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一、養雞協會現狀和發展過程
xx市xx鎮養雞協會成立于2002年8月,是經市民政局注冊的農民專業經濟合作組織,是我市示范合作經濟組織。幾年來,協會以服務于民為宗旨,不斷發展壯大,現擁有固定資產25萬元,其中辦公設施85平方米,運輸車輛3臺,2005年銷售總收入1400萬元,純收益136萬元,協會會員戶均收入近萬元。協會在推動我市養雞產業發展中做出了較大貢獻。
xx鎮地處我市南部泉河北岸,與臨泉縣隔河相望,由于地理位置偏僻,人均耕地面積少,且經常遭受水災,致使農村經濟發展緩慢,農民收入不高。自1995年始,xx鎮xx村村民牛浩仁運用自己打工學來的養雞技術,辦起了該村第一個養雞棚,一年飼養五茬雞,收入萬元以上。經過兩年的發展,牛浩仁養殖肉雞走上了致富的路子。在其帶動下,1997年以此村為中心的養雞產業迅速發展壯大,形成了年飼養出欄肉雞180萬只的規模,年銷售收入2000萬元,養殖戶平均收入1.5萬元,農民在養殖肉雞中得到了豐厚的回報。隨著養雞業的不斷發展,出現了劣等雞苗、假冒偽劣藥品和飼料進入養殖基地的問題,嚴重危害了養雞戶的利益和養殖業的健康發展,僅2001年就造成損失達10萬元以上。在這種情況下,xx鎮養雞協會應運而生,在鎮黨委政府的支持下,在廣大養殖戶的迫切要求下,2002年8月,成立了xx鎮養雞協會,協會會員72人,經民主選舉,產生了協會理事會,養雞大戶xxx當選會長。經過三年多的發展,目前協會會員達162戶,年飼養肉雞規模200余萬只,同時帶動了周邊鄉、鎮、村養雞業的發展,協會于2002年9月正式注冊。
二、提供優質服務
協會結合規模養雞的特點和要求,為會員提、供、銷一條龍的服務,建立健全了各項規章制度,保障會員的合法權益。
1、嚴格管理,抓好產前服務。協會嚴格按章程辦事,不斷創新服務方式,從建棚、供應雞苗、場地消毒等方面入手,加強技術指導,規模棚室建設,統一供應優質雞苗,統一提供藥品和飼料,嚴把養殖用品的質量關,協會通過考察論證,多方篩選,從質量信得過的企業購進雞苗、藥品、飼料等相關產品,統一發放到養殖戶手中,確保質量,提高肉雞成活率。
2、科學飼養,抓好產中服務。科學飼養和管理是增加養殖效益的前提和基礎。協會本著健康養殖、提高效益的原則,從三個方面著手,切實抓好產中服務。一是推廣科學養殖技術。在養殖過程中,以優質品種為龍頭,積極推廣綜合配套養殖技術,協會與市畜牧站建立了長期的技術合作關系,定期邀請畜牧專家舉辦科普講座,并對養殖戶遇到的難題進行現場指導,同時還利用電教、養殖戶座談會等方式,開展培訓交流,根據養雞季節變化,編印養殖技術材料,發放給養殖戶,從而提高了養殖戶的技術水平和操作能力。三年來,共舉辦各類技術講座30余期,印發技術資料1000余份。二是加強疫病防控。為預防雞疫病的發生,協會與鎮獸醫站密切配合,及時抓好雞疫病的免疫注射工作,實行統一防疫,尤其是高致病性禽流感防控工作,協會在廣泛宣傳的基礎上,按市政府的防控要求,做到消毒100%,免疫注射率100%,此外,強化養殖地的飛禽管理和預防,有效地杜絕了雞各種疫病的發生,保障了養殖業的健康發展。三是推行標準化飼養。協會制定了無公害養雞技術操作規程和質量控制措施,加大了藥品、飼料管理力度,推廣標準化飼養技術,推廣優質飼料和無殘留藥品,加強肉雞質量檢測,在肉雞出欄前,協會邀請相關單位人員進行質量抽檢,不合格成雞不準上市銷售,從而確保了肉雞產品的質量安全。
3、瞄準市場,抓好產后服務。為及時掌握市場行情,摸清養雞市場動態,及時更新換代,協會經常派人到外地摸市場,拉客戶,積極搜索有關信息資料,不斷更新品種。在經營過程中,根據市場行情和市場需求統一組織生產和銷售,注重信譽,保證質量,獲得了客戶的信賴,取得了可喜的經濟效益。
