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如果我們總是試想著我們面前有一面鏡子,我們會知道淚怎樣的流過臉龐,發怎樣的沾染風霜。只要你經歷的,無論是什么,沒有人可以從記憶中抹去。說遺忘了,不過是為了安慰自己的自欺欺人的說法而已。歲月如刻刀毫不留情的把那些深深淺淺的痕留在我們心中,快樂我們會欣然接愛,痛苦我們也是無處逃遁,哭喊也好,掙扎也罷,留在心上的你永遠都無法抹去。
其實也許許多時侯,我們不過是迷了路,看不清方向而已。于是在某些特定的環境下會發生某些讓我們始料不及的事。我們大可不必去在意,生活中有坎坷也有陽光。如果只想著痛,停留在原地,或者退回去,那我們的影子就會慢慢傾斜,未來的路會越來越迷惘。得和失不過是一念之間。又何必在意這表層的得到和失去呢!你沒看到,許多人因為這些表面的得到的過多、過厚而忘乎所以,失去了自己。而那些失去的人,卻依然能夠謹小慎微的固守著他們做人純良的本性而行之。 前進一步固然會是春風得意,但稍有不慎,卻也會醉失本性。退一步也許會是凄涼冷淡,卻總能冷靜的總結過去、積蓄力量等待著東山再起而直達頂峰時機。
就算從此平淡一生,那又如何呢!沒有大起也就無大落,亦無大喜無大悲矣,平平淡淡總是真。相信我們的眼睛看到的,相信我們耳朵聽到的,感受我們心里所想的,跟隨我們的意愿選擇我們的路吧!別想著什么大作為。還是老老實實的估人、踏踏實實的做事吧!讓那些流動在我們身邊各種各樣欲望的潮,永不會因我們而做停留,風就會真的把我們帶到我們應該到達的地方,那一定是一方快樂的靜土。
從高中起何穗就喜歡看Victoria’s Secret (維多利亞的秘密),但她從沒想過多年后她能站在這個國際大舞臺上,而且成為繼劉雯以來史上第二位登上Victoria’s Secret的中國模特。短短的兩年,何穗從眾多中國模特中脫穎而出,是上升最快的超模,直至2013年2月,在國際權威模特網站Models排名第13位!
盡管已經躋身國際,何穗的英文并不流利,她簡單、直白地說“模特不需要交流,只要和她們打招呼,問些簡單的問題就好了,她們不會和你聊人生聊夢想。”此次BQ特別邀請何穗為我們演繹青蛇白蛇兩種不同的美!
考大學,繼而畢業之后擁有一份穩定收入的工作,這些是所有父母心中所期望的。但是計劃趕不上變化,并不是所有的孩子都像父母所期待的一樣。何穗就是一個很好的例子,從17歲開始便成為一名模特,從此開始了她模特之路。
何穗,溫州人,繼承了父母良好的基因從小就比別的孩子個頭突出,別的孩子在想如何長高的時候,她卻想怎么才能變得矮一點,“小時候有增高藥,我特別希望有變矮的藥,我問哥哥有沒有辦法,哥哥說,等到老了的時候會自然收縮”。何穗回憶著小時候的事情,臉上時不時露出俏皮可愛的一面。
早產兒的何穗從小身體就不是特別好,為此父母特別擔心,在她小的時候便被送去學習游泳,只為鍛煉身體,而她沒想到學習游泳竟然使她的身高增長了十公分,“在小的時候,我爸媽帶我測骨齡,醫生說我能長到168cm,但是游泳能拉長身體,我沒想到會多長10公分,我一直認為女孩子的黃金身高是在168cm-172cm。”
何穗從來沒有意識到自己適合做模特,而做模特這件事在何穗看來就是命中注定的。原本就想報名參加模特培訓的,結果還沒有開始培訓就被拉去參加比賽,而比著比著,就進入了總決賽,直至最后拿了第十二屆中國模特之星大賽冠軍。“總決賽的前一天我爸問我要不要選擇這個職業,我說“拿了冠軍就做模特。”其實說的是反話,我怎么可能拿冠軍,意思就是不做。結果拿了冠軍,之后就入了這一行。”
在比賽之前何穗對于模特這個職業了解得并不多,模特并不是想做就可能做的,首先硬件條件就要達標,并不是像大部分人泛泛地認為個頭高、瘦就能做模特。事實上并非如此,比例、肩寬、氣質非常重要,達到了這些硬件條件,就算達到模特的標準了。在何穗看來模特就是設計師的工具,學習不學習不重要,重要的在于本身的條件及經驗積累。
所有的模特都想走向國際舞臺,而令每個女子心動的舞臺便是Victoria’s Secret (維多利亞的秘密) ,它似乎有著無窮的魔力,對于何穗來說能站上這個舞臺心里只剩下激動。2011年何穗成為繼劉雯以來第二位登上Victoria’s Secret 的中國模特。何穗曾在微博上發一條消息說:“有人問過我,說他們為什么選我,其實我真不知道,他們不會告訴你。我起初還以為這個面試只是形式,沒想到真選上了。如果讓我自己感覺,大概是因為皮膚比較白,而且Victoria’s Secret 的秀要微笑,而我笑起來有兩個酒窩吧。”
不僅僅是在Victoria’s Secret 的舞臺,在2011年的四大時裝周上,何穗也是大放光彩,成為時尚大牌Ralph Lauren和VivienneTam的開場模特,而那次,她在時裝周上一共走了17場秀。
如今她已經用自己的實力在國際時尚舞臺站穩腳跟,在國際權威模特網站Models排名第13位,成為炙手可熱的“中國臉”。穿梭在國際舞臺的她,少不了參加各種時尚盛會,而英文是她薄弱的地方,她俏皮地說“模特不需要交流,只要和她們打招呼,問些簡單的問題就好了,她們不會和你聊人生聊夢想。”
通常能夠自嘲的女孩都是內心極其強大,并且總被幸運光顧的。何穗大概就屬這一類。她雖說,自己不介意沒有人和她聊人生聊夢想,但是她作為一個成功的模特一路走來的人生,卻是一直與夢想有關。
Q = 《北京青年》周刊A = 何穗
得之我幸,失之我命
Q:都說模特是吃青春飯,最初決定做模特父母支持嗎?
