海洋深處

前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇海洋深處范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。

海洋深處范文第1篇

身懷絕技才能獲得食物

深海中大多數(shù)是海盆、海山環(huán)境，而這樣的環(huán)境中生物相對稀少，因此有人將深海稱為“海洋中的沙漠”，這里的動物雖然個體比較少，但種類卻不少。

由于可獲取的食物來源有限，所以能夠在深海生活的動物大都身懷絕技，在尋找食物時各顯神通。如深海魚類大多數(shù)都有一張巨大的嘴巴、又尖又長的牙齒和一雙特別大的眼睛，一旦有其他魚類或者動物被它們咬住，便在劫難逃，它們會死咬住獵物不放，直到將獵物吞噬消化掉。一頓大餐之后，它們可以很長時間不進食，然后抓緊時間繁育后代。

有的深海魚平時將身體埋在泥沙中，在嘴巴上方長出一根長柄，柄的末端有一個發(fā)光的小球，作為誘餌不停地擺動，吸引小魚或者其他小動物前來，一旦進入它的攻擊范圍，它便突然躍起，張開血盆大口將小魚一口吞掉。由于深海生物貧瘠，這些魚類獲得食物的機會也很小，因此它們被稱為機會主義者。

還有一些深海動物靠濾食海水中的食物顆粒生活，如海綿、珊瑚、海葵等。由于深海的海水中食物顆粒非常缺乏，很多濾食性的深海動物和上述機會主義的捕食魚類的新陳代謝率都很低，生長非常緩慢，所以很多深海動物的壽命都非常長。如有的海綿，經(jīng)過上萬年才長到一兩米長。

適應(yīng)海洋環(huán)境的奇葩形態(tài)

為了適應(yīng)深海環(huán)境的特殊性，深海動物也衍生出很多特殊的形態(tài)。當(dāng)然，不是所有深海生物都長得丑陋，只是由于它們獲得食物的機會很小，所以許多深海魚長著捕食需要的大嘴巴、長牙齒，以保證不讓到口的獵物逃掉，它們的腹部都很小或者已經(jīng)退化。如冷泉和熱液口的生物群落優(yōu)勢種潛鎧蝦，由于其食物來源正是在它們的身體上生長的化能微生物，因此潛鎧蝦不再需要利用視覺去尋找食物，因此其眼睛也在逐漸退化。更有一些海綿動物，其形態(tài)看上去很像巖石。

身體的顏色能當(dāng)武器

深海在海水的真光層以下，完全沒有光線，可以說是名副其實的黑暗世界。因此，有的深海動物為了更好地求偶和尋找同伴，逐漸讓自己的體色呈現(xiàn)為在海水中傳播最遠、最容易被同類發(fā)現(xiàn)的大紅色，而這類生物往往具有發(fā)達的視覺和比其淺海親戚更大的眼睛，如長刺石蟹。

由于深海的食物稀缺，而制造體色的色素需要能量，也有許多深海動物選擇不需要色素的白色來節(jié)省能量。有時候，同種深海動物的生活范圍小，聚在一起，也不需要靠視覺去尋找同伴和食物，因此，有的深海動物的體色也是純白色的，如白瓷蟹、海綿、珊瑚、海葵等種類。有的深海動物，為了躲避天敵，身體的大部或者全部呈透明色。有的深海動物在其生活史的某個階段，如繁殖階段，還會發(fā)出五顏六色的生物光。 海葵

特殊的身體構(gòu)造

有人好奇深海動物到淺海或者海面后會不會脹爆？其實深海動物的身體構(gòu)造都是內(nèi)外通透的。例如蠕蟲類的動物海參，其身體是一個囊狀，但有口和兩個通道使其皮囊內(nèi)外相通，這樣深海水壓雖然很大，但海參身體內(nèi)外的壓力是相同的，因此即使到了淺海或者海面，其身體內(nèi)外的壓力同時變小，內(nèi)外壓仍然相同，所以不會爆裂。

甲殼動物的蝦類和蟹類，其甲殼與身體的結(jié)合處本來就有很多軟組織作為通道，用來平衡身體內(nèi)外的水壓。而海綿動物、腔腸動物等，其身體上有大量的小孔作為通道，也不會因此而受到損傷。至于動物體最小的組織單元細胞，雖然是一個微型的囊狀體，但其細胞膜上也有無數(shù)的小孔作為物質(zhì)交換的通道，可以傳遞水壓使細胞內(nèi)外的壓力平衡。

