白藜蘆醇

前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇白藜蘆醇范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發現更多的寫作思路和靈感。

白藜蘆醇范文第1篇

【摘要】目的：建立同時測定白藜蘆醇和白藜蘆醇苷含量的高效液相色譜法，優化虎杖中有效成分白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的提取工藝.方法：采用梯度法建立同時測定白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的高效液相色譜方法，以白藜蘆醇和白藜蘆醇苷總量為考察指標，設計以乙醇濃度、溶劑倍數及醇提溫度等為影響因素的4因素3水平的正交實驗，確定虎杖中上述有效成分的最佳提取工藝.結果：在選定的色譜條件下，虎杖提取物中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷可以達到基線分離.檢測白藜蘆醇及其苷的線性回歸方程分別為Y=0.0006X-0.183（r=0.9996），Y=0.0011X-0.478（r=0.9993）；線性范圍分別為0.48～38.4mg/L和0.47～38.2mg/L.日內、日間精密度都小于5%，回收率在90%～105%之間，樣品分析時間小于7min.虎杖中有效成分白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的最佳提取工藝為乙醇濃度80％，溶劑倍數15，醇提溫度70℃，提取時間2h.結論：建立了準確可靠、分析速度快可同時檢測虎杖提取物中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的分析方法，優化了質量可控的提取工藝.

【關鍵詞】虎杖；白藜蘆醇；白藜蘆醇苷；高效液相色譜

0引言

虎杖(polygonumcuspidtumsieb)為蓼科蓼屬多年生草本植物虎杖的干燥根莖，主要含有蒽醌類、二苯乙烯類、水溶性多糖和鞣質等成份［1］.白藜蘆醇(3,4′,5三羥基二苯乙烯)和白黎蘆醇苷是虎杖的主要功效成分，具有保護心臟、抗血栓、降血脂［2］等藥理作用.白藜蘆醇及白藜蘆醇苷的藥理作用相近，但其極性卻相差較大.本研究探討一種兼顧白藜蘆醇及白藜蘆醇苷的提取工藝，并建立同時測定白藜蘆醇和白藜蘆醇苷含量的高效液相色譜法（highperformanceliquidchromatography，HPLC），旨在為虎杖的藥理作用研究以及科學合理利用提供試驗依據.

1材料和方法

1.1材料白藜蘆醇苷和白藜蘆醇的對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供；虎杖的干藥材購自西安市胡家廟藥材市場.2695型高效液相色譜儀，2996型二極管陣列檢測器(美國Waters公司)；調溫式電熱套(北京科偉永興儀器有限公司)；色譜純乙腈，甲醇(美國TEDIA公司)，其他試劑均為國產分析純.

1.2方法

1.2.1工作曲線的建立分別精密稱取白藜蘆醇苷及白藜蘆醇對照品10mg置100mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成100mg/L的白藜蘆醇苷和白藜蘆醇對照品混合儲備液，備用.分別精密吸取兩對照品儲備溶液0.05，0.2，1，2,4mL配制成濃度為0.5，2，10，20,40mg/L的混合對照品的標準溶液，依次取20μL進樣.色譜條件為：色譜分析柱：C18(250mm×4.6mm，5μm，美國Phenomenix公司)；流動相：乙腈和水，梯度洗脫如表1所示.檢測波長：315nm；流速：1mL/min；柱溫為30℃.按上述色譜條件測定峰面積積分值，以峰面積積分值為縱坐標，對照品濃度值為橫坐標繪制工作曲線，應用Excel軟件采用最小二乘法計算回歸方程.

表1HPLC流動相梯度表

時間(min)〖〗乙腈(％)〖〗水(％)〖〗流速(mL/min)〖〗梯度類型0〖〗28〖〗72〖〗1.0〖〗67〖〗72〖〗28〖〗1.0〖〗69〖〗72〖〗28〖〗1.0〖〗620〖〗28〖〗72〖〗1.0〖〗1

1.2.2精密度和準確度測定分別精密吸取白藜蘆醇及白藜蘆醇苷儲備液0.1，0.5，3mL，配成濃度為1，5，30mg/L混合對照品的標準溶液.每個濃度6個樣本，連續測定3d，與標準曲線的建立同時進行.代入當日的回歸方程計算標準溶液的濃度，將結果進行方差分析，即得到本方法的精密度.將1，5，30mg/L三個濃度標準溶液的白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的測定濃度值與標準溶液的標示濃度相比，即得方法回收率.

