秋夕杜牧
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秋夕杜牧范文第1篇
1 材料與方法
1.1主要材料和儀器糞腸球菌標準株ATCC (廣 東環凱生物科技有限公司），木犀草素標準品（上海 金穗生物科技有限公司，產品批號20150301， HPLC>98%)，腦心浸液瓊脂培養基、腦心浸液肉 湯（杭州天和微生物試劑有限公司），噻唑蘭、 MTT (上海金穗生物科技有限公司），二甲基亞砜 (天津致遠化工有限公司），引物（上海生工生物工 程有限公司），Biometra PCR 儀（BIOME-TRA， 德國），SMARTSPECTMPLUS超微量分光光度計 (美國），瓊脂糖（西班牙），PBS緩沖液（博士德 生物）。
1.2 方法
1.2 1菌懸液的制備首先取糞腸球菌標準株接種 于裝有BHI液體培養基的試管中37 °C搖床厭氧復 蘇24 h。將復蘇后的糞腸球菌劃線接種于BHI瓊脂 培養基中，放置在37 C恒溫培養箱里厭氧培養 24 h。挑取24 h后固體培養基上的單個菌落放置于 裝有BHI液體培養基的試管中，37 C搖床里培養 24 h;最后利用麥氏比濁法配制菌懸液并使其濃度 達到 0. 5 McFarland (1X108 個細胞/mL)。
1. 2 2藥液的制備取木犀草素標準品用二甲基亞 砜溶解使其濃度達到16 mg/mL，過濾后，利用對倍 稀釋法將木犀草素稀釋成8、4、2、1和0. 5 mg/mL 的濃度，備用。
1. 2 3木犀草素對糞腸球菌生物被膜的抑菌性的研 究用滅菌后96孔板，向每孔中放50 pL的糞腸球 菌菌懸液和150 pL的BHI液體培養基，封口膜密 封，37 C條件下厭氧培養24 h (激光共聚焦）觀 察，待成功建立糞腸球菌生物被膜模型，嚴格貼壁 去除原液體，同時隨機分7組包括5個實驗組、 1個陰性對照組、1個空白對照組；分別向實驗組中 加入100 PL的濃度為8、4、2、1和0. 5 mg/mL的 木犀草素藥液，陰性對照組含有液體培養基和菌懸 液，空白對照組只含有BHI液體培養基；將96孔 板放于培養箱中37 C條件下厭氧培養12 h。12 h 后無菌PBS沖洗2?3次去除藥液。每孔中加入20 PL MTT藥液（濃度為5 mg/mL)，37 C避光培 養4h。每孔放100 PL的二甲基亞砜溶液，搖床震蕩 15 min；待結晶體消失后，全自動酶標儀分別檢測490 nm的吸光度（A值）。如下公式計算：抑菌率= (陰性對照組A值一實驗組A值）/ (陰性對照組A值一空白對照組A值）X100%。
1. 2 4 CLSM觀察不同濃度木犀草素對糞腸球菌 生物被膜的影響將經高壓滅菌后的20 mm X 20 mm的蓋玻片放在6孔板中，分別在蓋玻片表面 滴加300 PL的糞腸球菌菌懸液，再沿6孔板的側壁 向其中小心加入3 mL的BHI液體培養基，封口膜 封口，37 C恒溫培養箱厭氧條件下培養24 h。經共 聚焦檢測確定生物被膜模型建立成功后，去除原培 養液同時將其隨機分為6組（5個實驗組和1個陰 性對照組），分別向5個實驗組中加入濃度為8、4、 5、1、0. 5 mg/mL的木犀草素藥液，陰性對照組中 不加藥液，封口膜封口，繼續厭氧培養12 h。12 h 后去除液體。PBS小心沖洗2?3次去除表面浮游的 細菌；然后滴加2.5%的戊二醛固定10 min，再次 用PBS緩沖液小心沖洗2?3次后，分別在生物被 膜表面滴加150 pL染色劑（AO、EB等份混合后0 = 20稀釋成工作液），暗室室溫孵育15 min后，用 CLSM觀察生物被膜中死菌與活菌的密度及其比例 (鏡下活菌呈綠色，死菌呈紅色）。
