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      不同微生物菌落特征

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      不同微生物菌落特征

      不同微生物菌落特征范文第1篇

      全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)/分析儀激發(fā)微生物快檢全新創(chuàng)新應(yīng)用

      迅數(shù)自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀/分析儀(圖1)結(jié)合常規(guī)微生物培養(yǎng)基,只需操作PC,一臺(tái)儀器即可實(shí)現(xiàn)8大創(chuàng)新應(yīng)用。

      菌落總數(shù)的自動(dòng)計(jì)數(shù)

      在菌落自動(dòng)計(jì)數(shù)方面,儀器可以處理傳統(tǒng)的傾注法平板,涂布法平板,也可以處理螺旋接種平板和濾膜法平板;這項(xiàng)功能可以促進(jìn)環(huán)境衛(wèi)生、食品安全檢驗(yàn)中“菌落總數(shù)”測(cè)定項(xiàng)目的自動(dòng)化實(shí)施。自動(dòng)計(jì)數(shù)菌落的速度高于500個(gè)菌落/秒,最小可以分辨的菌落直徑可達(dá)0.01mm:可構(gòu)建專用計(jì)數(shù)模板以適應(yīng)復(fù)雜實(shí)驗(yàn)室環(huán)境,計(jì)數(shù)誤差控制在10%以內(nèi)。“迅數(shù)”是采用最多的自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀品牌。

      顯色培養(yǎng)基致病菌菌落自動(dòng)計(jì)數(shù)

      2010年國(guó)家頒布了新標(biāo)準(zhǔn)GB4789.3-2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)》。標(biāo)準(zhǔn)中的第2法――大腸菌群平板計(jì)數(shù)法,最少只需42小時(shí)即可得大腸菌群數(shù)。新標(biāo)準(zhǔn)中的大腸菌群平板計(jì)數(shù)法分兩步:VRBA平板計(jì)數(shù)和BGLB肉湯管復(fù)發(fā)酵證實(shí)。第一步:VRBA培養(yǎng)基培養(yǎng)后,對(duì)平板上大腸菌群的典型菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)的要求是:選取菌落數(shù)在30~150的平板,計(jì)數(shù)典型大腸菌群菌落――“紫紅色,有沉淀環(huán),且直徑不小于0.5毫米”的菌落。第二步:證實(shí)實(shí)驗(yàn),然后將證實(shí)實(shí)驗(yàn)中的陽性管比例數(shù)乘以上一步計(jì)數(shù)的菌落數(shù),再乘以稀釋倍數(shù),即得每克(或毫升)樣品中大腸菌群數(shù)。

      迅數(shù)全自動(dòng)菌落分析儀在GB 4789.3-2010上的快速計(jì)數(shù)應(yīng)用:迅數(shù)儀器的自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)能力可幫助實(shí)驗(yàn)人員快速準(zhǔn)確選取“菌落數(shù)在30~150的VRBA平板”;利用彩色高像素CCD成像及Colonfast圖象智能識(shí)別軟件,迅數(shù)菌落儀能迅速識(shí)別“紫紅色,有沉淀環(huán),且直徑不小于0.5毫米”的大腸菌群菌落,只需1秒就計(jì)算出大腸菌群典型菌落數(shù),實(shí)現(xiàn)大腸菌群計(jì)數(shù)的快速檢驗(yàn)。

      螺旋接種螺旋平板自動(dòng)計(jì)數(shù)

      螺旋接種平板計(jì)數(shù)方法是美國(guó)FDA從上世紀(jì)80年代開始采用,中國(guó)SN行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)“食品和化妝品中的菌落計(jì)數(shù)檢驗(yàn)方法――螺旋平板法”,于2009年2月1日正式在全國(guó)實(shí)施。儀器“螺旋接種平板分析模塊”根據(jù)美國(guó)FDA螺旋計(jì)數(shù)法則和中國(guó)SN標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)進(jìn)行螺旋平板的自動(dòng)分析計(jì)數(shù)。如果企業(yè)購(gòu)置螺旋接種儀,將不必再重復(fù)購(gòu)置螺旋菌落分析儀。

      培養(yǎng)基質(zhì)控檢驗(yàn)/菌落形態(tài)分析

      儀器的菌落形態(tài)分析功能可以自動(dòng)完成對(duì)平板上所有菌落的形態(tài)分析(直徑、面積、圓度等)和直徑分布統(tǒng)計(jì),幫助微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)量控制的生物評(píng)價(jià)(如生長(zhǎng)率實(shí)驗(yàn)、菌落平均直徑/標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算等)。中國(guó)藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基室從2004年底就開始使用迅數(shù)菌落儀做培養(yǎng)基質(zhì)量控制。3M Petrifilm細(xì)菌總數(shù)測(cè)試片自動(dòng)分析計(jì)數(shù)

      3M Petrifilm測(cè)試片法是2008年進(jìn)入國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的菌落總數(shù)測(cè)定新方法,受到基層食品微生物實(shí)驗(yàn)室的極大歡迎。迅數(shù)G型菌落分析儀一機(jī)多用,支持最新食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB4789-2008中“3M Petrifilm細(xì)菌總數(shù)測(cè)試片”的自動(dòng)分析。