4、典型帶動,提升養殖科技水平。協會在發展養雞產業過程中,十分注重抓點示范,發揮典型帶動和技術輻射作用,促進整體協調發展。在新品種引進、新技術推廣上,首先選擇示范戶試點,讓會員看得到、摸得著,以實際的增收現狀,引導和感化會員,使他們自覺接受先進技術,使科學飼養技術盡快轉化為生產力,從而提高養殖戶的養殖科技含量和綜合效益。協會在抓好會員養雞的同時,積極幫助周邊地區的農民發展養雞,經常派技術人員去服務、去指導,對全市養雞產業的發展起到了積極的推動作用。
三、完善經營機制
合理的利益分配機制是促進協會發展的關鍵因素。協會自成立之日起,明確了會員利益至上的宗旨,采取了統一規格、統一價格、統一銷售、售后返利的經營方式,從而避免了相互壓價的惡性競爭。協會在銷售中提取一定數額的組織費用,同時協會從供雞苗、藥品和飼料方面,獲取一部分利潤。年底經核算后,除去必要的公共積累,給予會員二次返利,三年來,年平均二次返利10萬元左右。
四、加強協會管理
養雞協會不斷總結發展經驗,強化了內部管理,積極探索合理有效的運行機制,取得了比較顯著的成效。首先加強協會自身管理。協會實行理事會負責制,重大事項召開理事會研究,征求會員意見后實施,一般事項由理事長召集理事會成員研究決定。同時嚴格協會的財務制度,嚴把開支關,定期通報財務狀況,做到了公開、公正、透明。其次加強生產管理。在養雞生產過程中,突出標準化生產,在統一供雞苗、藥品和飼料的基礎上,推選健康養殖,提高肉雞產品的質量和效益。第三探索運行新機制。協會實行“五統一分”運作方式,即統一供應雞苗、統一供應藥品、飼料、統一飼養標準、統一防疫、統一銷售,分戶養殖,通過三年來的運作,協會有了較大發展。為進一步提升檔次和水平,協會已計劃建立規模化養殖小區,采取股份制方式,形成更加緊密的利益共同體,全面提高農戶的組織化程度,大力發展無公害養殖,以此推動全市養殖業的發展。
二、2012年合作社主要情況和成效
尚田農機合作社完善基礎設施,修建了350平米高標準的機庫房、42平方米的維修車間、配件庫和辦公室等。健全規章制度,依照《農民專業合作社法》,建立了規范的合作社章程,成立理事會、監事會,負責合作社生產經營的日常管理和監督,重大事項由成員大會決定。合理分配效益,尚田農機服務專業合作社根據自身特點,制定合理的效益分配機制。每年三夏三秋開展訂單作業、跨區作業等服務,服務群眾,服務農業生產。提高了機械化作業水平,增加了入戶社員收入,每戶比不入社社員可多收入五六千元以上。
三、新技術推廣示范情況
主要用于:堤壩的防滲斜墻或垂直防滲心墻、透水地基上堤壩的水平防滲鋪蓋和垂直防滲墻、混凝土壩和土壩的防滲體、渠道的襯砌防滲和施工圍堰的防滲等諸多方面。復合土工膜是土工合成材料的一種,一布一膜、二布一膜、三布一膜等到不同產品。現在把防滲土工合成材料的鋪設技術和防滲土工合成材料在工程施工中常出現的問題等方面進行分析和研究。
1、滲土工合成材料的鋪設技術
土工合成材料自廣泛用于巖土工程建設以來,在水利水電工程建設中引起不小的變革,這不僅反映在水利水電工程的材料使用上,而且反映在設計原理、計算方法、施工工藝和工程管理上。防滲土工合成材料主要用于垂直鋪膜防滲和坡面鋪膜防滲,因鋪設結構形式的不同,其施工工藝和鋪設技術也不盡相同。
2、滲土工合成材料在工程施工中常出現的問題
經常遭受石塊或其它尖棱物的穿刺破壞;由于土工薄膜缺少約束支持,在承受水壓力和土壓力時易于被鼓破;薄膜受到下層氣體或液體的頂托產生應力集中導致破壞;鋪設在支撐土與混凝土面板之間的土工薄膜由于受到溫度、重力、土移、浪擊和水位變化等因素的影響,可能引起界面滑動,使土工薄膜產生過度拉伸,撕裂或擦傷;在斜面上用土或混凝土面板保護土工薄膜,當水位驟降時,土體中的孔隙水壓力和庫水位失去平衡而造成失穩滑動。只要按照施工規范和施工組織設計施工,確保施工質量,就可避免或減少類似問題的出現。