即使是海洋中的龐然大物抹香鯨，為了追蹤獵物，也可以在幾十分鐘內(nèi)一口氣從海面潛到 2 000多米的深海，是絕對的潛水冠軍，然而外部水壓變化巨大但抹香鯨卻毫發(fā)無損。雖然抹香鯨與人類一樣，也是用肺呼吸，但抹香鯨已經(jīng)適應(yīng)了海洋的捕獵生活，在上浮時有特殊的釋放肺部空氣壓力的機制，因此不會因為水壓變化而損傷肺部。

深海里衍生的奇特行為

海洋深處范文第2篇

這幾天，小布一直在寫區(qū)塊鏈技術(shù)相關(guān)的行業(yè)落地訊息。但是寫了這么多行業(yè)，其實最終區(qū)塊鏈技術(shù)解決的都是一個問題：信任。

2017年下旬，眾安科技聯(lián)合連陌科技等合作伙伴，推出“步步雞”品牌，將區(qū)塊鏈、人工智能、物聯(lián)網(wǎng)等技術(shù)應(yīng)用在農(nóng)業(yè)養(yǎng)殖上。其產(chǎn)品“步步雞”成為網(wǎng)紅，價格賣到239元一只。

“步步雞”項目利用物聯(lián)網(wǎng)+區(qū)塊鏈技術(shù)，從雞苗供應(yīng)、養(yǎng)殖、檢疫，到屠宰、物流等環(huán)節(jié)的信息進行真實的記錄且不可篡改。每只雞都配備一只運動腳環(huán)，也就是“雞牌”，相當(dāng)于一張具有唯一標示的“身份證”。它除了能夠詳細記錄雞的日齡、產(chǎn)地信息、防疫情況等基本信息外，還可以實現(xiàn)實時記錄雞只地理位置和計步信息。

為什么養(yǎng)雞還要這么大費周章？那“雞牌”又解決了什么樣的一個問題呢？

當(dāng)然是目前普遍存在的信任危機。在食品行業(yè)，從劣質(zhì)油到“外賣工廠”等等，如果沒有親眼看到整個過程，你永遠不知道你所吃的是怎么被加工出來的。菜市場那些生鮮活禽，誰也不知道是不是激素養(yǎng)大的。而區(qū)塊鏈技術(shù)的應(yīng)用，就是解決信任危機的有效方式，它的一大特質(zhì)就是去信任。

市場信任既然如此困難，那就直接去掉信任，代以一種完善的規(guī)則來運行，并且此規(guī)則將消除所有的信息不對稱，保障交易平等又很好的保護交易人隱私。而區(qū)塊鏈的去中心化，又使得沒有任何一個人可以強大到改變這個規(guī)則，公信力如天網(wǎng)一樣，誰都無法接觸卻又無處不在的發(fā)揮效力。

從消費者端看，通過區(qū)塊鏈技術(shù)可以滿足知情權(quán)，選擇自己信任的農(nóng)產(chǎn)品；從采購商角度來講，擔(dān)心批量購買的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量不好，則可以通過對種植過程以及大數(shù)據(jù)分析，選擇信任的農(nóng)戶。

關(guān)于農(nóng)業(yè)+區(qū)塊鏈，還是可以期待的。除了養(yǎng)雞，區(qū)塊鏈將會在物聯(lián)網(wǎng)農(nóng)業(yè)、農(nóng)產(chǎn)品溯源、農(nóng)村金融等6大領(lǐng)域大有作為。

1．物聯(lián)網(wǎng)

目前制約農(nóng)業(yè)物聯(lián)網(wǎng)大面積推廣的主要因素就是應(yīng)用成本和維護成本高、性能差。而且物聯(lián)網(wǎng)是中心化管理，隨著物聯(lián)網(wǎng)設(shè)備的暴增，數(shù)據(jù)中心的基礎(chǔ)設(shè)施投入與維護成本難以估量。

物聯(lián)網(wǎng)和區(qū)塊鏈的結(jié)合將使這些設(shè)備實現(xiàn)自我管理和維護，這就省去了以云端控制為中心的高昂的維護費用，降低互聯(lián)網(wǎng)設(shè)備的后期維護成本，有助于提升農(nóng)業(yè)物聯(lián)網(wǎng)的智能化和規(guī)模化水平。

2．大數(shù)據(jù)