A:到現在他們都不支持我,在他們眼中模特就是花瓶,就是吃青春飯。我父母特別希望我和其他同齡人一樣正常地考大學將來找份穩定的工作。其實我自己心里面也是這么想的,但我發現從小到大我定的目標后來都會事與愿違。
Q:模特吸引你的地方是什么?
A:無論是廣告也好,掙錢也好,名利也好,總會有個事情讓你興奮,然后推著你不停地去做,你進步的時候,大家都會接受你,用你,這個時候你就會不停地往前走,這是相互的結果,不是說我一個人往前爬就會收獲到很好的成績,肯定也有很多機會推著我走,我是那種你不推我我不走的人。
Q:在時裝周面試的時候是怎樣的一種心情?
A:我沒有抱很大的希望,得之我幸,失之我命。其實從第一天面試開始,我就期待趕緊結束。這個過程真的是很辛苦,有一些人只是不愿意說出來而已,那一年我覺得自己快要死了,一天下來累的要死,第二天睜眼又活過來了,然后又死一次又活過來,那時候初生牛犢不怕虎,有一股勁兒,但現在不會了。
Q:2011年如果要重新過一遍,你會嗎?
A:再讓我過一遍我會瘋掉的,那時一直在忙,我一個星期沒有睡過床,一直在飛,紐約工作完就趕飛機飛倫敦。我曾經20天飛了100個小時。完全沒有自己的時間,也沒有說YES或者NO的權利,因為是新人嘛。
Q:第一次參加時裝周緊張嗎?
A:一點也不緊張,我就是抱著旅游的心態去的,國際的舞臺上有那么多條件比我好的,我沒抱非常大的希望,就是想為自己的模特生涯畫上圓滿的句號,也算參加過國際時裝周,這樣自己就沒有遺憾了。
Q:能夠站在Victoria’s Secret 的T臺上,當時特別開心吧?
A:特別開心,當接到面試通知時,我真的很驚訝,當然也非常驚喜,我沒有想到可以去走這樣一場夢寐以求的秀。其實初高中時我就很愛看每年Victoria’s Secret 的,很激動,真沒想到自己能走上這個T臺。
Q:第二次走Victoria’s Secret和第一次有什么不同的感覺?
A:第二次走Victoria’s Secret我非常緊張,因為時裝周的時候腳崴了,醫生說三個月不能動,自從扭傷之后,后面所有面試上的秀都推掉了,所以第二次走Victoria’s Secret我很怕,我怕摔倒,腳崴了之后右腳踝是沒有知覺的,我第一次覺得特別可怕的事情是你的身體沒有知覺會比疼痛更可怕,疼痛你還能控制,但是沒有知覺是很害怕的一件事。
Q:這是你第一次在時裝周上崴腳?
A:是的,我記得當時那場秀我走了有十幾分鐘,在回去的時候,快結束這次走秀的時候我的腳崴了。其實崴腳對于模特來說正常,做模特沒有崴過腳就不算完整。
Q:這些都是別人看不到的辛苦。
A:無所謂啊,有時候沒有必要讓所有人都知道自己做了什么,自己知道就好了。
我是“無欲”的
Q:最初對國外的生活適應嗎?
A: 我去紐約的時候正好是冬天,又趕上下雪,天氣特別冷,人生地不熟,英語也不好。當時恰恰國內過春節,這是我第一次沒在家過春節,背井離鄉的感覺真的很不好受。
Q:現在英文怎么樣?
A:不好,盡量裝休息不要聊天(笑)。
Q:英語不好,怎么和別人交流呢?
A:模特不需要交流,只要和她們打招呼,問些簡單的問題就好了,她們不會和你聊人生聊夢想什么的。
Q:在模特職業生涯中給自己定最高點了嗎?
A:我不定,不想做就不做了。我覺得我是“無欲”的,不愛爭也不愛搶, 做事從來不為達到目的,而是有工作就認真完成,快樂最重要,也沒什么得失心。
Q:那么有沒有想過以后不做模特會做什么?
A:會做和模特沒有關系的事情吧,但是具體做什么沒有計劃,我特別不愛做計劃,我做的計劃從來沒有實現過。比如說之前我打算參加完比賽回去上學,可我沒有回去上學繼續做模特了。四大時裝周我打算做一季就不再做模特了,但現在還在做模特。所以我覺得把自己身邊的事情做好了,機會就會隨之而來。
Q:有些模特會對設計感興趣,就發展成第二職業,你有沒有這方面的打算?
A:你覺得靠譜嗎?我是天秤座的,有時候會比較悲觀,會先往壞處想。中國有這么多的設計師,你半路出家做設計師干嗎,做一個品牌要花多少錢,這么砸錢的事情還不一定做得很好,嗎要做。
Q:你去過那么多城市,哪個城市給你的印象最好?
A:說實在的我都是去工作,只要是去工作這個城市對你是沒有感情的,比如我去上海那么多次沒有一次是玩的,工作的心情和玩的心情完全是不一樣的。
Q:你平時穿著喜歡什么風格?
A:看心情啊,有時候會比較女人,有時候比較帥氣,有時候喜歡精致點的,沒有哪個女孩子喜歡一成不變吧,都會嘗試各種風格打扮自己,愛美之心人皆有之。
Q:現在會嘗試哪種風格?
A:中性風,之前都太女人了,現在就喜歡穿松垮一點的。
皮膚白是遺傳了媽媽
Q:你的皮膚很不錯,這也是別人經常夸你的一點吧?