1. 2 5木犀草素對糞腸球菌的毒力因子影響的研究0. 2 5. 1分組處理和PCR擴增選取適應濃度的木 犀草素（8、4、2和0 mg/mL)，分別加入到配制好的 糞腸球菌菌懸液中。置于37 C厭氧條件下培養24h 后，分別取1 mL樣本按Total RNA提取試劑盒 (RNAISO TM Plus)要求提取其總RNA；并用RNA PCR KIT (AMV) VER 3 0試劑盒反轉錄合成cDNA。 同時用由上海生工生物合成設計的3對引物（見表1)， 按PCR反應試劑盒說明，通過PCR儀，對糞腸球菌毒 力因子gelE、ebpA、esp進行PCR擴增。擴增后的 PCR產物，置一20 C冷凍冰箱，備用。0. 2 5. 2瓊脂糖凝膠電泳及其分析取0. 6g的瓊脂糖粉末與40 mL1XTAE電泳緩沖液混合,加熱 至全部溶解后,再向其中加入0. 4 PL的EB,混合 后，沿側壁緩慢使液體流入膠板中，冷卻制成凝膠。 將樣本（8 pL PCR擴增產物+ 2 pL的6XLoading buffer混合液)滴加入凝膠小孔中，于120 V, 30 min 條 件 下 進 行 電 泳 。 電 泳 30 min 后 ， 取 下 凝 膠 置于UVI成像儀上。觀察結果并進行拍照，最后利 用軟件進行分析。
1.3統計學分析所有數據均采用SPSS 17. 0統計 軟件進行整理和統計。計量資料采用均數士標準差 (王±0表示。兩組間計量資料的比較采用z檢驗。 P<0. 05為差異有統計學意義。
2 結果
2 1不同濃度木犀草素對糞腸球菌生物被膜的抑制 率不同濃度的木犀草素作用于糞腸球菌生物被膜 24 h后，運用MTT法測各組的A值并計算木犀草 素的抑囷率；最后的結果顯示：在0. 5?8 mg/mL 的濃度區間隨著藥物濃度的增加其抑菌能力也增強。 木犀草素的濃度為0. 5 mg/mL時其抑菌率為 40. 02%。當達到8 mg/mL時抑菌率為90. 55%。 并且各組的抑菌率分別與陰性對照組相比差異均有 統計學意義（P〈0. 05)(見表2)。
表2不同濃度木犀草素對糞腸球菌生物被膜的抑制率 隨著藥物濃度依次增加各條帶的亮度逐漸變暗。（2) 當藥物濃度達到8 mg/mL時各毒力因子的條帶基本 消失。（3)各組別與陰性對照組兩兩比較，差異有 統計學意義（P〈0. 05)，見表3。說明木犀草素不 同程度的抑制了糞腸球菌毒力因子gelE、esp、 ebpA的表達；并且隨著藥物濃度的增加其抑制效果 逐漸增加。
2 2木犀草素對糞腸球菌生物被膜的影響不同濃 度的木犀草素作用于糞腸球菌生物被膜， 通 過 AO 和EB染色后，CLSM鏡下觀察活菌和死菌的密度 及其比例。在0. 5?8 mg/mL濃度區間內CLSM觀 察到死菌的數量逐漸增加。說明木犀草素對糞腸球 菌生物被膜的生長活性有抑制作用（見圖1)。