傳統(tǒng)數(shù)據(jù)庫的三大成就，關(guān)系模型、事務(wù)處理、查詢優(yōu)化。數(shù)據(jù)庫技術(shù)在不停發(fā)展，未來隨著農(nóng)業(yè)大數(shù)據(jù)采集體系的建立，如何以規(guī)模化的方式來解決數(shù)據(jù)的真實性和有效性，將是全社會面臨的難題。

以區(qū)塊鏈為代表的技術(shù)，對數(shù)據(jù)真實有效不可偽造、無法篡改的這些要求，相對于現(xiàn)在的數(shù)據(jù)庫來講，是一個新的起點。

3．質(zhì)量安全追溯

農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化過程中，生產(chǎn)地和消費地距離遠，消費者對生產(chǎn)者使用的農(nóng)藥、化肥以及運輸、加工過程中使用的添加劑等信息根本無從了解，消費者對生產(chǎn)的信任度降低。

基于區(qū)塊鏈技術(shù)的農(nóng)產(chǎn)品追溯系統(tǒng)，所有的數(shù)據(jù)一旦記錄到區(qū)塊鏈賬本上將不能被改動，依靠不對稱加密和數(shù)學(xué)算法的先進科技從根本上消除了人為因素，使得信息更加透明。

4．農(nóng)村金融

農(nóng)民貸款整體上比較難，主要原因是缺乏有效抵押物，歸根到底就是缺乏信用抵押機制。區(qū)塊鏈技術(shù)公開、不可篡改的屬性，為去中心化的信任機制提供了可能。

當(dāng)新型農(nóng)業(yè)經(jīng)營主體申請貸款時，需要提供相應(yīng)的信用信息，這就需要依靠銀行、保險或征信機構(gòu)所記錄的相應(yīng)信息數(shù)據(jù)。但其中存在著信息不完整、數(shù)據(jù)不準確、使用成本高等問題。而區(qū)塊鏈的用處在于依靠程序算法自動記錄海量信息，并存儲在區(qū)塊鏈網(wǎng)絡(luò)的每一臺電腦上，信息透明、篡改難度高、使用成本低。因此，申請貸款時不再依賴銀行、征信公司等中介機構(gòu)提供信用證明，貸款機構(gòu)通過調(diào)取區(qū)塊鏈的相應(yīng)信息數(shù)據(jù)即可。

5．農(nóng)業(yè)保險

農(nóng)業(yè)保險品種小、覆蓋范圍低，經(jīng)常會出現(xiàn)騙保事件。將區(qū)塊鏈與農(nóng)業(yè)保險結(jié)合之后，農(nóng)業(yè)保險在農(nóng)業(yè)知識產(chǎn)權(quán)保護和農(nóng)業(yè)產(chǎn)權(quán)交易方面將有很大的提升空間，而且會極大的簡化農(nóng)業(yè)保險流程。

另外，因為智能合約是區(qū)塊鏈的一個重要概念，所以將智能合約概念用到農(nóng)業(yè)保險領(lǐng)域，會讓農(nóng)業(yè)保險賠付更加智能化。以前如果發(fā)生大的農(nóng)業(yè)自然災(zāi)害，相應(yīng)的理賠周期會比較長。將智能合約用到區(qū)塊鏈之后，一旦檢測到農(nóng)業(yè)災(zāi)害，就會自動啟動賠付流程，這樣賠付效率更高。

6．供應(yīng)鏈

海洋深處范文第3篇

1、魚。養(yǎng)魚是投入較小，花費精力時間較少的一項活動。魚不像貓狗一樣時常需要人陪伴，食量也不大，更重要的是占地面積小且安靜，還有觀賞價值，實在是使人靜心的寵物；

2、兔子。養(yǎng)兔子的優(yōu)點在于干凈，可訓(xùn)練上廁所，無體味，無需每天外出遛彎，體積小，喂養(yǎng)方便不需要煮飯，安靜，萌點滿滿；

3、倉鼠。養(yǎng)倉鼠有點在于倉鼠食量小，安靜，愛干凈，體型小，與人親近，不會給人帶來傷害，攜帶病毒少；

4、貓。貓性情溫文爾雅，善解人意，喜歡與人親近。叫聲尖細柔美，愛撒嬌，舉止風(fēng)度翩翩，天生一副嬌生慣養(yǎng)之態(tài)，給人一種華麗高貴的感覺；