A:經常會有人說,“皮膚好好啊!好美啊!”我的皮膚白是遺傳了媽媽,天生的。其實我沒有覺得自己有多漂亮,所以別人說我“漂亮,美”,我會尷尬、不好意思,因為我實在不知道是真的還是假的。
Q:在秀前會做哪些身體護理嗎?
A:對于我的話,要做噴霧美黑。有一次整體造型上需要我美黑,先做了一次后大家覺得還是太白;又做了第二次,美容師看了看說好了很多,但是我自己覺得還是很白;因為我從小到大一直都很白,但又特別羨慕古銅色的皮膚,覺得古銅色很性感,但是美黑兩次之后的效果和我期待的古銅色皮膚還是很有差距的,拍出來的照片也很白,最后連劉雯都在質疑我到底美黑了沒有。
Q:在美白防曬方面有沒有心得?
A:我用資生堂的防曬霜,用了有6年,在這款產品沒有進中國之前我就開始用了,效果真的很好,我也會推薦給我的好友,很多人聽我這么說會覺得我有做廣告的嫌疑,但是它效果真的很好。我直到現在都還在用。
2001年冬天,一個陰雨綿綿的日子,這天是在四川合江縣榕山鎮讀初三的杜宣梅的16歲生日。杜宣梅在日記里寫道:“任何人都希望自己有個美好的未來,有個美好的人生,可是,一個手掌腳掌都沒有的女孩,會有什么樣的未來?”或許是上蒼要賜她生日禮物吧,這一天她收到了一封陌生人的來信:“杜宣梅同學:我叫顧三軍,是綿陽市恒通機械制造公司員工。今天在報紙上看到你的成長故事,心里非常敬佩,你給了我極大的鼓舞,希望我們能成為朋友!”
1984年,杜宣梅出生于四川瀘州合江縣榕山鎮塘灣村一個農民家庭。兩歲那年,她患了一種怪病,手腕關節、腳踝關節突然脫落,只剩下皮筋相連。因沒錢醫治,母親含淚用剪刀將她的雙手手掌和雙腳腳掌剪下。從此,杜宣梅變成了“無掌”女孩,像一只折斷了翅膀的小鳥。
從4歲開始,杜宣梅在母親的幫助下,忍住劇痛用殘存的腳腕練習站立、行走,用光禿禿的手腕練習吃飯、穿衣……3年苦練,杜宣梅終于能用兩根柱子一樣的腿腳搖搖晃晃地走路,能用光禿禿的手腕吃飯、洗臉;8歲那年,她居然用雙“手”夾著筆寫出自己的名字。父母欣喜之余,送她到村上的小學上學。
杜宣梅的鞋是母親親手做的,桶形,用兩根布條緊緊地纏在小腿上。從家到學校是1公里的山路,不管刮風下雨,堅強的杜宣梅從不要父母接送。
1998年秋天,14歲的杜宣梅小學畢業考上了鎮中學。開學第一天,兩個同學對她的小聲議論,觸痛了她的神經,使她陷入自卑與絕望之中。此后,她3次退學,都被母親“押”回學校。母親沒有多少文化,也不知道怎么開導女兒,只是對女兒說:“你干不了農活,只有讀書,今后才有出路!”望著母親企盼而憂慮的目光,杜宣梅含淚堅持下來。
2001年9月,杜宣梅上了初三,心里一片灰暗。成績平平的她,不知初中畢業后,自己將何去何從。正當她困惑時,收到了顧三軍的來信,信雖然很短,但對她卻是一種鼓勵,她想不到自己居然能得到別人的贊美。她當晚就回信:“我有什么好敬佩的,我無手無腳,過了今天不知明天會是什么樣……”
顧三軍1979年出生在四川綿陽市鹽亭縣巨龍鎮,2001年7月從成都職業技術學院畢業,進入恒通機械制造公司工作。他了解杜宣梅的情況后,覺得杜宣梅太不容易了,希望能為她做點什么。接到杜宣梅的回信,他從信中感受到杜宣梅對生活對人生缺乏希望,不由得有一種隱隱的擔心,便連夜給杜宣梅寫信:“在我心目中,你就像安徒生筆下的美人魚,雖然沒有手和腳,但善良、純潔又美麗,充滿新生的渴望。其實上蒼是公平的,關了這道門,一定會打開那扇窗,只要不放棄對生活的向往,定能創造美好生活……讓我們一起為美好人生努力吧!”
顧三軍的信像一束陽光照亮了杜宣梅灰暗的心,點燃了她的夢想之燈。之后,兩人經常互通書信。隨著交往的深入,顧三軍成了杜宣梅最信任的朋友,杜宣梅跟他無話不談,而顧三軍就像大哥哥一樣開導她、鼓勵她。4年里,他們互通了160多封信。
在顧三軍的不斷鼓勵下,杜宣梅讀完了高中。2005年,杜宣梅參加高考,因心理壓力太大,只考了479分,被江西景德鎮高等專科學校英語教育專業錄取。杜宣梅感到很失落,她在給顧三軍的信中寫道:“顧大哥,我真沒用,我完了,一切都完了!”