1.2.3虎杖有效成分提取工藝的優化在本生產工藝研究中，根據藥物有效成分、藥理作用及理化性質特點，選擇醇提法進行正交試驗，以提取時間（A1,2,3h），乙醇濃度（B70%,80%,90%），醇提溫度（C50,60,70℃）和溶劑倍數(D10,15,20)作為考察因素，選擇3個水平，綜合評價提取工藝,選用L9(34)正交表，安排正交實驗.

取虎杖10g，按L9(34)正交表設計的順序，各加入設定的乙醇量，加熱煎煮規定時間和次數，濾過，合并濾液，將濾液用甲醇稀釋10倍后取樣20μL，用HPLC法測定白藜蘆醇及白藜蘆醇苷的峰面積，帶入回歸方程中，計算出白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的總量.

2結果

2.1HPLC檢測方法的特異性在本實驗選定的洗脫及檢測條件下，白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的保留時間分別為6.8min和4.7min.白藜蘆醇及白藜蘆醇苷峰和雜質峰能實現基線分離，樣品峰的測定不受雜質峰的干擾（圖1）.

2.2白藜蘆醇苷及白藜蘆醇標準曲線回歸方程以白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標建立標準曲線.應用Excel軟件采用最小二乘法得到白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的工作曲線回歸方程：Y=0.0006X-0.183（r=0.9996），Y=0.0011X-0.478（r=0.9993）.結果表明，白藜蘆醇及其苷分別在0.48～38.4mg/L和0.47～38.2mg/L范圍內呈良好的線性關系.

2.3精密度和準確度測定1，5，30mg/L濃度的白藜蘆醇苷的日內精密度分別為4.0%，2.6%和2.0%；日間精密度分別為4

.2%，4.3%和2.6%；方法回收率分別為（101±3.4）%，（94±2.3）%和（95±1.3）%.白藜蘆醇的日內精密度分別為5.0%,3.0%和2.0%；日間精密度分別為4.8%，3.9%和1.1%；方法回收率分別為（96±5.1）%，（95±2.6）%和（95±1.6）%.結果顯示本方法準確、重復性好.

2.4虎杖有效成分提取工藝的優化將測得值進行方差分析（表2），因素B差異具有統計學意義（P<0.01).由表3中進行直觀分析可知，A因素中各水平試驗結果的和比較為：K2>K1>K3，平均含量以第2水平為高；B因素中各水平試驗結果的和比較為：K1>K2>K3，平均含量以第1水平為高；C因素中各水平試驗結果的和比較為：K3>K1>K2，平均含量以第3水平為高；D因素中各水平試驗結果的和比較為：K2>K1>K3，平均含量以第2水平為高.選擇最佳的提取工藝為提取時間2h，乙醇濃度為70%，醇提溫度為70℃，溶劑倍數15.表2白藜蘆醇及其苷含量方差分析結果

3討論

近年來有較多關于虎杖有效成分白藜蘆醇和白藜蘆醇苷提取及含量研究的報道，多采用單因素、正交試驗及大孔吸附樹脂吸附法研究白藜蘆醇的提取條件［3-4］；正交試驗法及乙醇回流法優選白藜蘆醇提取工藝［5-7］；以白藜蘆醇苷為指標，研究虎杖的提取條件等［8］，這些方法均以白藜蘆醇或白藜蘆醇苷單個成分為指標.由于虎杖中的活性成分白藜蘆醇和白藜蘆醇苷都具有保護心臟、抗血栓、降血脂等藥理作用，因此我們在本實驗中測定樣品中的白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的總量并以此作為評價指標是合理可行的.我們的實驗結果表明，正交試驗及方差分析結果虎杖醇提取工藝最大影響因素為乙醇濃度B，其次為溶劑倍數D，再次為醇提溫度C和提取時間A.最佳工藝乙醇濃度為80％，溶劑倍數為15，醇提溫度為70℃，提取時間為2h.