海洋深處范文第4篇

近期這類唱多印度互聯(lián)網(wǎng)業(yè)的文章很多，不知什么時候開始，遠見卓識的互聯(lián)網(wǎng)觀察者們都不約而同的發(fā)現(xiàn)了印度這個大金礦：他們認為印度“像是五年前的中國，無數(shù)的機會等待被發(fā)掘”。

馬衡達集團總裁、印度企業(yè)家Manoj Chugh透露，曾經(jīng)有西方人問他，阿里巴巴是不是印度企業(yè)，因為西方人認為“阿里巴巴”的故事應(yīng)該來自印度。

可是，到目前為止，印度為什么沒出現(xiàn)BAT這樣的巨頭公司?從宏觀經(jīng)濟環(huán)境，用戶基數(shù)，人才儲備，政策環(huán)境等方面來對比中國和印度的互聯(lián)網(wǎng)業(yè)，或許可以找到一些答案。

第一、宏觀經(jīng)濟層面。印度的宏觀經(jīng)濟實力遠遠弱于中國。

今天的印度，按照人均GDP計算，在全球199個被納入統(tǒng)計的國家中，印度只排在127位。盡管就在一個月前，印度財政部長阿倫·賈伊特利預(yù)測說，2014年印度經(jīng)濟增速將達到7.5%。但是即使再給印度5年時間，其人均GDP依然無法趕上中國2008年的水準。

印度人的平均生產(chǎn)總值和消費水平?jīng)Q定了越是廉價產(chǎn)品在印度越受歡迎，互聯(lián)網(wǎng)產(chǎn)品利潤會相對較低，市值也不會太高。

第二、市場規(guī)模層面。印度市場規(guī)模遠小于中國。

中國是一個全球少有的統(tǒng)一市場，中國歷史就是大一統(tǒng)的歷史。

在互聯(lián)網(wǎng)的市場規(guī)模上，中國電子商務(wù)的市場已經(jīng)追上美國，中國游戲市場的規(guī)模已經(jīng)追上美國。印度經(jīng)濟和中國相比是有很大不同的，印度12億人口中講英語的估計僅有10%。印度紛雜的語言在移動設(shè)備上操作起來會非常糟糕。

第三、用戶基數(shù)層面。印度用戶基數(shù)遠小于中國。

有觀點認為，印度互聯(lián)網(wǎng)用戶基數(shù)大。印度互聯(lián)網(wǎng)用戶約為3億，多數(shù)分析師認為，到2020年這個數(shù)字將超過5億，僅次于中國。

但是，在印度，依然有超過3億人口生活在貧困線以下，而每年還有新的1500萬勞動力大軍需要吃飯。而據(jù)工信部網(wǎng)站數(shù)據(jù)顯示，我國移動互聯(lián)網(wǎng)用戶數(shù)達8.38億。

第四、政策層面。中國互聯(lián)網(wǎng)的政策限制給了BAT崛起的機會。

眾所周知，中國互聯(lián)網(wǎng)由于存在政策限制，使得Google、Facebook這樣的海外互聯(lián)網(wǎng)巨頭很難輕易進入中國，正是他們在中國市場的缺位，使得百度和騰訊有了極大的發(fā)展空間。

而印度那些本來很弱小的互聯(lián)網(wǎng)創(chuàng)業(yè)公司，時刻面臨著美國互聯(lián)網(wǎng)巨頭的入侵，互聯(lián)網(wǎng)的本質(zhì)是贏者通吃，當(dāng)你可以直接訪問Google、YouTube、Facebook、Twitter、Amazon這些網(wǎng)站，你覺得BAT還有活路嗎?此外，印度是英語國家，特別是能夠上網(wǎng)的人群，更是英語為主。

第五、互聯(lián)網(wǎng)精神內(nèi)核層面。印度和中國相比最核心的一個問題是互聯(lián)網(wǎng)文化的淪陷。

據(jù)媒體報道，印度移動互聯(lián)網(wǎng)項目大多是照搬美國已有的項目，接地氣的改動不多。我在知乎上看到一種說法很有趣，也非常贊同，在此拿來引用一下，“最核心的一個問題是互聯(lián)網(wǎng)文化的淪陷。這樣的淪陷是全方位的，從互聯(lián)網(wǎng)用戶的語言偏好，到用戶的剛需，甚至用戶的職業(yè)，用戶的產(chǎn)品。回顧BAT，雖然橫向和國外的巨頭對比，在一些功能上有缺陷，但他們最核心，最共通的一點就是，全都是中國互聯(lián)網(wǎng)特色精神，特色文化，特色產(chǎn)品的代表。”