      微生物限度檢查濾膜平板自動(dòng)計(jì)數(shù)

      自動(dòng)完成限度檢查實(shí)驗(yàn)中濾膜法平板和培養(yǎng)法平板的菌落計(jì)數(shù)工作,并保留原始實(shí)驗(yàn)圖象作為最完整的實(shí)驗(yàn)記錄保存。

      管碟法/紙片法抑菌圈自動(dòng)測(cè)量

      對(duì)管碟法/紙片法平板上的任意位置、多個(gè)抑菌圈的自動(dòng)測(cè)量,準(zhǔn)確、客觀、重現(xiàn)性高。

      效價(jià)測(cè)定:儀器在完成抑菌圈自動(dòng)測(cè)量的基礎(chǔ)上進(jìn)行抗生素的二劑量法生物效價(jià)測(cè)定。

      抗生素殘留測(cè)定:在抑菌圈自動(dòng)測(cè)量的基礎(chǔ)上進(jìn)行抗生素殘留量測(cè)定。

      藥敏分析:儀器在完成抑菌圈自動(dòng)測(cè)量的基礎(chǔ)上與自帶內(nèi)置美國(guó)CLSl的紙片擴(kuò)散法(KB法)抗微生物藥物敏感性判別標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),自動(dòng)完成待測(cè)菌的藥敏特性判斷。

      β-內(nèi)酰胺酶類藥物(金玉蘭酶)檢驗(yàn):迅數(shù)“抑菌圈測(cè)量”模塊對(duì)單碟(每碟含4-12個(gè)抑菌圈)測(cè)量時(shí)間小于1秒,可在自動(dòng)完成平板上多個(gè)抑菌圈準(zhǔn)確測(cè)量的基礎(chǔ)上結(jié)合報(bào)告“β-內(nèi)酰胺酶類藥物檢驗(yàn)結(jié)果陽性或陰性”的衛(wèi)生部新標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,輕松實(shí)現(xiàn)舒巴坦敏感β-內(nèi)酰胺酶類物質(zhì)是否存在的自動(dòng)化分析。

      環(huán)境和測(cè)試用水質(zhì)量控制

      環(huán)境監(jiān)測(cè):空氣、水,實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面等的細(xì)菌數(shù)量定量和實(shí)驗(yàn)平板圖片保存;

      消毒監(jiān)測(cè):檢驗(yàn)手和高壓消毒物品的消毒滅菌效果的細(xì)菌定量;

      測(cè)試用水質(zhì)量控制:支持對(duì)含低量微生物的水樣進(jìn)行微生物定量的濾膜法平板計(jì)數(shù)。

      菌落計(jì)數(shù)器的應(yīng)用缺點(diǎn)分析

      目前,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室仍采用傳統(tǒng)的肉眼結(jié)合菌落計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)方法,即借助放大鏡的觀察,用計(jì)數(shù)筆點(diǎn)擊每一個(gè)菌落,計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)每一個(gè)點(diǎn)擊產(chǎn)生的壓力電子脈沖得出總數(shù)。該方法有以下幾大缺點(diǎn):

      識(shí)別和記數(shù)錯(cuò)漏:所有的計(jì)數(shù)都依靠對(duì)壓力脈沖產(chǎn)生次數(shù)的記錄,不同人員的操作產(chǎn)生的壓力不同就難免產(chǎn)生漏記,而且計(jì)數(shù)的結(jié)果也因操作人員對(duì)菌落的識(shí)別經(jīng)驗(yàn)不同而產(chǎn)生差異,系統(tǒng)偏差較大。

      標(biāo)記和修正不便:肉眼計(jì)數(shù)和菌落計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)都依靠計(jì)數(shù)筆在被統(tǒng)計(jì)的菌落上留下墨水筆跡來進(jìn)行標(biāo)記,因此在存在密集菌落的情況下就標(biāo)記不便,而且發(fā)現(xiàn)誤統(tǒng)計(jì)時(shí)需擦去墨水痕跡導(dǎo)致修正不便。

      效率低下:肉眼計(jì)數(shù)和菌落計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)都需要人工用肉眼識(shí)別每一個(gè)菌落,因此一旦樣品較多就會(huì)耗費(fèi)大量的時(shí)間,影響研究或是結(jié)果報(bào)告的效率。

      原始結(jié)果無法保存:在做完統(tǒng)計(jì)后,留下了一個(gè)統(tǒng)計(jì)數(shù)字,而對(duì)記錄和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果很重要的培養(yǎng)平板表面菌落生長(zhǎng)狀況卻因?yàn)槠桨宓南吹舳鵁o法保存。

      菌落計(jì)數(shù)/分析儀的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)

      菌落計(jì)數(shù)/分析儀器的原理是將獲取的菌落圖片數(shù)碼化,根據(jù)菌落目標(biāo)和培養(yǎng)基背景間的偏差(顏色和亮度差異)所顯示出的數(shù)學(xué)表達(dá)不同,將目標(biāo)從背景中智能識(shí)別出來。