目前對虎杖中白藜蘆醇或白藜蘆醇苷的測定方法很多［9-10］，但是同時對白藜蘆醇及其苷測定的報道較少［11］，主要存在諸如樣品處理方法復雜、分析時間較長等問題.本研究建立的同時測定虎杖中白藜蘆醇及其苷的方法選用315nm作為檢測波長，使檢測方法獲得了較高的靈敏度.采用乙腈和水作為流動相，白藜蘆醇和白藜蘆醇苷與其他化合物達到基線分離.白藜蘆醇和白藜蘆醇苷分別在6.8min和4.7min出峰，快速有效地實現了分離檢測.

綜上所述，本研究建立的虎杖提取液中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的HPLC檢測方法具有靈敏、準確、迅速和工藝穩定、經濟等特點，可用于虎杖提取液中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的含量測定以及有效成分提取的質量控制.

【參考文獻】

［1］肖凱,宣利江,徐亞明,等.虎杖的化學成分研究［J］.中國藥學雜志，2003,38(1):12-15.

［2］黃永洪,史若飛.虎杖的活性成分及其在心血管方面的研究進展［J］.牡丹江醫學院學報，2006,27(1):58-60.

［3］朱立賢金征宇.虎杖中白藜蘆醇提取分離工藝的研究［J］.安徽農業科學,2005,33(1):77-78.

［4］許漢林,付宜和,高鵬,等.虎杖中白藜蘆醇的提取與分離工藝研究［J］.時珍國醫國藥,2006,17(8):1424-1425.

［5］余淑嫻，鄭湘娟，余祖兵，等.正交實驗法優選虎杖中自藜蘆醇的提取工藝［J］.時珍國醫國藥,2006,17(4):594-595.

［6］江曙，朱蓉蓉，張芳,等.虎杖中白藜蘆醇提取方法及工藝的優化［J］.南京中醫藥大學學報,2006,22(3):197-199.

［7］耿艷輝，李夢青，劉桂敏,等.從虎杖中提取白藜蘆醇的工藝研究［J］.應用化工,2005,34(11):708-710.

［8］許漢林，孫蕓，邵繼征,等.正交法優化虎杖中白藜蘆醇苷提取工藝的研究［J］.湖北中醫學院學報,2006,8(2):29-30.

［9］曾建國，候團章，張勝.高效液相色譜法測定虎杖提取物中白藜蘆醇的含量［J］.中國中醫藥科技，2000,7(3):175-177.

白藜蘆醇范文第2篇

[關鍵詞] 白藜蘆醇；肝癌

[中圖分類號] R735.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2013）02（c）-0022-03

原發性肝癌或肝細胞癌是目前世界上最常見的惡性腫瘤之一，死亡率高，預后較差。其發生發展是一系列多基因參與、多步驟協同的復雜過程，目前已在DNA、miRNA、信號通路、蛋白等多個層面研究其防治措施。肝癌的發生機制目前尚未完全闡明，公認的機制主要有：癌變由肝臟干細胞異常分化引起；癌變由成熟肝細胞去分化而致。其中涉及到癌基因的激活，抑癌基因的抑制及多種信號通路、蛋白的激活與抑制等。

白藜蘆醇（3，5，4′-trihy-droxy-trails-stilbene）是一種自然產生的含有芪類結構非黃酮類多酚化合物，主要在紅葡萄酒、花生中發現[1]。在過去的研究中發現Res具有抗氧化[2]、抗炎[3]、抗衰老[4]、抗病毒[5]、降血糖[6]、止痛、平喘[7]等作用。有報道表明，Res對于青光眼[8]、胰腺炎[9]、骨關節炎[10]等疾病具有保護作用。它可以防止和治療心血管疾病[11]，對癌癥亦有防治作用，例如肝癌[12]。以下就近年來Res對肝臟腫瘤的防治的相關研究做一綜述。