執著男兒千里追愛,愛情花開廬山之巔
2005年8月16日,顧三軍收到杜宣梅的信后,輾轉難眠。第二天一大早,他請了一個星期的假,坐上了從綿陽開往瀘州的客車。經過兩天的周折,8月18日傍晚,他終于找到了榕山鎮塘灣村杜宣梅的家。
杜宣梅雖然沒有手掌、腳掌,但長得標致清麗,由于歷經磨礪,她身上有一種特別的氣質。第一次見面,顧三軍的心里萌生了一種別樣的情愫。在杜宣梅家的兩天里,顧三軍一邊幫杜宣梅做家務,一邊陪她聊天,開導她樹立對生活的信心。杜宣梅被他說動了,表示不再為只考上專科而苦惱,要好好讀完大學。
得知杜宣梅上大學還差一些學費,顧三軍臨別前,將身上僅有的2000元錢塞給了杜宣梅:“算是我借你的,等你大學畢業找到工作再還我。我從小就想當老師,可是這個愿望我已經無法實現了,你幫我實現好嗎?”杜宣梅望著顧三軍那含情脈脈的目光,羞紅著臉點點頭。
2005年9月,杜宣梅跨進江西景德鎮高等專科學校。不到半月,她就收到了顧三軍的3封信。杜宣梅擔心這樣下去會陷進情感的漩渦,而自己又承受不起這份沉重,于是回信:“顧大哥,以后沒事就別再寫信了,我學習很忙,沒時間回。”其實,杜宣梅心里也渴望愛情,但因為手腳殘疾,她始終張不開愛情的翅膀。盡管杜宣梅不領情,但顧三軍還是一如既往地給她寫信。杜宣梅只是偶爾只言片語地給他回上一封。一段時間后,杜宣梅干脆斷絕了與顧三軍的書信往來。
大二剛開學的一個下午,顧三軍懷抱著火紅的玫瑰突然出現在杜宣梅面前:“宣梅,別再拒絕我,讓我陪伴你一輩子!”杜宣梅真想一頭撲進顧三軍的懷里,但是她最終還是理智地控制了自己。她接過顧三軍手中的玫瑰說:“我沒手沒腳,不管跟了誰都是一種拖累,我不想拖累別人。”
雖然杜宣梅沒有答應他的求愛,但顧三軍并沒有泄氣,他在景德鎮一家貿易公司找了份工作,一到周末,他就帶著小禮物到學校找杜宣梅,陪她看電影、逛街……他相信,總有一天會敲開杜宣梅的心窗。一天傍晚,顧三軍陪杜宣梅在校園散步,閑聊中得知杜宣梅幾年前就想去登廬山,可是她行走不便,這心愿一直未了。
2007年3月的一個周末,陽光明媚,在顧三軍鼓勵下,杜宣梅和同寢室的3位姐妹來到廬山腳下。顧三軍背著杜宣梅,沿著陡峭的山路艱難地往上攀越。看著滿頭大汗的顧三軍,同學們想上前幫忙,被他婉言謝絕:“不用了,把這個機會給我吧!”
登上廬山頂端,北眺一瀉千里的長江,南望煙波浩渺的鄱陽湖,杜宣梅關閉已久的心窗,驀然被打開。她情不自禁地撲進顧三軍的懷里,顧三軍驚喜不已,擁著她深情相吻……
有愛相伴風雨兼程,“美人魚”迎來美麗人生
廬山之行后,杜宣梅漸漸變得自信、陽光起來,她的臉上常掛著幸福的笑容。
杜宣梅知道,在信息時代,計算機將成為工作生活必不可少的工具。望著同學們熟練地操作電腦,杜宣梅擔心自己如果不會電腦,將來不能適應工作需要,于是每天放學后她就到學校附近的網吧練習電腦操作。但是她沒有手掌,無法使用鍵盤和鼠標,練習了幾天就退縮了。顧三軍安慰她:“電腦的鍵盤和鼠標本來是為有手指的人設計的,而你沒有手指,學會電腦操作肯定是一個挑戰,你只有付出比別人多十倍、百倍甚至上千倍的努力,才能夠學會。”
顧三軍找到一家電腦培訓中心,給杜宣梅報名參加短期夜班電腦培訓。每天晚上,他陪杜宣梅來到電腦培訓中心練習電腦操作。在顧三軍的幫助下,杜宣梅用兩只殘腕相互配合,反復訓練了五六天,總算能勉強使用鼠標。接下來,杜宣梅用殘腕凸起的部位練習敲擊鍵盤。可是,殘腕畢竟不是手指,擊輕了按不下鍵,擊重了幾個鍵又同時按下……她將鍵盤扔到一邊,氣餒地說:“不練了!不練了!”顧三軍一邊給杜宣梅捏肩揉背,一邊激勵她:“這點困難就把你嚇倒了,今后還怎樣當老師呀!”杜宣梅長長地嘆了口氣,又拾起鍵盤,重新練習。3個月培訓結束時,杜宣梅居然能用殘腕熟練敲擊任意鍵,每分鐘能打40多個字,順利通過了結業測試。
2008年7月,杜宣梅以優異成績大學畢業,顧三軍陪她回到四川合江縣尋找工作。可是,因為她手腳殘疾,屢屢被拒之門外。8月下旬,合江縣榕山鎮明德小學公開招考教師,剛報名兩天,就有了上百人報名。在顧三軍的鼓勵下,杜宣梅鼓起勇氣報了名。筆試時,杜宣梅憑著扎實的知識功底考了第一名;試講時,她精心設計了教案,又制作了幻燈片配合教學,教學生動活潑,深得評委的好評。結果,她從眾多的競爭對手中脫穎而出,被聘為明德小學教師。
2008年9月1日,杜宣梅捧著教科書,走上明德小學五(2)班講臺。第一堂課,杜宣梅沒有講課,她平靜地對學生說:“在我兩歲的時候,我失去了手掌和腳掌。有很多年,我非常自卑,直到遇到一個人,他把我形容為安徒生童話里的美人魚,一下子照亮了我的生命。我從此張開隱形的翅膀,努力地飛,努力飛得更高……”聆聽著她娓娓的講述,孩子們深深感動了,紛紛鼓掌……
關鍵詞 受信者熟悉度 伴隨情緒 人際信任
1 引言
大學生個人生活范圍比以往有了進一步擴大,除了接受學校和家庭的主導教育之外,還要接觸并適應社會,進行社會交往并形成自己的社會關系。在人際交往中,大學生對人性的態度往往以人際信任程度表現出來。有研究表明,大學生在人際信任量表及其分量表上的平均得分均低于理論水平,而差異則達到了顯著性水平;大學生的社會信任度極低,表現在團隊協作精神缺乏、人際交往中自我封閉、很難與他人溝通、我行我素、獨來獨往等。然而,個人如果缺乏起碼的信任感,對一切事物都有所懷疑,做事難免就會謹慎過度,久而久之便很容易使自己陷入焦慮不安之中,形成心理亞健康,對自己的身心健康造成危害,甚至會導致嚴重的心理疾病。因此,對影響大學生人際信任的影響因素的研究就變得意義重大。
以往有關人際信任影響因素的研究,無論是理論性還是實證性的,在很大程度上都忽視了情緒狀態這個因素在信任判斷中的作用。然而,事實上很多重要的信任決策都是在豐富的情感背景中做出的。一方面,信任判斷本身就是在豐富的情感背景中做出的;另外,進行信任判斷之前已有的情緒,即伴隨情緒(incidental emotion)總是會影響到個體的另一個不相關的決定或判斷。同時,有研究發現對受信者的熟悉程度對其作信任判斷時存在顯著的影響。因此,本研究試圖從實證的角度探究對受信者的熟悉度在伴隨情緒對大學生人際信任產生影響的過程中的作用。以期對提高大學生的人際信任度、完善人際交往模式、提高心理健康程度、增強社會適應能力等工作提供參考。