      “人工計(jì)數(shù)模式”保留了菌落計(jì)數(shù)器的工作原理和工作方式:替代菌落計(jì)數(shù)器的放大鏡軟件可以對(duì)獲取圖象做任意比率放大,觀察更輕松;替代菌落計(jì)數(shù)器的壓力脈沖計(jì)數(shù)筆儀器可以讓我們用鼠標(biāo)點(diǎn)擊留下標(biāo)記來替代脈沖筆點(diǎn)擊留下墨水點(diǎn),計(jì)數(shù)更輕松更準(zhǔn)確更衛(wèi)生;儀器計(jì)數(shù)完畢自動(dòng)生成報(bào)告。

      不同微生物菌落特征范文第2篇

      果膠酶在工業(yè)上可用于果汁果酒澄清提取、果實(shí)脫皮、麻類脫膠、飼料添加劑、中藥營(yíng)養(yǎng)液深加工以及作為天然食品的防腐劑、改善果蔬的感官品質(zhì)等。[1][2]近年來,隨著我國(guó)果汁、果酒業(yè)的發(fā)展,果膠酶的需求也日益增加。目前關(guān)于果膠酶產(chǎn)生菌的研究主要集中在酶活較高的霉菌,對(duì)細(xì)菌的研究很少,然而霉菌生產(chǎn)果膠酶存在產(chǎn)酶周期長(zhǎng)、耗氧量多、菌絲易纏結(jié)等不足,因此篩選具有高酶活性細(xì)菌具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。[3]

      由于土壤中微生物大量存在,對(duì)其進(jìn)行分離時(shí)應(yīng)選擇適合于待分離微生物的生長(zhǎng)條件,如營(yíng)養(yǎng)成分、酸堿度、溫度和氧等要求,或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長(zhǎng),而抑制其他微生物生長(zhǎng)的環(huán)境,從而淘汰一些不需要的微生物。

      微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的單個(gè)菌落,通常是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而成的集合體。但值得指出的是,從微生物群體中經(jīng)分離生長(zhǎng)在平板上的單個(gè)菌落并不一定保證是純培養(yǎng)。因此,純培養(yǎng)的確定除觀察其菌落特征外,還要結(jié)合顯微鏡檢測(cè)個(gè)體形態(tài)特征后才能確定,有些微生物的純培養(yǎng)要經(jīng)過一系列分離與純化過程和多種生理生化反應(yīng)鑒定才能得到[4] 。

      2、材料與方法

      2.1 含菌樣品

      含菌樣品取自濟(jì)南市西郊小清河河道污泥土壤

      2.2 培養(yǎng)基

      (1)富集培養(yǎng)基[5] :牛肉膏5.0g/L、NaCl 5.0g/L、K2HPO4 1.0g/L、KH2PO4 0.3g/L、桔皮粉 20.0 g/L,pH 7.0。

      (2)固體初篩培養(yǎng)基[6-7]:K2HPO4 1.0g/L、MgSO4 0.5 g/L、NaNO3 3.0 g/L、FeSO4 0.01g/L、果膠2.0 g/L、瓊脂15.0g/L、pH7.0。

      (3)保存培養(yǎng)基[5]:桔皮粉2.0 g,用100mL蒸餾水煮沸30min,4層紗布過濾后定容至100mL,加入牛肉膏0.3g,蛋白胨1.0g、NaCl 0.5g、K2HPO4 0.1g、KH2PO40.03g、加瓊脂2.0g煮沸,pH7.0。

      (4)淀粉培養(yǎng)基[4] :蛋白胨10.0g/L、NaCl 5.0g/L、牛肉膏5.0/L、可溶性淀粉2.0g/L、瓊脂15~20g/L。

      (5)糖酵解培養(yǎng)基[4] :蛋白胨 10.0g/L、NaCl 5.0g/L、1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1~2mL/L、pH7.6。另配20%糖溶液(葡萄糖、乳糖)25mL。

      (6)蛋白胨水培養(yǎng)基[4] :蛋白胨5.0g/L、葡萄糖5.0g/L、K2HPO4 2.0g/L、pH7.0~7.2。

      2.3 方法

      2.3.1 菌株分離篩選

      采集土樣后制備菌懸液,之后進(jìn)行富集培養(yǎng)3~4天。梯度稀釋后進(jìn)行初篩,同時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù),而后對(duì)菌株進(jìn)行復(fù)篩,選取有最大水解圈的單菌落。之后劃線分離得到純的單菌落,最后對(duì)單菌落進(jìn)行保藏。

      2.3.2 菌株形態(tài)及部分特征觀察

      在潔凈的載玻片滴上一滴蒸餾水,使用牙簽挑取適量的分離到的菌株均勻涂布于載玻片上,風(fēng)干后熱固定,然后使用結(jié)晶紫染色,置于光學(xué)顯微鏡下觀察。

      2.3.3 掃描電鏡樣品的制備

      (1)將菌株用培養(yǎng)液洗滌1~2次,

      10000rpm離心5分鐘。

      (2)用2.5%的戊二醛,4℃固定3h。

      (3)0.1mol/L的磷酸緩沖液(pH7.2~7.4)洗滌3~4次,每次10分鐘。

      (4)用不同濃度的乙醇梯度脫水,每個(gè)梯度15分鐘,然后用無水乙醇脫水2次,每次15分鐘。

      (5)將菌液滴于蓋玻片上,濕法搓片,在干燥器內(nèi)自然干燥。

      2.3.4 生理生化實(shí)驗(yàn)[4]