1 體外研究

Res已被證明能抑制人的多種肝癌細胞，例如HepG2[13-14]、Hep3B[13]、H22[15]、大鼠肝癌細胞FAO[16]、H4IIE[17]、大鼠腹水肝癌細胞AH109A[18]等。Res抑制肝癌細胞生長的機制與誘導細胞凋亡和阻滯細胞周期有關。Sun等[15]證實Res對H22的生長抑制作用是由于細胞凋亡，也可以通過激活半胱氨酸蛋白酶從而誘導H4IIE細胞凋亡[17]。Kuo等[13]研究表明，T-Res在濃度為40～80 μmol/L時可以抑制p53陽性的HepG2細胞的生長，但對于p53陰性的Hep3B的生長無明顯影響，這表明RES誘導細胞凋亡是依賴于p53信號通路。此實驗同時發現細胞被阻滯于G1期時，凋亡相關蛋白P21的表達明顯增加。Notas等[19]則認為T-Res在0.1 μmol/L時可以通過對細胞周期G1和G2/M的阻滯而誘導HepG2細胞凋亡。在相似的實驗研究中，認為Res通過其抗氧化作用，抑制肝癌細胞增殖。T-Res在納摩爾濃度和匹摩爾濃度時，通過調節NO/NOS系統，增加iNOS和eNOS的表達，激活NOS，增加NO的表達，抑制NOS酶從而起抑制腫瘤細胞增殖的作用。在Res誘導肝癌細胞凋亡中的另一個重要的角色是微囊蛋白-1（CAV-1）。CAV-1是微囊家族的成員，在大多數人類腫瘤細胞中不表達或表達減少。CAV-1過表達的轉化細胞的生長收到抑制[20]。Yang等[21]研究發現CAV-1可以通過其膽固醇相關系統提高HepG2對Res的吸收，增加其抗增殖和促凋亡的作用。經100 μmol/L Res預處理的HepG2細胞中CAV-1的表達增加，而CAV-1可以負反饋提高Res的吸收，通過p38絲裂原激活蛋白激酶（MAPK）通路和caspase-3表達從而誘導細胞凋亡。經100 μmol/L Res處理后的細胞與未處理組相比，72 h后其凋亡明顯增加。此外，有報道表明，Res在高濃度（100～200 μmol/L）時可以減少S期的HepG2細胞，但在低濃度（10～50 μmol/L）時可以增加S期的HepG2細胞[22]。徐凌等[23]研究發現Res能以劑量依賴方式拮抗肝細胞癌HepG2細胞的增殖，進一步的研究提示Res能顯著下調miR-151和FAK mRNA表達，而miR-151能促進肝癌細胞的周期轉換，使肝癌細胞周期進程明顯加快。Parekh等[24]研究發現，Res可以通過減少細胞周期蛋白D1，調控P38MAPK、Akt和Pak1的表達、活化等抑制HepG2細胞的生長。De Lédinghen等[25]認為Res抑制肝癌細胞HepG2增殖的作用機制涉及到受體后機制，與其細胞毒性或促凋亡作用無關。

此外，白藜蘆醇的化學防癌活動可能涉及到細胞色素P450（CYP450）酶的抑制[26]。CYP450在化學致癌的激活中發揮著重要作用。例如，在100 μmol/L時Res可以通過與芳香烴受體結合，從而抑制小鼠肝癌HEPA 1c1c7細胞丁基對苯二酚誘導的CYP1A1的活性。在細胞培養中發現Res對肝癌細胞株的侵襲性起抑制作用。Kozuki等[18]發現在低濃度時Res能抑制大鼠腹水肝癌細胞AH109A的侵襲入侵，但在高濃度（25～200 μmol/L）時起抑制增殖作用。這一機制與其抗氧化作用有關，與其抗增殖作用相關性不大。Res的防癌的另一機制與其抗血管生成作用有關。例如，Zhang等[27]研究證實Res在缺氧條件下可以抑制血管內皮生長因子（VEGF）的表達，通過缺氧誘導因子-1A來抑制HepG2細胞的生長。