2 研究方法及過程
本實驗假設對受信任者的熟悉程度會影響伴隨情緒和人際信任兩者間的關系。實驗目的之一,證明在陌生的的受信任者與熟悉的受信任者兩種不同條件下情緒對人際信任的影響是不同的。第二,證明憤怒、感恩和中性的情緒狀態會對人際信任有不同的影響作用。
2.1被試
在陜西三所高校抽取181名在校生作為被試。總共有175名被試完成了在實驗情境中的調查。其中男生73人、女生108人、平均年齡19歲(SD=1.10)。另外,有6個無效調查。實驗中將被試隨機的大概平均分派到12種情境中(每一種情境中被試的數量在14到17個之間)。每一次調查安排2到20個被試在同時進行。
2.2實驗設計
本實驗是一個2(熟悉度)×2(順序)×3(情緒)的實驗設計,根據設計將被試隨機的分配到十二個狀態中。本實驗使用了兩種熟悉度條件(陌生人、熟人)、三種不同的情緒條件(憤怒、感恩、中性)、兩種順序條件,一個順序條件是情緒誘發前選擇,即讓被試在情緒誘發之前選擇受信任者;另一個順序條件是情緒誘發后選擇,即讓被試在完成情緒誘發之后選擇受信任者。也就是讓被試在不同伴隨情緒狀態下對不同熟悉程度的對象進行信任判斷。這種處理可以使我們從伴隨情緒對信任判斷的影響中發現對受信者的熟悉程度的影響作用。
2.3實驗材料
(1)內容為包括多個人物的生活場景照片,用多媒體呈現;(2)情緒誘發問卷:第一頁中要求列出令被試憤怒或感恩的三到五件事,第二頁要求被試對令他最憤怒或最感恩的一件事進行詳細描述;(3)信任問卷,采用大學生態度信任量表,本量表改編自Johnson-George和Swap(1982)的特定人際信任量表,改編的主要目的是使問卷的內容符合大學生的實際生活。本研究所采用的信任量表包括10個項目,每項都采取7點評分,等級范圍從1(完全同意)到7(完全不同意)。這些項目包括的問題,比如:指定的這個人有多大可能會兌現承諾,送給你他答應過的禮物;在多大程度上相信他會償還從你這兒借走的100元錢。量表里的其它一些項目還測量了信任的意圖,例如,被試會在多大程度上信任指定的受信任人,讓他幫忙把一個重要的郵件拿去郵寄。這個信任量表的各項目之間是密切相關,該問卷的alpha=0.86。用于在調查的最后一個階段收集人口統計信息,包括年齡、性別以及關于被試與受信任者之間關系的詳細情況的調查表。
2.4實驗過程
首先要求被試完成直接書寫任務,以誘緒。本實驗包括兩個被試間的情緒條件,這個設計用來誘發憤怒和感恩兩種情緒。在情緒誘發完成之后,用多媒體向被試呈現實驗材料中提到的人物照片,要求被試在照片的人物中自己指定一位,隨后要求被試將選定的人物作為自己的受信任者。接下來,要求被試針對指定的受信任者完成信任問卷,也就是讓被試在伴隨情緒狀態下完成對一個陌生人的信任判斷。
其次是進行啟動操作,先讓被試完成啟動任務,就是回想一段他本人曾經感受到某種情緒(因某個人感到非常的憤怒或非常感激)的事件,以此完成情緒誘發。之后的操作跟直接書寫任務中的一致,先呈現照片,再指定受信任者,最后完成信任問卷。在中性情緒條件下,要求被試詳細描述剛剛離開的那個教室,細致到其他人都能根據描述完整的把它畫出來,如此要求的目的在于保持在各種條件下的任務用時和性質是一致的。
在被試完成了以上調查之后,要求被試回答他們認為的這兩項研究的意圖是什么;并且詢問他們是否認識照片中的人物。
2.5結果分析
首先檢驗順序條件和人口統計變量對大學生人際信任的影響。結果發現兩者對信任判斷均沒有顯著性的作用。因此在隨后的分析中從順序條件中分離出了數據。因為有3個陌生受信任者組的被試認識他的信任目標,因此我們在結論中沒有采用他們的數據。
在方差分析中,用信任作為因變量,情緒狀態和熟悉狀態作為自變量,結果發現伴隨情緒(F(2,163)=10.53,p﹤0.001)對信任目標的熟悉度(F(1,163)=99.61,p﹤0.001)的主要效應,發現伴隨情緒和對信任目標的熟悉度之間存在相互作用(F(2,163)=10.18,p﹤0.001)。因為情緒和信任度之間的相互作用是顯著的,因此可以深入到兩種熟悉程度條件下來分析數據,并分別檢驗每一種熟悉狀態對情緒的影響力的作用。從試驗結果可以發現在陌生人關系狀態下(F(2,82)=18.46,p﹤0.001)情緒條件對大學生的信任評價有顯著的影響,但是在熟悉的關系狀態下(F(2,87)=0.36,n.s.)情緒條件對信任評價沒有顯著的影響,這一點支持了本實驗最初的假設。本文在圖1描述了各種條件下的信任分數的均值。盡管對熟悉的受信任者的高的平均信任分數可能會表現出天花板效應,但是對于憤怒和感恩的反應區分是基本一致的。
在陌生關系條件下,實驗結果表現被試在憤怒狀態下的信任判斷比在感恩狀態下(均數分別是4.43和5.76,t(55)=6.02,p﹤0.001)的信任判斷及中性狀態下(均數分別是4.43和5.05,t(54)=2.76,p﹤0.01)的信任判斷要顯著的低。此外,實驗結果還表明被試在感恩條件下表現出的信任判斷要比在中性條件下(t(55)=3.26,p﹤0.01)表現出的的信任判斷要顯著的高。
3 結論
本實驗在情緒條件對人際信任的影響上確定了一個重要的區分條件,當受信任者是陌生人,伴隨的的憤怒會降低信任評價而伴隨的的感恩會增加信任評價。然而,當受信任者是熟人,伴隨的的情緒將不會對信任評價產生影響。這一發現也支持了本研究關于情緒狀態作為信任關系的重要信息的界定。當相關的信息是有限的,個體在對一個陌生的人進行可信度判斷時,結果可能取決于個體當時的情緒狀態。然而,當相關信息不是有限的,也就是說在一個平常的情境下對一個熟悉的受信任者進行可信任度的判斷時,便不會取決于個體的情緒狀態;取而代之,個體可能會采取原先形成的信任判斷進行評價。盡管在本實驗發現情緒對熟悉的受信任者的信任判斷沒有影響,但非常有可能的是,在特定的情境下或在一種積極效價和消極效價混合的體驗下,情緒也可能影響信任者對熟悉的受信任者的信任判斷。