3、防滲
防滲結構設置上、下墊層的目的是保護土工膜不受破壞;下墊層尚有排水、排氣作用。
鋪設土工膜后,膜下仍可能因缺陷引起滲漏而積水,也可能有土中排出的氣體或產生的沼氣等,水、氣可能頂托土工膜,危及膜的安全,尤其是在大面積的膜下,必須考慮排水、排氣措施。
4、工程防滲設計與施工
對含毒礦場的尾礦壩等,有毒物質混入水體將造成環境污染,危及人、畜生命安全,必須嚴格防止。條文中所述措施是為了確保安全。建議渠道防滲土工膜厚度不小于0.25mm是根據多年的實踐經驗。土工膜太薄可能產生氣孔,也易于在施工中受損,使防滲效果減小。一般生活垃圾和工業垃圾不含毒質或毒質較小,故可采用單層防滲結構。如果這類垃圾也含有毒物質,則應選用雙層防滲結構。如含劇毒,甚至要求多層結構。隧道、洞室防滲應采用復合土工膜或合適的防排水材料,是因為圍巖(土)中皆有滲水,必須將其通過土工織物或防排水材料流入下方縱(橫)向排水溝排走,以確保防滲襯砌安全工作。
5、加筋土擋墻設計
加筋土擋墻采用的筋材有兩種。因筋材的抗拉模量不同,墻內填土中的潛在破壞面相異。
目前加筋土擋墻設計有極限平衡法和有限元法兩大類。由于筋材、填土以及兩者相互作用的本構關系難以準確和協調建立,加之缺乏破壞準則,工程中幾乎均采用極限平衡法,后者可作為一種輔助和對比方法。排水設備對保證加筋土擋墻的穩定十分重要。
6、加筋土墊層設計與施工
實踐可知,加筋墊層抗深層滑動計算采用圓弧法,得到的穩定安全系數往往提高較少,表明加筋效果很不顯著,實際效果卻很明顯。這說明現有的穩定分析方法未能反映筋材所起的全部作用。分析認為,加筋所以發揮明顯作用可能與下列因素有關,例如加筋后潛在滑動面可能往深處發展,地基土的側向位移受到部分限制以及地基中應力分布發生了變化等,而這些有利因素在計算中卻未能計入,可見現有分析方法有待改進。我國鐵路、公路系統目前在作圓弧滑動分析時,認為首先所加底筋應該是穩定的,即滑動圓弧不應該切斷底筋,應將筋材及其上填土視為一整體,為此,潛在圓弧必然下移,穩定安全系數自然有所提高。此項考慮是否符合實際,應通過實踐和積累資料來加以驗證。由于筋材承受拉力才能發揮其加筋作用。所以建議回填順序,目的是使筋材始終處于受拉狀態。
7、軟土地基處理中排水帶設計與施工
利用排水帶加固地基的目的,即是要求在預定工期內消除地基的規定預期沉降和提高地基土強度。排水帶地基設計方法與傳統的砂井地基設計相同。利用砂井計算方法時應將排水帶斷面轉化為當量砂井直徑。砂墊層所用應為潔凈砂料,以保證排水通暢。存放排水帶需加封蓋,是為保護其不變壞。
[關鍵字]:商場地下室; 基礎底板; 混凝土基礎施工 ;后澆帶; 外墻節點; 防水材料 ; 防水措施
Abstract: foundation slab poured band as the building structure in basement of the building must be waterproof, it has also become the design and operational requirements that focus on and considering in pouring construction. As a large basement mall building, due to the requirements for water poured, so this type of underground construction with waterproof design and processing which including concrete facade node is even more important.