這位網(wǎng)友概括得非常好：只有先是中國的，才有可能變成世界的。先是世界的，就沒有中國的了。而印度恰恰就走向了這第二條路。

第六、創(chuàng)業(yè)生態(tài)層面。和中國相比，印度的創(chuàng)業(yè)生態(tài)積累缺位。

資料顯示，2009年中國本土之所以能夠涌現(xiàn)出大批移動互聯(lián)網(wǎng)公司，在于從1998年第一波互聯(lián)網(wǎng)創(chuàng)業(yè)浪潮開始，中國的互聯(lián)網(wǎng)創(chuàng)業(yè)生態(tài)就在不斷成型，這個生態(tài)中有成功的連續(xù)創(chuàng)業(yè)者、VC、天使投資人創(chuàng)業(yè)公司、成熟的互聯(lián)網(wǎng)大公司……而在印度，這樣的積累和生態(tài)體系和是缺位的，在這片創(chuàng)業(yè)荒漠上，此前只是屹立著鳳毛麟角的幾家大型IT外包服務(wù)商。

第七、基建層面。多年來，印度基礎(chǔ)設(shè)施發(fā)展一直滯后。

對于印度互聯(lián)網(wǎng)業(yè)來說，“要想富先修路”這句話同樣成立。

印度獨立后一直采用政府集中管理的方式進行基礎(chǔ)設(shè)施開發(fā)、建設(shè)和管理，但十分低效。這導(dǎo)致物流成為制約電商發(fā)展的最大短板世界經(jīng)濟論壇最近一項《國際競爭力報告》顯示，印度基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)水平在148個國家中排名第85，兩個最大的城市新德里和孟買均排名落后于北京和曼谷。

海洋深處范文第5篇

【摘要】 目的 探討二氮嗪(DZ)預(yù)處理能否抑制CJun氨基末端激酶(JNK)表達而減輕缺氧復(fù)氧后大鼠海馬神經(jīng)元的凋亡。 方法 原代培養(yǎng)9～10 d的SD大鼠海馬神經(jīng)元隨機分為5組：對照組、DZ 0，30，100 μmol/L和DZ 100 μmol/L+5羥癸酸(5HD)100 μmol/L預(yù)處理組。除對照組外，其余4組神經(jīng)元自缺氧前2 d開始，每天實施以上對應(yīng)濃度DZ預(yù)處理1 h，連續(xù)3 d。于體外缺氧4 h復(fù)氧48 h后，采用四唑藍比色法測定海馬神經(jīng)元活力，AnnexinⅤFITC流式細胞術(shù)測定凋亡率，Western blotting法檢測JNK蛋白表達。 結(jié)果 與對照組比較，缺氧復(fù)氧后海馬神經(jīng)元的活力下降，凋亡率增大，JNK蛋白表達增強(P

【關(guān)鍵詞】 二氮嗪; 海馬; 疾病模型，動物; 缺氧缺血，腦; 神經(jīng)元; 細胞凋亡; JNK絲裂原活化蛋白激酶類

以二氮嗪(Diazoxide，DZ)為代表的線粒體內(nèi)膜上ATP敏感鉀通道(Mitochondrial ATP Sensitive Potassium Channel， MitoKATP)開放劑可模擬缺血預(yù)處理，激發(fā)腦的內(nèi)源性保護機制而增強抗損傷效果[12]。腦損傷患者的愈后與凋亡密切相關(guān)。cJun氨基末端激酶 (cJun Nterminal kinase，JNK)是有絲分裂原激活蛋白激酶超家族成員之一，具有促凋亡和抗凋亡的雙重功能，發(fā)揮哪一功能受到細胞類型、刺激方式、持續(xù)時間以及其他信號的影響，在離體培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧實驗中，JNK信號主要發(fā)揮促凋亡作用[34]。本研究以原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元為實驗對象，探討DZ預(yù)處理能否抑制JNK信號蛋白表達而減低缺氧復(fù)氧后大鼠海馬神經(jīng)元的凋亡，旨在進一步了解藥物預(yù)處理的抗損傷機制。