2 3不同濃度的木犀草素對糞腸球菌的毒力因子 gelE、esp、ebpA基因表達水平的影響最后的 PCR擴增產物進行電泳后的結果顯示：（1)陰性對 照 組 時 毒 力 因 子 gelE、 esp、 ebpA 的 電 泳 條 帶 最 亮，藥物濃度為2mg/mL時其條帶的亮度次之，但3討論木犀草素是中藥夏枯草(LuteoUn)的主要有 效成分之一。木犀草素屬于黃酮類化合物，具有抗 菌、抗炎、保護心血管、解痙、祛痰、抑制酶活性、 免疫調節、抗氧化、抗輻射、利尿、利膽、抗腫瘤等等多種特性[4]。有研究報道夏枯草對腸道致病菌 和條件致病菌具有較強的抑制作用，但對于木犀草 素對糞腸球菌的作用尚沒有研究，故本實驗選取夏枯 草中的木犀草素成分作為研究對象，探討其對糞腸球 菌的作用 。 實驗最后的結果顯示： 在0 5?8 mg/mL，木犀草素對糞腸球菌生物被膜能起到抑制效果，并且 隨著藥物濃度的逐漸增加其抑菌效果也逐漸明顯，當 濃度達8 mg/mL時，其抑菌效果最明顯。
3.討論
糞腸球菌在根管再治療患者的根管中檢出率高 且數量多，極易形成生物被膜，產生抗藥性，使治 療難度加大[6]。有研究報道：糞腸球菌極易在根管 內形成生物被膜可能與其毒力因子明膠酶（gelE)、 表面蛋白（Esp)和菌毛操縱子（ebpA)等有關系。 gelE：是細胞外鋅金屬蛋白酶的一種，可以酶解宿 主細胞壁和細胞間質的膠原蛋白[7]，它的長度大概 為1 530個堿基，位于糞腸球菌染色體上。糞腸球 菌調節因子基因fe和3個啟動子位于其上游，能 夠影響明膠酶的表達水平。下游主要與其一起參與 宿主的組織損傷，是絲氨酸蛋白基因SprE。明膠酶 對組織的形成和重塑是通過胞外的降解作用來調節 的。經研究發現去除giE基因后，糞腸球菌形成生 物被膜的能力下降[8]。ebpA: ebp基因座主要影響 菌毛形成，而生物被膜形成的必要條件就是菌毛的 形成。bpA是糞腸球菌菌毛操縱子，常常發現于糞 腸球菌分離株中，影響著生物被膜和菌毛的形成[]。 有研究發現：與野生株比較，bpA表達水平和菌毛 蛋白生成量減少，生物被膜形成量也會跟著下 降[1°]。
秋夕杜牧范文第2篇
1940年代中期，袁可嘉針對當時詩壇新詩流于“說教”、流于“感傷”的傾向，提出“新詩現代化”的觀點，呼吁尋求詩的“新傳統”，即“現實、象征、玄學的新的綜合傳統”。這一“新詩現代化”理論與西方現代主義詩歌傳統、特別是艾略特的詩歌與文論有密切關系，正如袁可嘉提出的，“新詩現代化要求完全植基于現代人最大量意識狀態的心理認識，接受以艾略特為核心的現代西洋詩的影響”。袁可嘉更把穆旦看作是新詩新傳統追求中的領軍人物，認為他在新詩“現代化”的追求上“比誰都做得徹底”“九葉”詩人之一唐祈則稱穆旦是“40年代最早有意識地傾向現代主義的詩人”，并能把“艾略特的玄學的思維和奧登的心理探索結合起來”，形成自己特有的詩風。
探討穆旦這位“新詩現代化”實踐做得最為徹底的詩人其1940年代詩歌創作的現代主義追求，有必要先對袁可嘉提出的“新詩現代化”理論以及與之密切相關的西方現代主義思潮和詩歌傳統做一些討論。本文將從西方現代主義思潮中的非線性時間觀人手，討論時間觀念變化對于西方現代主義文學的影響以及非線性時間觀在袁可嘉詩歌理論中的體現。袁可嘉作為九葉詩派這“一群自覺的現代主義者”中主要的詩歌理論家，其“新詩現代化”理論倡導的是一種“中國式現代主義”，用以艾略特為中心的“現代西洋詩的經驗作根據”，追求筆者所稱的詩歌的“戲劇性綜合”( dramatic syn-thesis )，而這里的“戲劇性”在筆者看來則包含了兩層含義:一是注重詩歌與戲劇的關系，用袁可嘉自己的話說便是“新詩戲劇化”，以戲劇人詩或突出詩的戲劇性表現；二是強調對歷史作顛覆性的反思。