      用固體淀粉培養(yǎng)基、葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基、蛋白胨水培養(yǎng)基對(duì)菌株分別研究淀粉水解、糖發(fā)酵、產(chǎn)酸反應(yīng)等微生物生理生化反應(yīng),并觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。

      2.3.5 生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

      由于對(duì)該細(xì)菌II的生長(zhǎng)條件不了解,因此對(duì)其生長(zhǎng)狀況進(jìn)行摸索,對(duì)以后發(fā)酵條件的優(yōu)化有一定的幫助。接種7.5%(體積比)細(xì)菌II:菌懸液于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,分別于25、30 和35℃,搖床(150 r/min)培養(yǎng),確定其培養(yǎng)液的最大吸收波長(zhǎng)為440 nm,每12 h在440nm處測(cè)定吸光度。

      3、結(jié)果與分析

      3.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

      3.1.1 菌落特征及計(jì)數(shù)

      富集培養(yǎng)和初篩后,共得到兩株菌株,其中一株為霉菌,編號(hào)為I。另一株為細(xì)菌,編號(hào)為II,細(xì)菌II菌落的大小寬為0.8~1.0um,長(zhǎng)為2.5~3.0um。

      3.1.2 菌體形態(tài)觀察

      (1)光學(xué)顯微鏡下菌體形態(tài)

      光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)菌II,細(xì)胞呈短桿狀,兩端稍細(xì),無鞭毛,不滑動(dòng),革蘭氏染色為陽性。

      (2)細(xì)菌II的掃描電鏡觀察

      噴金結(jié)束后在掃描電鏡下觀察菌的表面形態(tài)。在掃描電鏡下觀察菌II為梭狀,菌體表面無鞭毛且表面粗糙。

      3.1.3 菌株部分生理生化特性

      菌II甲基紅試驗(yàn)陽性,能水解淀粉,可以發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸但不產(chǎn)氣,不能利用乳糖。通過以上形態(tài)與部分生理生化特性試驗(yàn),結(jié)合伯杰氏手冊(cè)和真菌志手冊(cè)[8],推測(cè)菌II屬于細(xì)菌中的芽孢桿菌屬(Bacillus Cohn)。

      3.2結(jié)論

      (1)從自然界中篩選到一株果膠分解菌II:其菌落特點(diǎn)為圓形、濕性、邊緣整齊、中部隆起的黃色不透明菌落;光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)菌II,細(xì)胞呈短桿狀,兩端稍細(xì),無鞭毛,不滑動(dòng),革蘭氏染色為陽性。

      (2)在掃描電鏡下觀察菌II為梭狀,菌體表面無鞭毛且表面粗糙。生理生化試驗(yàn)中,菌II甲基紅試驗(yàn)陽性,能水解淀粉,可以發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸但不產(chǎn)氣,不能利用乳糖,初步鑒定為芽孢桿菌屬(Bacillus Cohn)。

      (3)菌II生長(zhǎng)相對(duì)比較緩慢,在30℃下培養(yǎng)60h后細(xì)菌數(shù)量達(dá)到最大值,穩(wěn)定期可以延續(xù)到96h后。

      參考文獻(xiàn):

      [1]湯鳴強(qiáng),卞矛,李瓊?cè)A.米曲霉固體發(fā)酵生產(chǎn)果膠酶的研究[J].福建師范大學(xué)福清分校學(xué)報(bào),2006(2):32-35.

      [2]張紅霞,江曉路,牟海津,等.微生物果膠酶的研究進(jìn)展[J].生物技術(shù),2005,15(5):92-95.

      [3]朱宏莉,宋紀(jì)蓉,張嘉,等.果膠酶高產(chǎn)菌株的激光選育及發(fā)酵條件的優(yōu)化[J].食品科學(xué),2005,26(12):161-164.

      [4]沈萍, 陳向東主編,2007.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn).高等教育出版社,76-81.

      [5]王偉.產(chǎn)低溫果膠酶菌株的篩選、發(fā)酵條件及酶學(xué)性質(zhì)的研究[D].新疆農(nóng)業(yè)大學(xué),2006.

      [6]陳峰,俞吉安,張承康,等.果膠分解菌的簡(jiǎn)便篩選方法[J].微生物學(xué)雜志,1999,19(4):63.

      [7]錢微軍,陳海敏,陳建勇.大麻韌皮果膠分解菌株的分離及鑒定[J].紡織學(xué)報(bào),2006,27(11):52.54.