Keywords: mall basement; foundation slab; concrete foundation construction; after pouring with; wall node; waterproof material; waterproofing measures
中圖分類號:TU57+5文獻標識碼:A文章編號:
后澆帶通常為地下室建筑中呈帶型的建筑結構,是在建筑施工中為防止現澆鋼筋混凝土結構由于溫度、收縮不均產生有害裂縫,在基礎底板、墻等相應位置預留臨時施工縫,將結構劃分成若干部分,經過構件內部收縮,在一定的時間后再澆搗混凝土,將構件連成整體。后澆帶做為地下室建筑的構筑結構必須具備防水功能,這也成為后澆帶施工中重點關注和考慮的設計和作業要求。作為大型的地下室商場類建筑因其對防水的要求更高,所以對于這一類地下建筑的后澆帶包括混凝土外墻節點的相關防水設計和處理就更顯出其重要性。這就要求在整個后澆帶的防水處理中既要做好防水材料的選擇,也要做好相關的防水設計和施工作業。筆者將結合自身參與的相關后澆帶防水工程就防水材料和防水處理做一些探索和淺析,以供業者參考。
一、基礎底板后澆帶防水設計施工作業綜述
在大型地下商場工程施工中,防水及后澆帶施工是兩個比較關鍵的工序。地下室基礎底板、外墻一般用同強度等級及抗滲等級的防水混凝土澆筑。對混凝土自防水能力進行檢測的一個重要手段是進行蓄水試驗,蓄水試驗可以根據施工需要分段分片進行,但要保證該部分底板全部進行檢驗。而地下室后澆帶施工中則要注意防水和支模兩個問題。在后澆帶工程中,必須待結構封頂乃至更晚方可進行封閉,在后澆帶封閉前,設置后澆帶防水。在具體實施中的做法要參見《地下工程防水技術規范》GB50108―2008 ,而且應依據不同工程作相應的調整。外墻后澆帶防水要采用GB50108規范中的外墻后澆帶防水做法。后澆帶支模留置后澆帶時,后澆帶兩側模板支撐不僅要牢固緊密,還應易拆除或一次性使用不拆除。
二、基礎底板防水設計和施工作業中的防水材料選擇
后澆帶防水材料主要包括防水卷材、基層處理劑、止水材料及輔助材料。防水材料應有合格證,且復檢合格后方可使用。防水卷材通常采用SBS改性瀝青防水卷材,該卷材具有良好的低溫柔度值和耐高溫值,使用壽命長,施工簡便,污染小,廣泛應用于工業和民用建筑的屋面、地下室、衛生間等防水工程以及大型地下商場工程的防水防潮。而對于變形較大的工程則建議選用延伸性能優異的聚酯胎產品,其他建筑宜選用相對經濟的玻纖胎產品。
基層處理劑則采用再生橡膠改性瀝青的汽油溶液。接縫密封材料:采用改性瀝青密封材料,用于立面防水卷材收頭密封及外墻管根等特殊部位的粘結處理。底板、外墻施工后澆帶截面中部及迎水面外貼式止水材料使用橡膠止水帶,底板施工后澆帶底部采用高聚物水乳型瀝青SBS防水涂料。SBS防水涂料應具有良好的耐菌性、耐腐蝕性、耐久性、耐水性,難燃、無毒、低污染;橡膠止水帶表面不允許有開裂、缺膠、海綿狀等影響使用的缺陷,中心孔偏心不允許超過管狀斷面厚度的1/3。
三、基礎底板卷材防水施工的作業條件和工藝流程
1、作業條件
首先防水基層應達到如下要求:基層堅實、有足夠強度,表面清潔干燥,無砂粒、浮土等污物;基層表面應光滑、平整、無松動,對于殘留的砂漿或突起物應用鏟刀削平,不允許有凹凸不平及起砂現象,陰陽角抹成圓弧形;基層表面平整度使用靠尺檢查,與靠尺最大空隙≤5mm;要保持基層干燥,方可以進行卷材的鋪貼。防水導墻砌筑完成,表面及導墻表面要抹平壓光,符合防水基層要求。值得注意的是防水卷材和配套材料均為易燃材料,要集中存放,專人管理,并準備好干粉滅火器,嚴防火災;此外要做好安全防護,用鋼管在基坑邊做好圍護。
2、工藝流程圖:
3、工藝流程說明:
施工前,先沿地下結構外墻周圈砌筑巖磚做防水保護墻;鋪貼卷材前將基層表面雜物和塵土清理干凈;采用再生橡膠改性瀝青的汽油溶液,稀釋后在基層表面均勻涂刷一遍。涂刷時,要按一個方向進行,厚薄均勻,不漏底、不堆積。待基層處理劑(再生橡膠改性瀝青的汽油溶液)干燥后,即可進行后澆帶及墻面卷材的施工;在后澆帶部位加鋪一層同質卷材附加層,將卷材裁成相應的形狀進行點粘,施工時要細心,附加層施工必須粘貼牢固;為保證卷材鋪貼質量,卷材施工應遵照下列工序進行:首先,用彩色粉彈線和白線分檔、確定卷材實際鋪貼位置、間距,該處的作業要符合有關卷材鋪貼技術要求。然后選擇底板一個范圍做樣板施工,經驗收合格后再進行正式施工;按分檔位置要求,將改性瀝青防水卷材按鋪貼長度和彈線尺寸裁剪并卷好備用,操作時將已卷好的卷材端頭比齊開始鋪貼的起點,用汽油噴燈,烘烤卷材底面與基層交界處,使卷材底面的改性瀝青熔化,沿卷材幅寬往返加熱,邊烘烤邊向前滾動卷材,用壓輥滾壓,排除卷材與基層間的氣體,使卷材與基層粘結牢固。對于平面與立面相連的卷材,應先鋪貼平面部分,然后由下向上滿粘鋪貼立面卷材,同時注意使卷材緊貼陰、陽角。永久保護墻上鋪貼的卷材,里外側卷材留設適當的接頭長度,以便將來與外墻立面防水卷材搭接連接。對于該段防水卷材甩頭,虛鋪于保護墻上平面,并彩條布,上砌兩皮紅機磚臨時保護墻進行保護。封邊,加熱卷材與卷材、基層與卷材接縫處,觀察,當卷材的瀝青剛熔化時,壓合至邊緣,擠出瀝青粘牢。大面積的卷材橫縱接縫處必須溢出不間斷的瀝青。進行第二道防水卷材施工時要注意上下兩層卷材的長邊接縫應錯開1/3~1/2幅寬,相鄰兩幅卷材的短邊應錯開500mm。要注意兩層卷材不得相互垂直鋪貼。封邊及收頭,卷材外露接縫、收頭部位、管道包裹部位用專用密封膏密封嚴密。作業完成,檢查驗收,進行下一道工序。
四、后澆帶防水施工做法
1、防水涂料施工
首先要清理基層,將基層清掃干凈,且要隨時注意保持基層清潔衛生;在涂料涂刷時,防水涂膜應分遍涂刷,待先涂的涂層干燥成膜后方可涂刷下一遍涂料;防水涂層必須涂刷臻密,這是保證質量的關鍵。每次涂膜涂刷方向應相互垂直,上下遍涂層相互覆蓋嚴密,防止產生直通的針眼氣孔,必須重點關注防水層的整體性和均勻性;涂層間的接茬,在每遍涂布時應退茬50~100mm,接茬時也應超過50~100mm,避免在接茬處涂層薄弱,發生滲漏。每遍涂膜厚度大于等于0.5 mm,最少涂刷3遍,最終涂膜厚度應為1.5~2.0 mm。
2、后澆帶止水帶安裝及封邊處理
止水帶的位置埋設要準確、牢固;底板及外墻后澆止水帶安裝做法可參照下圖
后澆帶兩邊封邊必須嚴密,嚴格控制漏漿,保證止水帶下部砼密實,底板及外墻后澆止水帶封邊做法可參照下圖
上述兩圖中所示平面圖為工程平面示意圖,僅供參考。
3、質量控制
止水帶寬度和材質的物理性能需符合設計要求,且無裂縫和氣泡。止水帶位置要準確,不得用穿孔或用鐵釘固定。混凝土澆灌前應校正止水帶位置,表面清理干凈,止水帶損壞處應修補,頂板、底板止水帶的下側砼應振搗密實,外墻止水帶內外側砼應均勻。涂料防水層的基層應牢固,基面應潔凈、平整,不得有空鼓、松動、起砂和脫皮現象。涂料防水層應與基層粘結牢固,表面平整、涂刷均勻,不得有流淌、漏刷和露底現象。涂料防水層的平均厚度應符合設計要求,最小厚度不得小于設計厚度的80%。
[參考文獻]
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[2]劉巍峰《大型地下室防水施工技術分析》 《中外建筑》2011年第07期
[3]張萬軍 《地下室工程防水施工的若干問題》 《大眾科技》2010年第01期
[關鍵詞]米羥基磷灰石;羧甲基殼聚糖;注射;軟組織填充劑
[中圖分類號]R622Q813.1[文獻標識碼]A[文章編號]1008-6455(2011)06-0929-03