2 體內研究

目前許多研究表明Res在動物模型中起預防腫瘤的作用。Khanduja等[28]發現經2.5 mg/kg Res處理2周后給予二乙亞硝胺誘導的小鼠模型，其肝臟中的鳥氨酸脫羧酶（ODC）及環氧合酶較未經Res處理的小鼠模型明顯減少。ODC是多胺生物合成途徑中的限速酶，與細胞增殖和癌變密切相關[29]。而環氧合酶主要與炎癥反應中前列腺素的形成、腫瘤的發生發展、血管生成等有關[30]。Bishayee等[31]研究表明，按50～300 mg/kg的劑量連續口服白藜蘆醇20周后，與未處理組相比，二乙基亞硝胺及苯巴比妥誘導的大鼠的肝細胞結節的發生、數量及種類等明顯減少。Res通過上調促凋亡蛋白Bax和下調抗凋亡蛋白Bcl-2起抗癌作用。Res的化學防癌作用也涉及降低氧化應激，抑制炎癥反應介導的核因子E2相關因子（Nrf2）[32]、熱休克蛋白（HSP70）、COX-2和NF-κB[33]等。但有實驗表明，Res處理后并不能阻止多氯聯苯（PCBs）誘導的大鼠肝臟腫瘤[34]。如上所述，體外實驗研究表明Res是CYP450酶抑制劑。Canistro等[35]研究Res經腹腔注射（50 mg/kg連續7 d）對小鼠肝外源性代謝酶的影響發現Res可以抑制CYP450酶，但對于肝臟解毒的代謝酶，起相反作用，誘導UDP-葡萄糖醛酸活性增強，同時減弱谷胱甘肽S-轉移酶活性。有學者對二乙亞硝胺誘導動物肝癌實驗研究發現，Res誘導腫瘤細胞凋亡的途徑之一可能是上調Nrf2核轉錄因子介導的蛋白及mRNA的表達。部分文獻表明，Res除了化學防癌作用外尚可作為化療藥物運用。Delmas等[36]用Res作用肝癌小鼠模型，發現其通過誘導細胞周期依賴性蛋白激酶（cyclin dependent kinase，CDK）抑制蛋白的產生，降低CDK蛋白表達和活性，使肝癌細胞阻滯于S期和G2/M期，從而抑制肝癌細胞增殖，并且這種抑制作用存在時間和劑量的依賴性，白藜蘆醇短期作用結果顯示，能以濃度依賴的方式阻礙腫瘤細胞DNA合成及隨后的增殖；而當時間延長至24 h，白藜蘆醇則對細胞周期作用方式略顯不同，在低濃度（20 μmol/L）范圍內減慢細胞周期進程循環速度，在高濃度（40～80 μmol/L）下則導致細胞周期某特定時相的阻滯。經白藜蘆醇處理過的細胞除了在相應細胞周期時相受影響外，同時還伴有細胞核增大，核粒度增多。

3 總結與展望

研究證實，Res可以通過誘導腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞增殖、阻滯細胞周期、介導體液免疫應答、調節細胞因子分泌、拮抗腫瘤血管生成影響腫瘤的發生過程。但目前缺乏有效的臨床或流行病學研究證實Res對肝癌的化學預防作用。雖然目前有兩個臨床試驗表明連續29 d給予2.5 g/d T-Res后，檢測血漿中胰島素樣生長因子1和胰島素樣生長因子結合蛋白3水平，與未給藥組相比明顯降低，表明了其潛在的癌癥預防作用[37]。0.5 g/d和1.0 g/d的T-Res連續給藥29 d后結腸癌組織中的細胞增殖明顯受抑[38]。目前HCC的發生發展機制尚未明確，但作為植物抗毒素Res可以通過多方面作用對部分HCC起到一定的防治作用，定能在將來的肝癌治療中占一席之地。

[參考文獻]

[1] Jeandet P，Douillet Breuil AC，Bessis R，et al. Phytoalexins from the Vitaceae：biosynthesis，phytoalexin gene expression intransgenic plants，antifungal activity，and metabolism [J]. Agric Food Chem，2002，50（10）：2731-2741.

[2] Venturini CD，Merlo S，Souto AA，et al. Resveratrol and red wine function as antioxidants in the nervous system without cellular proliferative effects during experimental diabetes[J]. Oxid Med Cell Longev，2010，3（6）：434-441.

[3] Kovacic P，Somanathan R. Multifaceted approach to resveratrol bioactivity：focus on antioxidant action，cell signaling and safety [J]. Oxidative Medicine and Cellular Longevity，2010，3（2）：86-100.

[4] Queen BL，Tollefsbol TO. Polyphenols and aging [J]. Curr Aging Sci，2010，3（1）：34-42.

[5] Campagna M，Rivas C. Antiviral activity of resveratrol [J]. Biochem Soc Trans，2010，38（1）：50-53.