      不同微生物菌落特征范文第3篇

      同宗配合 homothallism 同一菌體中發(fā)生自我親和的有性生殖現(xiàn)象。

      異宗配合 heterothallism 自體不育個(gè)體在有性生殖時(shí)由兩個(gè)親和的不同型菌體進(jìn)行配合的現(xiàn)象。

      病毒 virus 由RNA或DNA及蛋白質(zhì)等組成的、專營(yíng)細(xì)胞內(nèi)感染和復(fù)制的一大類結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的微生物。

      亞病毒 subvirus 只具有RNA或DNA,或只具有某些蛋白質(zhì)組分,與病毒的生物學(xué)特征相類似的病原物。

      類病毒 viroid 一類亞病毒,的環(huán)狀單鏈RNA病原體,能自主復(fù)制。分兩類,一類在葉綠體中復(fù)制,如鱷梨日斑類病毒(ASBVd);另一類在胞核中復(fù)制,如馬鈴薯仿錘形塊莖類病毒(PSTVd)。

      病毒粒子 virion ,virus particle 又稱“病毒[粒]體”。結(jié)構(gòu)完整具有侵染性的單個(gè)病毒。

      核心 core 又稱”髓核”。病毒粒子的結(jié)構(gòu)單位,由病毒核酸及相關(guān)聯(lián)的蛋白質(zhì)組成,由核殼包裹。

      核[衣]殼 nucleocapsid 由核心及衣殼共同組成的病毒粒子結(jié)構(gòu)單位。

      衣殼 capsid 又稱“殼體”。病毒粒子的結(jié)構(gòu)單位,為包裹病毒核酸及與核酸相關(guān)聯(lián)的蛋白質(zhì)外殼。

      噬斑 plaque 病毒感染人工培養(yǎng)的單層細(xì)胞后由單個(gè)病毒粒子所產(chǎn)生的細(xì)胞裂解區(qū)。

      噬菌體 bacteriophage, phage 又稱“細(xì)菌病毒”。感染細(xì)菌的病毒,如λ噬菌體。

      微動(dòng)作用 oligodynamic action 全稱“微量動(dòng)力作用”。某些金屬元素在低濃度時(shí)表現(xiàn)出的抑菌作用。

      滑行 gliding 滑行細(xì)菌和藍(lán)細(xì)菌等在固體表面緩慢移動(dòng), 并形成有黏液軌跡的連續(xù)運(yùn)動(dòng)方式。

      群游[現(xiàn)象] swarming 細(xì)菌群體在固體或半固體培養(yǎng)基上從接種點(diǎn)向外進(jìn)行的協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)方式。

      抗生素 antibiotic 曾稱“抗菌素”。微生物生命過程中產(chǎn)生的具有生理活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物及其衍生物,在低濃度下有選擇性地抑制或干擾其他生物的正常生命活動(dòng),而對(duì)其自身無害。

      抗菌譜 antimicrobial spectrum 被一種抗生素或化學(xué)治療劑抑制或殺滅的微生物種類。

      扇形突變 sectoring,sector mutation 又稱“角變”。(1)菌落形態(tài)的局部變異,常呈折扇形。(2)在含不同細(xì)胞核群的真菌菌落上形成形態(tài)不同的扇形區(qū)域的現(xiàn)象。

      附加體 episome 又稱“游離基因”。細(xì)菌染色體外可獨(dú)立復(fù)制的質(zhì)粒,也能可逆地整合在宿主染色體中作為附加基因與其一起復(fù)制。

      質(zhì)粒 plasmid 微生物細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定地獨(dú)立存在于染色體外,能自我復(fù)制并傳遞到子代的雙鏈DNA分子。

      黏粒 cosmid 全稱“黏端質(zhì)粒”。含有λ噬菌體cos(黏性末端)位點(diǎn)的人工構(gòu)建克隆載體,可被包裝入噬菌體顆粒而有效地導(dǎo)入受體細(xì)菌。

      噬粒 phasmid, phagemid 一種能按照質(zhì)粒或者細(xì)菌噬菌體方式進(jìn)行復(fù)制的克隆載體。

      根際 rhizosphere 由植物根系與土壤微生物之間相互作用所形成的圈狀地帶。它以植物的根系為中心聚集了大量的細(xì)菌、真菌等微生物和蚯蚓、線蟲等土壤動(dòng)物。

      衛(wèi)星現(xiàn)象 satellitism 一種微生物在另一種微生物菌落鄰近處才能旺盛生長(zhǎng)繁殖的現(xiàn)象。

      菌種退化 strain degeneration 微生物群體中性能弱化的細(xì)胞占一定比例后導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降的現(xiàn)象。

      菌種改良 strain improvement 應(yīng)用微生物遺傳與變異理論,在已經(jīng)自然變異、人工誘變或雜交后的微生物群體中選出所需要的優(yōu)良菌種的過程。

      發(fā)酵 fermentation (1)利用微生物產(chǎn)生特定產(chǎn)物的過程。(2)無氧條件下生物體內(nèi)由一系列氧化還原反應(yīng)參與的獲得能量的代謝過程。

      醪液 mash 發(fā)酵工業(yè)中原料經(jīng)微生物發(fā)酵后的液態(tài)混合物。

      酸敗 spoilage, rancidity (1)由于微生物大量增殖,使發(fā)酵環(huán)境產(chǎn)生過量有機(jī)酸而導(dǎo)致發(fā)酵過程異常甚至停止的現(xiàn)象。(2)油脂或富含油脂食品存貯過程中,由于微生物或脂肪氧化酶作用產(chǎn)生游離脂肪酸、過氧化物和低分子酸類、醛類、酮類等分解產(chǎn)物的過程。

      霉變 mould deterioration 物質(zhì)因受霉菌污染、侵蝕而發(fā)生變質(zhì)的現(xiàn)象。

      大腸菌值 colititer 采用規(guī)定方法定量檢測(cè)到1個(gè)大腸菌群細(xì)胞所需的水樣毫升數(shù),為大腸菌指數(shù)的倒數(shù)。