參考文獻:
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【摘要】 目的:探索人基質細胞衍生因子1(SDF1)對間充質干細胞(MSC)增殖的影響. 方法:采用經典的全骨髓貼壁法培養MSC, 通過成骨、成脂肪等多向誘導分化以及流式細胞儀分析其表面標記(CD133,CD34,CD90,CD105)等鑒定MSC特征;以P3MSC為實驗材料,采用H3TdR參入法分析SDF1對MSC增殖的影響. 以50 nmol/L渥曼青霉素,10 mmol/L LY294002,50 mmol/L PD98059,0.1g/L AMD3100等分別處理P3MSC, 觀察SDF1影響MSC增殖的信號機制. 結果:培養的MSC呈現出CXCR4,CD90和CD105強陽性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;含有100 mg/L SDF1的20 mL/L促進了MSC增殖,而含有100 mg/L SDF1的150 mL/L FBS抑制了MSC增殖. SDF1抑制MSC增殖的效應與其使MSC停滯在G1/S期有關. 促分裂原活化蛋白激酶P38MAPK阻斷劑SB203580和CXCR4阻斷劑AMD3100取消了SDF1抑制MSC增殖的效應,而細胞外信號調節激酶阻斷劑PD98059加強了SDF1抑制MSC增殖的效應. 結論:SDF1/CXCR4介導的抑制MSC增殖的效應與促分裂原活化蛋白激酶和細胞外信號調節激酶等信號分子有關.
【關鍵詞】 人基質細胞源衍生因子1; 間充質干細胞;增殖;促分裂原活化蛋白激酶
【Abstract】 AIM: To explore the effect of stromal cellderived factor1 alpha (SDF-1α) on mesenchymal stem cell (MSC) proliferation. METHODS: MSC culture was performed with the classical whole bone marrow adhering method; MSC was identified through multidifferentiation and surface marker assay (CXCR4, CD133, CD34, CD90,CD105); After MSCs were treated with 100 mg/L SDF1a, 50 nmol/L wortmannin, 10 mmol/L LY294002, 50 mmol/L PD98059 and 0.1 g/L AMD3100 inhibitors, the proliferation rates were measured by [3H]thymidine incorporation assay. RESULTS: Cultured MSCs had the ability of multidifferentiation and highly expressed CXCR4, CD105 and CD90. 20 mL/L FBS including 100 mg/L SDF1a promoted MSC proliferation, however exposure of MSCs to 150 mL/L FBS including 100 mg/L SDF1a could induce marked inhibition of MSC proliferation through the arrest in the G1/S checkpoint. And its inhibitory effect on MSC proliferation was partly reversed by p38 mitogenactivated protein kinase (MAPK) inhibitor SB203580 and CXCR4 inhibitor AMD3100. However its inhibition effect on MSC proliferation was obviously enhanced by extracellular signalregulated kinase (ERK1/2) inhibitor PD98059.CONCLUSION: The effect of SDF1a on MSC proliferation is related to ERK1/2 and p38 MAPK.
【Keywords】 hSDF1α; mesenchymal stem cell; proliferation; MAPK
0 引言
骨髓來源的間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cell, MSC)在一定條件下可以分化為心肌、成骨、軟骨、脂肪、胰島、肌腱等多種類型的細胞[1]. 在心肌內、靜脈內、冠脈內等不同途徑移植MSC或粒系集落刺激因子動員骨髓發現其可以遷移到心肌梗死部位,通過參與血管新生、心肌再生等改善修復受損的心臟[1]. 有研究[2]發現,SDF1/CXCR4軸不僅調控造血干細胞(hematopoietic stem cell,HSC)的遷移,而且也影響HSC的增殖和分化. 新近研究發現MSC表達CXCR4[3],顯示SDF1/CXCR4軸可介導MSC的遷移[4]. 但是就SDF1/CXCR4軸是否影響MSC的增殖分化,目前仍不清楚. 我們利用H3TdR參入法檢測SDF1α對MSC增殖的影響,并初步探索SDF1α影響MSC增殖的信號機制.