[6] Palsamy P，Subramanian S. Modulatory effects of resveratrol on attenuating the key enzymes activities of carbohydrate metabolism in streptozotocin-nicotinamide-induced diabetic Rats [J]. Chem Biol Interact，2009，179（2-3）：356-362.

[7] Lee M，Kim S，Kwon OK，et al. Anti-inflammatory and anti-asthmatic effects of resveratrol，a polyphenolic stilbene， in a mouse model of allergic asthma [J]. Int Immunopharmacol，2009，9（4）：418-424.

[8] Luna C，Li G，Liton PB，et al. Resveratrol prevents the expression of glaucoma markers induced by chronic oxidative stress in trabecular meshwork cells [J]. Food Chem Toxicol，2009，47（1）：198-204.

[9] Li ZD，Ma QY，Wang CA. Effect of resveratrol on pancreatic oxygen free radicals in rats with severe acute pancreatitis [J]. World Journal of Gastroenterology，2006，12（1）：137-140.

[10] Shakibaei M，Csaki C，Nebrich S，et al. Resveratrol suppresses interleukin-1beta-induced inflammatory signaling and apoptosis in human articular chondrocytes：potential for use as a novel nutraceutical for the treatment of osteoarthritis[J]. Biochem Pharmacol，2008，76（11）：1426-1439.

[11] Shukla SK，Gupta S，Ojha SK，et al. Cardiovascular friendly natural products：a promising approach in the management of CVD [J]. Nat Prod Res，2010，24（9）：873-898.

[12] Kundu JK，Surh YJ. Cancer chemopreventive and therapeutic potential of resveratrol：mechanistic perspectives [J]. Cancer Lett，2008，269（2）：243-261.

[13] Kuo PL，Chiang LC，Lin CC. Resveratrol-induced apoptosis is mediated by p53-dependent pathway in Hep G2 cells [J]. Life Sci，2002，72（1）：23-34.

[14] Stervbo U，Vang O，Bonnesen C. Time-and concentration-dependent effects of resveratrol in HL-60 and HepG2 cells [J]. Cell Prolif，2006，39（6）：479-493.

[15] Sun ZJ，Pan CE，Liu HS，et al. Anti-hepatoma activity of resveratrol in vitro [J]. World J Gastroenterol，2002，8（1）：79-81.

[16] Delmas D，Jannin B，Cherkaoui Malki M，et al. Inhibitory effect of resveratrol on the proliferation of human and rat hepatic derived cell lines [J]. Oncol Rep，2000，7（4）：847-852.

[17] Michels G，W tjen W，Weber N，et al. Resveratrol induces apoptotic cell death in rat H4IIE hepatoma cells but necrosis in C6 glioma cells [J]. Toxicology，2006，225（2-3）：173-182.

[18] Kozuki Y，Miura Y，Yagasaki K. Resveratrol suppresses hepatoma cell invasion independently of its anti-proliferative action [J]. Cancer Lett，2001，167（2）：151-156.

[19] Notas G，Nifli AP，Kampa M，et al. Resveratrol exerts its antiproliferative effect on HepG2 hepatocellular carcinoma cells，by inducing cell cycle arrest，and NOS activation [J]. Biochim Biophys Acta，2006，1760（11）：1657-1666.

[20] Chidlow JH Jr，Sessa WC. Caveolae，caveolins，and cavins：complex control of cellular signalling and inflammation [J]. Cardiovasc Res，2010，86（2）：219-225.

[21] Yang HL，Chen WQ，Cao X，et al. Caveolin-1 enhances resveratrol-mediated cytotoxicity and transport in a hepatocellular carcinoma model [J]. J Transl Med，2009，7：22.

[22] Kocsis Z，Marcsek ZL，Jakab MG，et al. Chemopreventive properties of trans-resveratrol against the cytotoxicity of chloroacetanilide herbicides in vitro [J]. Int J Hyg Environ Health，2005，208（3）：211-218. [23] 徐凌，王鋒，徐選福，等.白藜蘆醇通過下調microRNA-151表達抑制肝癌細胞株HepG2細胞活性的研究[J].上海交通大學學報：醫學版，2010，30（7）：774-778.