Experimental Study of Nano-hydroxyapatite /Carboxymethyl Chitosan composite on injectable soft tissue filler CAI Shu-yun1,GUO Qiu-ju2,GUO Wan-hou1,SHU Chang1,LI Chang-ju1,PAN Lu1,WANG Lin1
(1.Department of Plastic Surgery,The Affiliated Hospital,Hebei United university,Tangshan 063000,Hebei,China;2.Oral Department of Hebei United University)
Abstract:ObjectiveThe purpose of this study was to observe and evaluate the intracutaneous filling effect of Nano-hydroxyapatite /Carboxymethyl Chitosan composite( N-HA/CMCTS) as a new kind of soft tissue filling agent.MethodsN-HA and CMCTS were used to make three kinds of composite (A、B、C ) for different proportion (1:1、4:6、3:7),and another material D is Physiological saline. Sixty-four wistar rats were divided into 4 groups.These different kinds of materials were injected randomly and subcutaneously on the back of each rat. At time points 1,4,8 and 12 weeks after injection,some of the rats were sacrificed to be evaluated with anatomy and histology.ResultsNo apparent reject reaction was found. A mild inflammatory infiltrate was found on the back of the other rats of A,B and C. Fiber tissue surrounding the composite was not pronounced,and the collagen became more and abnormal fiber cells were not found at 1~12 weeks postoperatively.ConclusionNano-hydroxyapatite /Carboxymethyl Chitosan composite has good histocompatibility and plasticity in vivo. It was not toxic and excitant. It was absorbed slowly and promoted collagen secretion. As such,this material may become a new kind of injectable soft tissue filling agent.