1 材料和方法
1.1 材料 SPF級WISTAR大鼠3只,體質量(230±20) g. 動物在屏障系統環境下,用專用飼料和滅菌水分籠飼養. 動物合格證號為SCXK(鄂)2003005,實驗動物使用許可證號為SYXK(鄂)2004021(均由湖北省實驗動物中心提供). DMEM培養基(美國Gibcol公司);胎牛血清(fetal bovine serum,FBS,杭州四季青生物工程有限公司);胰酶(美國Sangon公司);CO2細胞培養箱(美國科學儀器公司);倒置熒光顯微鏡(日本Nikon公司);恒低溫切片機(德國Leica公司);圖像分析系統(美國Media Cybernetics公司);hSDF1α(美國upstate公司);CD105, CD90, CD133和CD34(美國eBioscience公司);地塞米松、β磷酸甘油、維生素C、胰島素、4,6聯脒2苯基吲哚(4,6diamidino2phenylindolediacetate,DAPI)、SDF1特異性受體CXCR4阻斷劑AMD3100, 0.1 g/L(美國Sigma公司);hSDF1a(美國Upstate公司);磷酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3kinase, PI3K)阻斷劑, 渥曼青霉素(50 nmol,美國Alexis biochemicals公司);絲裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase, MAPK)阻斷劑PD98059(50 mmol,美國eBioscience公司).
1.2 方法
1.2.1 MSC的培養[1] 采用全骨髓法. 給予大鼠腹腔注射肝素5000 U,15 min后斷頸處死, 收集雙側脛股骨中全骨髓. 按1×109細胞/L接種于75 cm2培養瓶,24 h后換液,去除未貼壁的細胞. 以后3~4 d 完全換液1次,12~14 d 后細胞密度達80%~90%,用2.5 g/L的胰酶消化后1∶3傳代, 記為P1代MSC(P1MSC). 隨后按上述方法傳代培養. 培養的P3MSC中加入終濃度為50 mg/L的DAPI溫育1 h,熒光顯微鏡下觀察其DAPI標記的效率為100%[1]. 消化收集P3代的MSC(P3MSC),制成1×109/L細胞懸液,以備遷移實驗. 細胞培養條件:含150 mL/L的FBS以及1×105/L青霉素、100 mg/L鏈霉素和0.25 mg/L兩性霉素B的DMEM培養基,37℃ 50 mL/L CO2飽和濕度.
1.2.2 MSC的鑒定
1.2.2.1 成骨誘導 P3MSC培養至90%融合后6孔板加入成骨誘導液(150 mL/L FBSDMEM,含地塞米松4×10-6 g/L, β磷酸甘油1 g/L, 維生素C 0.5 g/L),每72 h換液,誘導2 wk. Von Kossas染色鑒定礦化結節.
1.2.2.2 成脂肪誘導 P3MSC培養至90%融合后6孔加入成脂肪誘導液(10 mg/L胰島素), 每72 h換液. 蘇丹Ⅲ染色鑒定脂肪細胞.
1.2.2.3 流式細胞術鑒定MSC表面標記特征 用1 mL注射器將MSC(密度為1010/L)吹打混勻后,取600 μL(至少含有2×106個細胞),等分為4份,分別加入4個Eppendorf管中. a管為標準對照,加入4 μL大鼠IgG1FITC及4 μL大鼠IgG1PE mAB(熒光二抗);b管加入4 μL CD34FITC和4 μL CD133PE mAB(一抗);c管加入4 μL CD90 mAb(一抗);d管加入4 μL CD105 mAB(一抗),4℃下避光孵育40 min,洗滌液1000 r/min離心5 min,用PBS洗1~2 次. 在c, d管中加入8 μL大鼠IgG1FITC(熒光二抗),4℃下避光孵育20 min. 洗滌液洗2次. 加入固定液1 mL,上流式細胞儀(Beckman Coulter)檢測表面標志,應用Cotfit軟件分析結果.
1.2.2.4 免疫組化鑒定MSC表面標記特 于24孔板中培養P3MSC至90%融合后,PBS洗3次,40 g/L多聚甲醛固定15 min. 羊血清封閉2 h,加小鼠抗大鼠CD105,小鼠抗大鼠CD90和兔抗大鼠CXCR4等一抗4℃孵育過夜. PBS洗3次,分別加羊抗小鼠和羊抗兔綠色熒光二抗室溫孵育2 h. PBS洗3次,PBS甘油(50%∶50%,封片). 熒光顯微鏡下觀察成像分析.
1.2.3 H3TdR參入法分析MSC增殖 取24孔培養板,向每孔內加入2.5×104 P3MSC培養(150 mL/L FBS)24 h,20 mL/L FBS培養24 h. 隨后分別給予不同處理即:150 mL/L FBS+100 mg/L SDF1,20 mL/L FBS+100 mg/L SDF1和150 mL/L FBS. 分別濃度為3.7×1010 Bq/L (1×103 uCi/L)的3HTdR 0.1 mL,混勻后分別培養0.5, 1, 12, 24和48 h. PBS漂洗細胞3次,甲醛固定10 min. 于4℃ 50 mL/L三氯醋酸漂洗3次. 每孔加入0.5 mL 0.3 mol/L NaOH 60℃水浴處理30 min,冷卻至室溫. 收集上述裂解液移入閃爍瓶中,加入5 mL閃爍液,用液體閃爍計數器計數每分鐘的閃爍次數(cpm), 測定DPM值,反映細胞DNA合成速率. 每組重復3次. 在上述基礎上,分別給予P3MSC不同處理即:PI3K抑制劑渥曼青霉素、ERK1/2阻斷劑PD98059(50 mmol/L), p38MAPK阻斷劑SB230580(30 mmol/L)和CXCR4阻斷劑AMD3100(0.1 g/L). 其它按上述方法執行.