      大腸菌指數(shù) coliindex 1L水中含有的大腸菌群的菌數(shù),用以表示水受污染的程度。

      病原體 pathogen 能使人、宿主動(dòng)物或植物等發(fā)生疾病的細(xì)菌、病毒、真菌、寄生蟲等。

      帶菌者 carrier 攜帶病原菌,但沒有臨床癥狀的個(gè)體。

      機(jī)會(huì)致病菌 opportunistic pathogen 又稱“條件致病菌”。只有在寄居部位發(fā)生改變、機(jī)體免疫功能下降或其他條件改變時(shí),才能夠引起疾病的細(xì)菌或真菌。

      釀造 brewing 利用微生物發(fā)酵制取食品的過程。

      陳釀 aging 又稱“后熟”。釀造酒類和食醋等發(fā)酵食品工藝中,為改善產(chǎn)品品質(zhì)而將完成主發(fā)酵的產(chǎn)品在特定環(huán)境中儲(chǔ)存的過程。

      曲 qu 用糧食或糧食的加工副產(chǎn)物培養(yǎng)微生物所制成的含有大量活菌體及其酶類的發(fā)酵劑。

      麩曲 bran qu 以麩皮為原料,接種純種微生物制備的一類糖化劑和發(fā)酵劑。

      不同微生物菌落特征范文第4篇

      關(guān)鍵詞:菌核;真菌;抑菌性;實(shí)驗(yàn)

      中圖分類號(hào):S6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1672-3198(2011)05-0289-01

      油菜菌核病又稱菌核軟腐病,俗稱白桿、空桿、麻桿、爛桿、霉蔸等,是由油菜菌核病菌引起的一種真菌性病害。防治主要采用農(nóng)業(yè)防治、化學(xué)防治等綜合防治的方法,雖然對(duì)生物防治的研究報(bào)道較多,但大部分研究結(jié)果仍然停留在實(shí)驗(yàn)室階段,對(duì)于利用生防細(xì)菌防治的研究主要為篩選試驗(yàn),對(duì)其防病機(jī)理缺乏深入研究。本實(shí)驗(yàn)取樣于不同油菜地的土壤進(jìn)行病原物的分離與鑒定,弄清楚油菜地常見的幾種真菌及其抑菌性,對(duì)于防治油菜相關(guān)病害很有意義。

      1 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

      采集油菜地的土壤進(jìn)行真菌分離純化,通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析對(duì)比它們之間的真菌種類有什么大同小異,分離出的真菌對(duì)油菜的生長(zhǎng)有什么樣的影響,有沒有使油菜致病。

      1.1 實(shí)驗(yàn)過程

      (1)樣本采集:采用五點(diǎn)采樣法分別采集剛收獲過后的菜地和表層1~35 cm深度范圍內(nèi)的土壤樣品,充分混勻后取定量土壤樣品制備土壤懸浮液。

      (2)土壤懸浮液的制備:稱取10g土壤置于盛有90mL無菌水的250 mL滅菌三角瓶?jī)?nèi),充分振蕩10min,制成10-1的稀釋液,然后進(jìn)行10倍倍比稀釋至10-3。

      (3)土壤真菌的分離:

      ①制備加有氯霉素和孟加拉紅的馬丁瓊脂培養(yǎng)基。

      ②用稀釋平板法,此種方法在土壤真菌分離中最常用,用無菌水將土壤稀釋后得到的懸浮液,將一定量稀釋懸浮液均勻涂抹于培養(yǎng)基上,菌落長(zhǎng)成后,將單個(gè)菌落挑出。

      ③培養(yǎng):將接種土壤浮液的平板倒置于28°的溫度區(qū)培養(yǎng)3-5天。

      ④挑菌純化:從長(zhǎng)有單菌落的平板中選取菌落轉(zhuǎn)接斜面。

      (4)真菌鑒定:真菌培養(yǎng)基采用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基。

      ①制備平板:將15-20毫升溶化后冷卻到50度左右的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中。

      ②接種:在培養(yǎng)基表面劃線接種。

      ③倒置平板:于最適溫度下培養(yǎng)1-2天。

      ④觀察菌落的形狀、大小、邊緣、表面、隆起形狀、透明度及培養(yǎng)基的顏色等。

      1.2 需重點(diǎn)研究的關(guān)鍵問題及解決思路

      設(shè)4個(gè)處理:(1)土壤未滅菌與菌核表面消毒;(2)土壤未滅菌與菌核表面未消毒;①土壤滅菌與菌核表面未消毒;②土壤滅菌與菌核表面消毒。

      孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基對(duì)于計(jì)數(shù)來說最常用,松膏培養(yǎng)基可兼顧計(jì)數(shù)、分離和鑒定,適用于大多數(shù)土壤真菌和植物病原真菌的分離,尤其適宜于木生真菌的分離,并且孢子與菌落同步形成,菌落不擴(kuò)展,可獲得較好的測(cè)數(shù)結(jié)果,是一種用途廣泛的培養(yǎng)基。土壤真菌中,無性態(tài)真菌(半知菌)占很大比重。無性態(tài)真菌中又以絲孢綱真菌所占份額最大。由于基本上無法通過生殖隔離試驗(yàn)來測(cè)定無性態(tài)真菌成員之間的親緣關(guān)系,在培養(yǎng)過程中,觀察真菌的形態(tài)特征和性狀,如菌落的顏色、分生孢子的形態(tài)和菌絲的顏色等。查看文獻(xiàn)從中學(xué)習(xí),思考每次的方案。