這兩個層面的“戲劇性”都反映出袁可嘉把非線性時間觀作為新詩現代化的基礎，希望新詩一方面能突破直線的、單一的表達方式，形成多層次的詩歌結構，另一方面又能表現出突破線性時間觀念的現代歷史觀。探討這兩個層面的“戲劇性”如何在穆旦詩歌中體現，便可比較深人地研究穆旦詩歌的現代性。筆者認為，穆旦詩歌的“戲劇性”一方面體現在他對于詩歌創作的非線性結構以及對在支離破碎的現實世界中被孤立、被囚禁、被異化的個人內心的多層次的、極富戲劇張力的刻畫的追求;另一方面，穆旦詩歌更反映出他強烈的、顛覆線性時間觀念的歷史反思。過去、現在、將來不再是線性時間流上互不相干的不同時段，它們相互影響，讓詩人對過去矛盾、對將來懷疑、對現在執著。
針對當時詩壇盛行的“說教”“感傷”之風，九葉詩人之一袁可嘉在1940年代中期提出了“新詩現代化”的觀點，希望建立起新詩的新傳統，而這種新傳統他在多年后稱之為“中國式現代主義”。如果說現代主義詩歌傳統發源于西方，那么所謂“中國式現代主義”，正是一種將中西相結合的綜合傳統，袁可嘉稱之為“現實、玄學、象征的新的綜合傳統”。這一“新詩現代化”的理論是建立在與西方現代主義思潮與文學相一致的非線性時間觀上的，而非線時間觀表現在文學中便是以非線性、多層次的結構代替線性敘事，并且更多地專注于具體多變的經歷與感受以及個人多層次的意識狀態，用袁可嘉的話說，便是“從抒情的進展到戲劇的”，達到新詩戲劇化。
秋夕杜牧范文第3篇
唐•劉長卿《游休禪師雙峰寺》
木落雁南渡，北風江上寒
唐•孟浩然《早寒江上有懷》
秋色無遠近，出門盡寒山
唐•李白《贈廬司戶》
雨色秋來寒，風嚴清江爽
唐•李白《酬裴侍御對雨感時見贈》
長風萬里送秋雁，對此可以酣高樓
唐•李白《宣州謝朓樓餞別校書叔云》
人煙寒橘柚，秋色老梧桐
唐•李白《秋登宣城謝朓北樓》
高鳥黃云暮，寒蟬碧樹秋
唐•杜甫《晚秋長沙蔡五侍御飲筵送殷六參軍歸灃州覲省》 信宿漁人還泛泛，清秋燕子故飛飛
唐•杜甫《秋興八首》
翟塘峽口曲江頭，萬里風煙接素秋
唐•杜甫《秋興八首》
遠岸秋沙白，連山晚照紅
唐•杜甫《秋野五首》
天上秋期近，人間月影清
唐•杜甫《月》
八月秋高風怒號，卷我屋上三重茅
唐•杜甫《茅屋為秋風所破歌》
長風吹白茅，野火燒枯桑
唐•岑參《至大梁卻寄匡城主人》
秋風萬里動，日暮黃云高
唐•岑參《鞏北秋興寄崔明允》 返照亂流明，寒空千嶂凈
唐•錢起《杪秋南山西峰題準上人蘭若》
萬葉秋聲里，千家落照時
唐•錢起《題蘇公林亭》
宿雨朝來歇，空山秋氣清
唐•李端《茂陵山行陪韋金部》
雨徑綠蕪合，霜園紅葉多
唐•白居易《司馬宅》
山明水凈夜來霜，數樹深紅出淺黃
唐•劉禹錫《秋詞二首》
試上高樓清入骨，豈知春*嗾人狂
劉禹錫《秋詞二首》
多少綠荷
相倚恨，一時回首背西風
杜牧《 齊安郡中偶題二首》 紅燭秋光冷畫屏，輕羅小扇撲流螢
唐•杜牧《秋夕》
天階夜色涼如水，臥看牽牛織女星
唐•杜牧《秋夕》
秋陰不散霜飛晚，留得枯荷聽雨聲
唐•李商隱《宿駱氏亭寄懷崔雍崔袞》
秋山野客醉醒時，百尺老松銜半月
唐•施肩吾《秋夜山居》：“去雁聲遙人語絕，誰家素機織新雪。秋山野客醉醒時，百尺老松銜半月。”