1.2.4 細胞周期的測定 取24孔培養板,向每孔內加入2.5×104 P3MSC培養(150 mL/L FBS)24 h,20 mL/L培養24 h. 隨后分別給予不同處理即:150 mL/L FBS+100 mg/L SDF1,20 mL/L FBS+100 mg/L SDF1和150 mL/L FBS. 分別于處理后培養0.5, 1, 12, 24和48 h胰酶消化收集細胞,制成單細胞懸液. 700 mL/L乙醇固定細胞過夜,5 g/L的RNA酶常溫消化細胞15 min. 25 mg/L的PI染料4℃避光處理細胞15 min. 隨后流式細胞儀檢測分析細胞周期,記錄靜止期與DNA合成前期(G0/G1)細胞比例.
2 結果
2.1 MSC的培養 由于造血干細胞不貼壁生長, 經過數次換液, 懸浮的造血干細胞逐漸被清除, 貼壁MSC呈勻一梭形成纖維細胞樣形態. 呈集落生長,增殖迅速. 原代MSC潛伏期約2~4 d,對數生長期3~5 d,此后進入平臺期. 傳代MSC潛伏期較短,約1~2 d, 對數生長約3~4 d,可連續傳4~6代. 一般原代細胞4~5 d可傳代,傳代細胞2~3 d可再次傳代.
2.2 MSC的鑒定 MSC具有成骨成脂肪等多向分化潛能(圖1). 流式分析表明MSC低表達CD34(1.5%), CD133(1.8%);高表達CD90(96.0%), CD105(97.0%). 免疫組化分析結果顯示,MSC可高表達CD90, CD105和高表達SDF1受體CXCR4(圖2).
A: MSCs誘導分化為脂肪細胞 ×200; B: MSCs誘導分化骨細胞 ×100.
圖1 MSCs成骨成脂肪誘導分化(略)
A: MSC表達CXCR4; B: MSC表達CD105; C: MSC表達CD90.
圖2 MSC表面特征免疫組化檢測結果 SP ×200(略)
2.3 SDF1對MSC增殖的影響 在SDF1α處理后不同時間點,100 mg/L SDF1對MSC增殖的影響與血清濃度密切有關,其中含100 mg/L SDF1的20 mL/L FBS促進MSC增殖,而含100 mg/L hSDF1的150 mL/L FBS抑制MSC增殖(圖3).
A: MSC表達CXCR4; B: MSC表達CD105. aP
圖3 SDF1對MSC增殖的影響(略)
2.4 SDF1影響MSC增殖的信號機制 在不同阻斷劑處理后不同時間點,PI3K阻斷劑渥曼青霉素和LY294002, ERK1/2阻斷劑PD98059加強了SDF1對MSC增殖的抑制作用,而SDF1特異性受體CXCR4阻斷劑AMD3100, p38MAPK阻斷劑SB230580部分取消了SDF1對MSC增殖的抑制作用(圖4).
aP
圖4 SDF1影響MSC增殖的信號機制(略)
2.5 SDF1對MSC細胞周期的影響 100 mg/L SDF1處理MSC后不同時間點,G0/G1期的MSC明顯增多, 且呈現出時間依賴的關系(圖5).
3 討論
近年來,許多學者研究SDF1/CXCR4軸介導HSC動員遷移的信號分子機制發現:利用PI3KAKT途徑抑制劑Ly290042或渥漫青霉素等時可明顯抑制HSC的遷移 [5-9]. 同時從SDF1/CXCR4軸對HSC增殖分化的研究認識到,SDF1對HSC的幸存能力、增殖的調節主要與PI3KAKT, ERK1/2等信號轉導通路有關[6-7]. SDF1/CXCR4軸介導MSC遷移的機制與HSC非常相似.
aP
圖5 SDF1對MSC細胞周期的影響(略)
本研究選用具有多向分化潛能的MSC作為實驗材料,并采用最新的鑒定MSC的標準[10]. 同時利用免疫細胞化學的方法進一步確認MSC表達SDF1受體CXCR4. 采用H3TdR參入法分析SDF1對MSC增殖的影響. 研究結果發現2% FBS和SDF1處理后促進了MSC的增殖,15% FBS和SDF1處理后抑制了MSC的增殖. 前者與Kortesidis等[11]報道的一致,后者存在差異,主要與MSC培養體系不同有關. 其原因在于: ① 實驗體系不同. 即Kortesidis等采用的是無血清的多種細胞因子組合誘導MSC增殖的培養體系,而我們為有血清的培養體系;② 評價增殖的方法不同. 即Kortesidis等[11]采用的是MSC克隆形成法(CFUF)評價,而我們采用的是H3TdR參入法分析MSC增殖;③ 實驗材料不同. 即Kortesidis等[11]采用的人MSC,而我們采用的是大鼠MSC. 這些結果一方面提示血清中復雜的成分在MSC增殖過程發揮著重要作用,另一方面提示當加入外源性誘導因子如SDF1后,與血清中的誘導因子交互作用而導致MSC增殖呈現出不同的效應.
在此基礎上,我們進一步分析SDF1對MSC增殖影響的信號機制發現:CXCR4阻斷劑阻斷SDF1/CXCR4對MSC的作用后,其抑制增殖的效應幾乎被取消,表明SDF1具有抑制MSC增殖的作用,并且這種作用與其受體CXCR4有關. 已知SDF1與其受體CXCR4結合后,將激活CXCR4偶聯的G蛋白下游信號分子. 本研究還發現ERK1/2途徑阻斷后進一步加劇了MSC增殖的抑制,而p38MAPK途徑阻斷后反而使SDF1/CXCR4介導的MSC增殖抑制緩解甚至導致MSC表現為增殖加強. 同時檢測細胞周期發現SDF1處理的MSC更多的處于G0/G1期,進一步說明SDF1具有抑制MSC增殖的作用. 這些與研究報道的SDF1/CXCR4通過ERK1/2途徑促進HSC增殖的作用相反[6]. 提示SDF1/CXCR4介導的增殖反應與其作用的細胞類型有關.
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