1 材料與方法

1.1 主要藥品、試劑和儀器 二氮嗪(批號：022K1516)、5羥癸酸(5Hydroxydecanoate，5HD，批號：057H5076)購自美國Sigma公司;Annexin ⅤFITC試劑為美國BD公司產(chǎn)品;多克隆兔抗大鼠JNK抗體(FL型SC57)、山羊抗兔IgG抗體購自美國Santa cruz公司。密閉缺氧裝置為北京通達科技公司產(chǎn)品;電泳儀(MiniProtean3，美國Amersham Biosciences公司);酶標儀(Model 550，美國BioRad公司);凝膠成像系統(tǒng)(Gel Doc XR+，美國BioRad公司);流式細胞儀(FACS Calibur，美國BD公司)。

1.2 方法

1.2.1 大鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)和鑒定 取新生SD大鼠〔出生時間

1.2.2 實驗分組、缺氧方法和DZ預(yù)處理方法 大鼠海馬神經(jīng)元分為對照組(A組)、DZ 0 μmol/L組(B組)、DZ 30 μmol/L組(C組)、DZ 100 μmol/L組(D組)、DZ 100 μmol/L+5HD 100 μmol/L(E組)。每次實驗每組采用12孔或2皿，實驗重復(fù)3次。除對照組外，其他組于缺氧前2 d開始，每天實施以上對應(yīng)濃度DZ預(yù)處理，每次1 h，隨后培養(yǎng)液全量置換，連續(xù)3 d。將海馬神經(jīng)元置入密閉缺氧裝置中后，充體積分數(shù)為0.95的N20.05的CO2氣體4 h，流速為0.2 L/min，以造成缺氧環(huán)境，于復(fù)氧48 h測定相關(guān)指標。

1.2.3 四唑藍比色法測定神經(jīng)元活力 96孔板之每孔中加入5 mg/mL四甲基偶氮唑藍磷酸緩沖液10 μL，繼續(xù)培養(yǎng)4 h后棄去上清液，再加入100 μL二甲基亞砜均勻振蕩10 min，在酶標儀(測量波長600 nm)上讀取數(shù)值為吸光度值，以吸光度值表示海馬神經(jīng)元的活力。

1.2.4 Annexin VFITC法檢測神經(jīng)元凋亡率 海馬神經(jīng)元按以下程序處理：0.1 mol/L PBS漂洗后，0.125%胰蛋白酶消化5 min，終止消化后制備單細胞懸液，收集細胞并離心(1 000 r/min)5 min，棄去胰蛋白酶后，0.1 mol/L PBS漂洗2次，以含Ca2+緩沖液將神經(jīng)元濃度稀釋為1×106 mL1，加Annexin V(1∶20)避光反應(yīng)10 min，再以PI(1∶20)標記后，立即在流式細胞儀上測定凋亡率。

1.2.5 Western blot檢測JNK蛋白的表達 采集細胞后，1 200 r/min離心5 min收集細胞，加入80 μL細胞裂解液，冰上裂解30 min后，4 ℃再離心(12 000 r/ min)5 min。上樣前將樣品煮沸5 min，計算含50 μg蛋白的溶液體積即為上樣量。垂直電泳兩玻璃板間隙中灌注12%分離膠及5%濃縮膠，加入Marker 10 μL，其余空格按預(yù)定順序加樣。電泳在濃縮膠電壓80 V，分離膠電壓100 V，總時間2.5 h左右;而后在4 ℃、電流200 mA條件下轉(zhuǎn)膜45～60 min，將蛋白轉(zhuǎn)移至NC膜，10%脫脂牛奶封閉NC膜2 h，將多克隆兔抗大鼠JNK抗體(1∶500)與NC膜充分接觸雜交，4 ℃下過夜，后與βactin(1∶1 000)雜交反應(yīng)3～5 h，再與山羊抗兔IgG抗體二抗(1∶2 000)于室溫下孵育2 h，然后顯影、定影、圖象分析。結(jié)果用Gel Doc凝膠成像分析系統(tǒng)掃描目標條帶的分子量，成像結(jié)果用Quantity One軟件行半定量分析，以A組為對照，取相對值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 計量資料以x±s表示，采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)處理。單因素方差分析，Newmankeuls兩兩比較。P

2 結(jié) 果

2.1 海馬神經(jīng)元的鑒定結(jié)果及活力、凋亡率比較 光鏡下隨機計數(shù)8個非重疊視野細胞，計算NSE陽性細胞百分率，海馬神經(jīng)元所占比例為(87.7±5.6)%，見圖1。缺氧復(fù)氧后海馬神經(jīng)元活力下降，凋亡率增大(P