[24] Parekh P，Motiwale L，Naik N，et al. Downregulation of cyclin D1 is associated with decreased levels of p38 MAP kinases，Akt/PKB and Pak1 during chemopreventive effects of resveratrol in liver cancer cells [J]. Exp Toxicol Pathol，2011，63（1-2）：167-173.

[25] De Lédinghen V，Monvoisin A，Neaud V，et al. Trans-resveratrol，a grapevine-derived polyphenol，blocks hepatocyte growth factor-induced invasion of hepatocellular carcinoma cells [J]. Int J Oncol，2001，19（1）：83-88.

[26] Gharavi N，El-Kadi AO. Tert-Butylhydroquinone is a novel aryl hydrocarbon receptor ligand [J]. Drug Metab Dispos， 2005，33（3）：365-372.

[27] Zhang Q，Tang X，Lu QY，et al. Resveratrol inhibits hypoxia-induced accumulation of hypoxia-inducible factor-1alpha and VEGF expression in human tongue squamous cell carcinoma and hepatoma cells [J]. Mol Cancer Ther，2005，4（10）：1465-1474.

[28] Khanduja KL，Bhardwaj A，Kaushik G. Resveratrol inhibits N-nitrosodiethylamine-induced ornithine decarboxylase and cyclooxygenase in mice [J]. J Nutr Sci Vitaminol（Tokyo），2004，50（1）：61-65. [29] Wolter F，Ulrich S，Stein J. Molecular mechanisms of the chemopreventive effects of resveratrol and its analogs in colorectal cancer：key role of polyamines？ [J]. J Nutr，2004，134（12）：3219-3222.

[30] Wu BW，Li DF，Ke ZF，et al. Expression characteristics of heparanase in colon carcinoma and its close relationship with cyclooxygenase-2 and angiogenesis [J]. Hepatogastroenterology，2010，57（104）：1510-1514.

[31] Bishayee A，Dhir N. Resveratrol-mediated chemoprevention of diethylnitrosamine-initiated hepatocarcinogenesis： inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis [J]. Chem Biol Interact，2009，179（2-3）：131-144.

[32] Bishayee A，Barnes KF，Bhatia D，et al. Resveratrol suppresses oxidative stress and inflammatory response in diethylnitrosamine-initiated rat hepatocarcinogenesis [J]. Cancer Prev Res（Phila），2010，3（6）：753-763.

[33] Bishayee A，Waghray A，Barnes KF，et al. Suppression of the inflammatory cascade is implicated in resveratrol chemoprevention of experimental hepatocarcinogenesis [J]. Pharm Res，2010，27（6）：1080-1091.

[34] Tharappel JC，Lehmler HJ，Srinivasan C，et al. Effect of antioxidant phytochemicals on the hepatic tumor promoting activity of 3，3'，4，4'-tetrachlorobiphenyl（PCB-77）[J]. Food Chem Toxicol，2008，46（11）：3467-3474.

[35] Canistro D，Bonamassa B，Pozzetti L，et al. Alteration of xenobiotic metabolizing enzymes by resveratrol in liver and lung of CD1 mice [J]. Food Chem Toxicol，2009，47（2）：454-461.

[36] Delmas D，Rébé C，Lacour S，et al. Resveratrol-induced apoptosis is associated with Fas redistribution in the rafts and the formation of a death-inducing signaling complex in colon cancer cells [J]. J Biol Chem，2003，278（42）：41482-41490.

[37] Brown VA，Patel KR，Viskaduraki M，et al. Repeat dose study of the cancer chemopreventive agent resveratrol in healthy volunteers：safety，pharmacokinetics，and effect on the insulin-like growth factor axis [J]. Cancer Res，2010，70（22）：9003-9011.