Key words: Nano-hydroxyapatite;Carboxymethyl Chitosan;injection; soft tissue filler
羥基磷灰石(hydroxyapatite, HA )是骨組織的主要成分,具有良好的生物相容性、生物活性,納米羥基磷灰石(N-HA ) 除了具有傳統HA 的特性外, 在理化性質和生物學方面有更大的優越性,有利于組織的結合[1-2],但是單純的羥基磷灰石脆性大,塑形性差,很難降解限制了其應用[3-4]。殼聚糖(chitosan, CS) 是一種天然可降解多糖,具有來源廣泛、無毒、無刺激性、生物可降解性、生物相容性、抗凝血性、促進傷口愈合及防腐抗菌性能等特殊的醫用生物學特性[5-6]。羧甲基殼聚糖具有殼聚糖的所有優點,也解決了殼聚糖只在弱酸性環境中溶解的缺點[7]。納米羥基磷灰石/羧甲基殼聚糖復合物是由納米羥基磷灰石與羧甲基殼聚糖按照不同的比例配制而成,本復合物已在骨組織工程中得到廣泛的應用,除了有人用于修復牙周膜結締組織外還沒有作為軟組織填充材料的相關報道。
1 材料和方法
1.1 實驗材料:納米羥基磷灰石(N-HA)粉體購自南京埃普瑞納米材料有限公司,粒徑為40nm,純度為96%,羧甲基殼聚糖(CMCTS)購自浙江澳興生物科技有限公司,羧甲基取代度為88.9%,脫乙酰度為90%,將N-HA與CMCTS按照3種不同的比例(1:1、4:6、3:7)混合溶解在10ml無菌生理鹽水中,分別標記為A、B、C,用醫用加速器6MV-X線照射滅菌,劑量率300cGy/分,單次照射為500cGy,另有一組無菌生理鹽水D。
1.2 方法:Spf級雄性wistar大鼠64只,體重均在250g左右。將64只大鼠隨機分成4組,每組16只,10%水合氯醛0.4ml/100g大鼠腹腔(經消毒)注射麻醉后,常規背部左右兩側備皮,消毒,鋪巾。用5ml注射器于選好的三組大鼠背部左右兩側注射N-HA/CMCTS復合物,并將其注入到真皮深層,形成一直徑為2cm的圓形填充范圍并畫圈標記,每只注射3ml,第四組相應部位注射生理鹽水作為對照。前三個組所注射的復合物均是隨機分配,注射后對每個注射點消毒(圖1)。
1.3 觀察指標
1.3.1 注射后一般情況觀察:大鼠的活動及進食情況,各注射部位皮膚外觀有無紅腫、滲液等炎癥反應,各皮丘的變化情況。
1.3.2 組織學觀察:于注射后第1、4、8、12周四個時期每組隨機處死四只大鼠,切取注射部位的組織作為標本,一部分行HE、Masson染色,光鏡下觀察注射部位周圍組織的炎癥反應及膠原纖維的生成情況;另一部分透射電鏡觀察成纖維細胞的超微結構。
1.4 統計學處理:采用SPSS13.0軟件對實驗數據進行統計學分析。組間組內對照采用重復測量資料的方差分析,P
2 結果
2.1 材料的觀察:A、B、C三種材料都具有一定的粘稠度及流動性,適合注射填充于面部及皮膚較淺層次的要求,可用5ml注射器注射填充(圖2)。
2.2 一般情況:注射1天后所有大鼠進食、活動正常,A、B、C三組大鼠左右兩側注射部位的皮膚隆起,D組皮丘消失;1周時,A、B、C三組注射部位皮膚均稍有紅腫,無滲出等其他炎性反應,D組未見明顯異常反應;4周時,注射復合物A、B、C 的大鼠皮丘都有不同程度的減小,A組減小的較其他組明顯,各組注射部位的皮膚無明顯炎癥反應;8周時,各組大鼠注射部位表面隆起較4周時減小,觸之柔軟;12周時,A組大鼠注射部位皮丘消失變平,B、C組大鼠注射部位皮膚稍有隆起,觸之柔軟。