2.2 JNK蛋白的定量分析 缺氧復(fù)氧后，JNK蛋白表達增強。與B組比較，C和D組JNK表達均明顯減弱(P0.05)。與C組比較，D組的JNK表達減弱(P

3 討 論

腦缺血/缺氧嚴重危害人類健康，積極探索缺血/缺氧導(dǎo)致腦損傷機制和有效防治措施，具有重要的臨床價值。在腦內(nèi)，MitoKATP含量極為豐富，DZ激活MitoKATP后能產(chǎn)生理想的保護效果。本研究中DZ預(yù)處理的劑量、時間、方法和5HD劑量是根據(jù)前期實驗基礎(chǔ)確定的[5]。應(yīng)用四唑藍比色法測定活細胞的吸光密度值代表細胞的活力，可以反映海馬神經(jīng)元的存活率。缺氧復(fù)氧損傷后，DZ 100 μmol/L組活力大于DZ 0 μmol/L組、凋亡率低于DZ 0 μmol/L組;而DZ+5HD組與DZ 0 μmol/L組的活力和凋亡率比較無統(tǒng)計學(xué)差異，以上說明DZ 100 μmol/L可通過開放MitoKATP通道誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元產(chǎn)生缺氧耐受。已知的主要機制是，開放MitoKATP可降低線粒體膜電位，線粒體適度去極化，抑制細胞質(zhì)鈣離子向線粒體內(nèi)流，減輕線粒體內(nèi)鈣超載[6];限制缺氧/缺血后線粒體的腫脹，使線粒體的體積保持在適當(dāng)范圍內(nèi)以維持線粒體內(nèi)電子傳遞和能量生成[7];MitoKATP的活化還可以減少細胞色素C的釋放，誘導(dǎo)Bcl2表達增加，抑制Bax易位，抑制凋亡發(fā)生[5]。實驗中，DZ 30 μmol/L組與DZ 0 μmol/L組的活力、凋亡率比較均未見統(tǒng)計學(xué)差異，這同時提示DZ發(fā)揮預(yù)處理效應(yīng)與劑量有關(guān)。

JNK為54kD的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，含雙磷酸化功能區(qū)ThrProTyr，可與cJun N端的活化區(qū)結(jié)合并使其第63、73位絲氨酸殘基磷酸化，因而又被稱為cJUN氨基末端激酶。目前認為，JNK可通過以下途徑發(fā)揮促凋亡作用[810]：增強轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物AP1的活性從而促進多種凋亡蛋白表達;磷酸化并抑制線粒體膜上的Bcl2和Bclxl，線粒體膜上PT孔開放，釋放cytc入細胞質(zhì);刺激下游底物Bim，將信號傳到Bax，也可導(dǎo)致線粒體釋放cytc。本實驗中，與對照組比較，缺氧復(fù)氧后各組JNK蛋白表達程度明顯增強的同時，凋亡率增大，存活率下降，提示JNK信號通路可能參與了缺氧復(fù)氧損傷所致的細胞凋亡損傷過程。與DZ 0 μmol/L組比較，DZ 100 μmol/L組JNK蛋白表達明顯減弱，凋亡率下降，活力升高;而給予MitoKATP 通道的選擇性抑制劑5HD后，以上變化被消除，提示DZ預(yù)處理可能通過抑制JNK活性表達，減輕凋亡發(fā)生。Jiang等在對新生大鼠海馬和皮質(zhì)缺血/缺氧的研究中，發(fā)現(xiàn)DZ預(yù)處理能抑制細胞核JNK的底物cJun蛋白的表達增加[11]。盡管DZ 30 μmol/L和DZ 100 μmol/L組的JNK蛋白表達有統(tǒng)計學(xué)差異，但此2組之間的凋亡率和活力比較無統(tǒng)計學(xué)差異，這可能是缺氧復(fù)氧后神經(jīng)元的凋亡同時受多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控，受其他因素的干擾，DZ 30 μmol/L未能有效減低凋亡率。

筆者認為，JNK信號在誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元細胞凋亡過程中起重要作用，DZ可能抑制JNK的表達而減低缺氧復(fù)氧后大鼠海馬神經(jīng)元的凋亡。但DZ如何抑制JNK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，JNK出現(xiàn)的高峰及與細胞凋亡的具體關(guān)聯(lián)，尚需進一步研究。

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