      1.3 實(shí)驗(yàn)主要設(shè)備、儀器及藥品

      (1)設(shè)備、儀器。

      天平,燒杯,電爐,試管,三角瓶,棉花,橡皮圈,標(biāo)簽紙,量筒,滅菌吸管,玻璃棒,鑷子,漏斗,分裝漏斗架,顯微鏡,玻片等。

      (2)藥品。

      葡萄糖,蛋白胨,1/3000孟加拉紅水溶液,鏈霉素,瓊脂,KH2PO4,MgSO4.7H2O,等。

      2 結(jié)果與分析

      從未滅菌土壤與表面消毒菌核、未滅菌土壤與表面未消毒菌核這兩個(gè)處理中從油菜菌核表面分別分離到4株和3株不同種類的真菌;其它兩處理未能誘捕到任何真菌,表明以上真菌來自土壤而非菌核。7株菌株純化后回接到表面消毒的菌核上。20d時(shí)從土壤中取出菌核,少數(shù)菌核破碎,大多數(shù)菌核變軟,表面長(zhǎng)有大量孢子,顯示已經(jīng)被分解。經(jīng)鑒定,這三個(gè)菌株分別屬于短帚霉、哈茨木霉菌和棘孢曲霉。

      3 小結(jié)與討論

      本試驗(yàn)研究表明,短帚霉、哈茨木霉菌、棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)Asp-1對(duì)油菜菌核萌發(fā)有較強(qiáng)的抑制作用,致死率均在78%以上。木霉菌作為生防菌已有很多的報(bào)道,木霉菌生防作用的生化機(jī)制主要包括:代謝幾丁質(zhì)酶、β-1,3-葡聚糖酶、蛋白酶等多種胞外酶,強(qiáng)烈水解植物病原真菌的細(xì)胞壁,抑制病原菌生長(zhǎng)與繁殖。但曲霉作為生防菌尚未見報(bào)道。將三述的三種真菌用于制作生防制劑,有助于肥田,提高土壤的活性,對(duì)保護(hù)農(nóng)業(yè)環(huán)境和提高食品安全很有效果,生物防治前景廣闊。

      參考文獻(xiàn)

      [1]陳天壽.微生物培養(yǎng)基的制造與應(yīng)用[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1995.

      [2]中國(guó)科學(xué)院南京土壤研究所微生物室.土壤微生物研究法 [M].北京:科學(xué)出版社,1985.

      [3]周德慶.微生物學(xué)教程[M].北京:高等教育出版社,2007.

      不同微生物菌落特征范文第5篇

      關(guān)鍵詞:清防蠟菌 實(shí)驗(yàn) 效果

      清防蠟是當(dāng)前油田生產(chǎn)的重要課題之一,傳統(tǒng)的采用清防蠟藥物投入的方式,巨頭作用時(shí)間短、污染環(huán)境、投入次數(shù)多以及投入成本高的特點(diǎn),導(dǎo)致清防蠟工藝的消耗較大。克拉瑪依油田通過反復(fù)試驗(yàn),針對(duì)是當(dāng)前陸梁或彩南油田原油中石蠟組分,選配出1組生物降解能力強(qiáng)的復(fù)配菌種。采用微生物清防蠟的主要原理,是通過微生物對(duì)原油中的石蠟進(jìn)行降解,從而改善原油的流動(dòng)性,增加油井產(chǎn)量。本文采用室內(nèi)試驗(yàn)的方式,對(duì)克拉瑪依油田采用的包含枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌等的負(fù)荷菌種的清防蠟效果進(jìn)行研究,結(jié)果表明該菌種能夠有效的清防蠟,具有較高的推廣價(jià)值。

      一、材料與方法

      1.實(shí)驗(yàn)材料

      本文所研究的對(duì)象是克拉瑪依油田采用的生物降解能力強(qiáng)的復(fù)配菌種,采用的油水樣是克拉瑪依彩南和陸梁油田的單井原油,原油的密度平均為0.867g/cm3,含蠟量平均為25.7%,含膠量平均為16.2%;油水樣屬于NaHCO型。所采用的培養(yǎng)基是從克拉瑪依油田的污水中加入硫酸鎂、氯化銨、磷酸氫二鈉等,并且保證培養(yǎng)液的pH值為7.0-7.2。

      2.試驗(yàn)方法

      2.1 樣品采集與檢測(cè)

      根據(jù)微生物清防蠟的特點(diǎn),結(jié)合克拉瑪依油田采油區(qū)的樣品參數(shù),選擇40多個(gè)高含蠟的油水樣品。參照SY/T5119―1995中的分析方法,對(duì)所采集的油水樣品進(jìn)行樣品分析與檢測(cè),采用柱層析法檢測(cè)油樣組成、全烴色譜分析原油樣品組成,確定原油的流變性。