老樹呈秋色，空池浸月華
唐•劉得仁《池上宿》
秋宵月色勝春宵，萬里霜天靜寂寥
唐•戎昱《戲題秋月》
一夜綠荷霜剪破，賺他秋雨不成珠
唐•來鵠《偶題二首》
夜半酒醒人不覺，滿池荷葉動秋風
唐•竇鞏《秋夕》 菡萏香銷翠葉殘，西風愁起綠波間
南唐•李璟《浣溪沙》
碧云天，黃葉地，秋色連波，波上寒煙翠
宋•范仲淹《蘇幕遮》
一年好景君須記，最是橙黃橘綠時
宋•蘇軾《贈劉景文》
相逢不用忙歸去，明日黃花蝶也愁
宋•蘇軾《九日次韻王鞏》
蕭蕭遠樹流林外，一半秋山帶夕陽
宋•寇準《書河上亭壁》
秋景有時飛獨鳥，夕陽無事起寒煙
宋•林速《孤山寺端上人房寫望》
對瀟瀟暮雨灑江天，一番洗清秋
宋•柳永《八聲甘州》
漸霜風凄緊，關河冷落，殘照當摟。
宋•柳永《八聲甘州》
是處紅衰翠減，苒苒物華休。惟有長江水，無語東流
宋•柳永《八聲甘州》
秋夕杜牧范文第4篇
活動中我們首先通過觀看幻燈片更直觀得讓幼兒感受清明節的氣氛。同時配合教師講解幫助幼兒了解清明的來歷。
“清明節是我國傳統節日，也是最重要的祭祀節日，是祭祖和掃墓的日子。掃墓俗稱上墳，祭祀死者的一種活動。漢族和一些少數民族大多都是在清明節掃墓。清明最開始是一個很重要的節氣，清明一到，氣溫升高，正是春耕春種的大好時節，故有“清明前后，種瓜種豆”、“植樹造林，莫過清明”的農諺。
接下來通過多媒體課件和現場互動的方式讓幼兒了解了清明節的豐富活動形式，如：掃墓燒紙、春耕、蕩秋千 、蹴鞠、踏青、植樹、放風箏等。
最后《清明》詩詞欣賞以及每個班事先準備的一首杜牧詩（附后），表演給大家，把氣氛推向了。
二百余名幼兒和二十余名老師沉浸在《清明》的情景中，時而朗誦，時而專注聽講，時而各班精彩展示，時而掌聲此起彼伏……
通過此次活動幼兒了解“清明節”的來歷、《清明》這首詩的意義，以及它的作者杜牧先生。通過學習他的詩集來懷念這位偉大的詩人，孩子在這種傳統文化的熏陶下，感受著古詩詞的魅力，紀念這位大詩人，活動圓滿成功。
附：《清明》
（唐）杜牧
清明時節雨紛紛，路上行人欲斷魂。
借問酒家何處有？牧童遙指杏花村。
《江南春絕句》
（唐）杜牧
千里鶯啼綠映江，水村山郭酒旗風。
南朝四百八十寺，多少樓臺煙雨中。
《秋夕》
（唐）杜牧
銀燭秋光冷畫屏，輕羅小扇撲流螢。
天階夜色涼如水，臥看牽牛織女星。
《山行》
（唐）杜牧
遠上寒山石徑斜，白云生處有人家
停車坐愛楓林晚，霜葉紅于二月花
《寄揚州韓綽判官》
（唐）杜牧
青山隱隱水迢迢，秋盡江南草未凋。
二十四橋明月夜，玉人何處教吹簫？
《惜春》
（唐）杜牧
春半年已除，其余強為有。
即此醉殘花，便同嘗臘酒。
悵望送春杯，殷勤掃花帚。
誰為駐東流，年年長在手？
《贈別》
（唐）杜牧
多情卻似總無情， 唯覺樽前笑不成。
蠟燭有心還惜別，替人垂淚到天明。
《中秋》
（唐）杜牧
秋夕杜牧范文第5篇
2、關于秋天景物描寫的詩句有：
3、秋風蕭瑟，洪波涌起。(曹操：《觀滄海》)
4、解落三秋葉，能開二月花。(李嶠：《風》)
5、春種一粒粟，秋收萬顆子。(李紳：《憫農》)
6、常恐秋節至，焜黃華葉衰。(《漢樂府?長歌行》)
7、窗含西嶺千秋雪，門泊東吳萬里船。(杜甫：《絕句》)
8、湖光秋月兩相和，潭面無風鏡未磨。(劉禹錫：《望洞庭》)
9、自古逢秋悲寂寥，我言秋日勝春朝。(劉禹錫：《秋詞》)
10、銀燭秋光冷畫屏，輕羅小扇撲流螢。(杜牧：《秋夕》)