇省新記錄種。沼澤絲尾墊刃線蟲的寄主有大豆等,在我國的吉林有分布。
筆者在蘆竹、黃菖蒲、萱草、金邊麥冬、鳶尾、玉簪、花菖蒲、海壽花、灑金桃葉珊瑚上分離發(fā)現(xiàn)。江蘇常州作為全國較大的園林苗木生產(chǎn)基地之一,擁有比較優(yōu)良的生產(chǎn)出口條件。然而國際口岸對苗木寄生線蟲的檢疫要求也愈來愈高,寄生線蟲已大大制約了常州花木的出口創(chuàng)匯。筆者在前期工作的基礎(chǔ)上繼續(xù)對土壤樣品中的寄生線蟲進行鑒定,目前鑒定工作已基本結(jié)束,共鑒定出常州地區(qū)園林苗木根際寄生線蟲6屬14種,部分屬種已另文發(fā)表。由于此次研究采集的寄主和地區(qū)有限,園林苗木根際寄生線蟲的種類應(yīng)遠不止這些,今后還應(yīng)加強不同地區(qū)、不同寄主以及寄主不同部位的寄生線蟲種類調(diào)查,只有這樣,才能為苗木線蟲的檢疫提供更有價值的參考。