      2.2 微生物菌種分離培養(yǎng)

      在50℃富集培養(yǎng)72h,并且將所培養(yǎng)的樣品于將固體石蠟作為單一碳源的培養(yǎng)皿中,恒溫下排樣出單菌落,將不同特征的單菌落于石蠟培養(yǎng)基中反復(fù)劃線分離,選配出1組生物降解能力強(qiáng)的復(fù)配菌種。

      2.3 分離菌種的生物學(xué)特征鑒定

      將培養(yǎng)皿上的菌種進(jìn)行觀察,觀察菌種的菌落特征,并且采用顯微鏡觀察菌種的形態(tài)、運(yùn)動(dòng)特征以及革蘭氏染色類型。

      二、性能評(píng)價(jià)

      1.降蠟除膠效果分析

      清防蠟菌對(duì)于原油的含蠟以及膠較量的影響如表1所示,可以將樣品4菌種作為清防蠟用菌種。取對(duì)數(shù)期培養(yǎng)液,采用懸滴法觀察菌種的運(yùn)動(dòng)狀態(tài),經(jīng)過革蘭是染色后,可以觀察到菌種的長(zhǎng)度為1-4μm,而且寬為0.4-0.5μm,菌種中主要有兩種形態(tài)的菌,其中之一呈現(xiàn)桿狀、單生的形態(tài),而且具有奪氧機(jī)制與抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的特性;另外一種細(xì)菌無莢膜、周生鞭毛,呈現(xiàn)革蘭氏陽性,需氧。根據(jù)生物梅里埃微生物分析系統(tǒng)-鑒定細(xì)菌名錄數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)比分析可知,這兩種菌種分別為枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌

      2.對(duì)原油族以及原油蠟晶形態(tài)組成的影響

      與未接菌的空白原油相對(duì)比,采用對(duì)樣品中的油樣成分與蠟晶形態(tài)進(jìn)行測(cè)定,可以發(fā)現(xiàn)樣品中的原油組成以及原油蠟晶形態(tài)出現(xiàn)明顯的變化。通過微生物降解之后,原油中的樣品的原油蠟晶形態(tài)逐漸分散形成W/O型空間網(wǎng)狀乳狀液,對(duì)于蠟晶的形成具有抑制作用,油樣的流動(dòng)性能有所提升。經(jīng)過微生物清防蠟菌的作用,顯示出微生物清防蠟菌能夠有效的分解油樣中的芳烴成分,并且抑制蠟晶的形成,對(duì)于改善原油性能具有重要的意義。

      3.防蠟效果

      微生物防蠟試驗(yàn)參照化學(xué)防蠟標(biāo)準(zhǔn)Q/CNP-XJ0504-2004,稱取30.0g含蠟油樣,加入2.00ml菌液,再加入30.0g油樣,空白用2.00ml自來水代替,搖勻培養(yǎng)72.0h,用倒瓶法測(cè)定其結(jié)蠟樣。結(jié)果見表2

      三、現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用效果

      1.試驗(yàn)機(jī)采井的選擇

      根據(jù)陸梁采油作業(yè)區(qū)的洗井計(jì)劃統(tǒng)計(jì)表,選擇加藥量多、洗井次數(shù)多、易結(jié)蠟的4口井作為試驗(yàn)井,為了保證微生物清防蠟菌的有效性,應(yīng)該參照財(cái)經(jīng)含水5-80%的區(qū)域?yàn)橹鳎趯?shí)驗(yàn)前,先對(duì)試驗(yàn)井進(jìn)行熱洗,保證井溫低于85℃,泵效不低于40%。

      2.施工方案

      選擇化學(xué)清防蠟劑作為清防蠟的井,熱水洗井后1d加入100kg菌液,初定以10d為加藥周期,每次加入50kg菌液,通過對(duì)清防蠟的效果對(duì)于加蠟周期、防蠟效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

      3.應(yīng)用效果

      通過洗凈后直接加菌的方式,對(duì)復(fù)合菌與化學(xué)藥劑的試驗(yàn)效果繼續(xù)擰對(duì)比,通過兩個(gè)月的試驗(yàn)后,4口井都表現(xiàn)出令人滿意的效果。現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)4口井的清防蠟應(yīng)用表明,該復(fù)配菌種清防蠟防蠟有效率達(dá)到90%以上,加藥周期有10天延長(zhǎng)到38天,而且用量少,成本低,經(jīng)濟(jì)效益高。

      四、結(jié)論

      1.篩選出1組清防蠟用的復(fù)配菌種,主要包括枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌等,能夠滿足克拉瑪依陸梁油田的油井清防蠟的使用條件。

      2.在實(shí)驗(yàn)室中,微生物防蠟效果能夠有效的改善原油中的蠟質(zhì)成分,降低蠟晶的形成效率,并且能夠使空白原油的含蠟量降低(10~20%),含膠量降低2~3%。防蠟率達(dá)到89%以上。

      3.現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)4口井的清防蠟應(yīng)用表明,該復(fù)配菌種清防蠟防蠟有效率達(dá)到90%以上,加藥周期有10天延長(zhǎng)到38天,而且用量少,成本低,經(jīng)濟(jì)效益高。

      參考文獻(xiàn):

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