2.3 膠原分泌量:注射后1、4、8、12周A、B、C組與D組比較差異有統計學意義(P0.05),見表1、圖8。
2.4組織學觀察:1周時,A、B、C三種材料與周圍組織界限清楚,其間有少量的炎性細胞浸潤,以中性粒細胞為主,并有少量的巨噬細胞,無明顯的纖維包膜形成(圖3),D組已吸收,未見明顯炎性細胞(圖4);4周時,注射部位的炎性細胞已明顯減少,仍以中性粒細胞和淋巴細胞為主,A、B、C三組材料周圍有大量成纖維細胞增生及分泌的膠原,但 A組相對較少,C組較多,D組纖維細胞及膠原最少;8周時,注射部位已無明顯的炎性細胞浸潤,仍有較多的纖維細胞增生及分泌的膠原,三種復合物均有一部分被吸收,A材料吸收的最明顯;12周時,材料周圍未見明顯的纖維包膜形成,A材料已基本被吸收,B、C材料也有減少,材料的周圍被新生的成纖維細胞及分泌的膠原所取代(圖5)。
2.5 透射電鏡對成纖維細胞超微結構的觀察:在透射電鏡下實驗組成纖維細胞核大、核仁明顯、胞漿豐富,內質網增大、增粗、排列規則,線粒體數量多、體積大、嵴突出(圖6、7)
3 討論
生物材料的替代治療是現代整形外科重要的治療手段之一。在各類生物材料中,可注射軟組織填充材料因其具有應用廣泛、使用方便、操作簡單、創傷小、恢復快、術后不留痕跡、美容效果立竿見影等優點而倍受關注。
納米羥基磷灰石/羧甲基殼聚糖(N-HA/CMCTS)復合材料在骨組織工程中已得到廣泛的應用[8],大量研究表明納米羥基磷灰石具有良好的軟組織相容性。殼聚糖是幾丁質部分脫乙酰基也是現今所發現的唯一帶有正電荷的天然堿性多糖,具有多個可利用的活性基團,并且殼聚糖與納米羥基磷灰石有很強的交互作用[9-10]。羧甲基殼聚糖是殼聚糖的水溶性形式,具備殼聚糖的所有優點。
本實驗以納米羥基磷灰石/羧甲基殼聚糖(N-HA/CM CTS)復合材料作為填充材料,以大鼠為實驗動物。在組織學反應方面,第1、4周的組織切片有少量的炎性細胞浸潤,其他時段未見明顯炎性細胞,材料周圍無明顯纖維包膜形成,說明此復合物具有較好的組織相容性。第8周時,一部分材料被吸收。第12周時,A材料已基本被吸收,B、C也有吸收,填充部位可見纖維細胞及大量的膠原,說明材料可逐漸被巨噬細胞吞噬降解,其分泌的細胞因子可促進成纖維細胞遷入、增值,從而促進缺陷部位的組織增生。總之,N-HA/CMCTS復合物作為軟組織填充材料具有良好的生物相容性、生物降解性,并能促進局部組織增生。填充部位表面平整,具有很好的填充效果。配制復合物時,如果N-HA比例太大復合物的脆性增加、流動性增大,塑形性差;如果CMCTS比例太大復合物的吸收率大,影響填充效果,所以將N-HA與CMCTS按照3種不同的比例(1:1、4:6、3:7)配置而成,然而N-HA/CMCTS復合材料的配制比例怎樣才能達到最好的效果以及此應用于臨床,還有待進一步的研究。
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