白藜蘆醇范文第3篇

關鍵詞：虎杖；白藜蘆醇；微波提取

1引言

白藜蘆醇被認為是一種在植物受到病原性進攻和環境惡化時產生的植物抗毒素，目前已被證明具有抗菌、抗癌、抗炎、降血脂等多種藥理活性[1～5]。因此，研究從富含白藜蘆醇的植物虎杖中提取白藜蘆醇具有重要的社會效益與經濟效益[6]。而微波法提取作為一種提取效率高、加熱快、適用性廣等優點的提取方法也有著獨特的優勢。本文采用乙醇水溶液作為提取溶劑進行微波法提取，并通過正交實驗綜合對比微波功率、乙醇濃度、提取時間、料液比4個因素以確定最佳的從中藥虎杖中提取白藜蘆醇的工藝條件，確立微波法提取白藜蘆醇的工藝。

2實驗部分

2.1實驗儀器與試劑

儀器：紫外分光光度計（日本島津、UV2550），微波合成/萃取反應工作站（上海新儀、MAS-Ⅱ）。 試劑：虎杖（采購于達州市藥店博愛大藥房），白藜蘆醇標準品（阿拉丁試劑），其余試劑如無說明則均為分析純。

2.2實驗方法

白藜蘆醇標準曲線的繪制：將準確稱取的8.1mg白藜蘆醇標準品置于100mL容量瓶中，無水乙醇溶解并定容至刻度得81μg/mL的標準品貯備液。從貯備液中準確移取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL分別置于25mL容量瓶中，乙醇稀釋定容至刻度得系列標準溶液。使用UV2550紫外分光光度計在306nm以乙醇為空白測得其吸光度，以白藜蘆醇濃度Y對吸光度X進行線性回歸（見圖1）。回歸方程為：y=6.9621x+0.0454，線性良好（r=0.9999）。

2.3微波提取工藝考察

2.3.1正交實驗設計

將虎杖置于真空干燥箱下干燥后經中藥粉碎機粉碎，準確稱取粉末2.0g按照L9（34）正交實驗不同因素條件（表1）進行提取，抽濾除去殘渣后的濾液使用提取溶劑定容至100mL。精密移取0.5mL到25mL容量瓶中以乙醇稀釋定容，搖勻在紫外分光光度計測其306nm處吸光度。

圖1白藜蘆醇標準溶液的濃度與吸光度曲線

表1正交實驗的水平與因素

水平1因素（所有提取試驗設置溫度均為80℃）A微波功率/W1B乙醇濃度/%1C提取時間/min1D料液比/（g/mL）1

2

31300

500

700160

70

80110

15

2011∶10

1∶20

1：30

2.3.2正交實驗結果

按照表1的正交實驗設計分別對每個因素的進行水平條件進行實驗，并根據得到的吸光度結果來計算實驗結果（表2）。

表2正交實驗結果

編號1因素1試驗結果A1B1C1D1吸光度1130016011011∶1011.1532130017011511∶2011.2823130018012011∶3011.2234150016011511∶3011.3015150017012011∶1011.2876150018011011∶2011.2537170016012011∶2011.3558170017011011∶3011.2919170018011511∶1011.198K113.65813.80913.69713.638K213.84113.86013.78113.890K313.84413.67413.86513.815k111.21911.27011.23211.213k211.28011.28711.26011.297k311.28111.22511.28811.272R10.06210.06210.05610.084

從表1和表2的實驗數據與極差計算結果可以看出R-D值為最大，R-C值為最小，這說明微波法提取虎杖中白藜蘆醇的4個影響因素中以料液比對其的影響最為關鍵，而提取時間影響較小。R-A與R-B相同說明微波功率與乙醇濃度影響基本相同，根據正交實驗的結果我們綜合可以得出影響提取虎杖中白藜蘆醇的因素中料液比>（微波功率=乙醇濃度）>提取時間，并確立微波法提取虎杖中白藜蘆醇的最佳工藝條件為微波700 W功率、乙醇濃度70%、料液比1∶20、提取時間20min。

3結果與討論

3.1結果分析

從正交實驗結果與各因素的極差我們可以直觀的看出，虎杖中白藜蘆醇的提取影響因素中料液比影響顯著，提取液乙醇濃度、微波功率、提取時間也都有著各自的影響。根據正交實驗影響因素的實驗基礎上，最終確定了微波輔法提取虎杖中白藜蘆醇的最佳工藝是700W微波功率下使用70%的乙醇，以1∶20的料液比下提取20min。在最佳條件下進行3次平行實驗白藜蘆醇提取率均在在2.4%以上，提取效果較好。

3.2討論

微波法提取中藥有效成分主要是利用微波輻射過程是高頻電磁波穿透萃取介質到達物料內部的微管束和腺胞系統的過程，由于吸收了微波能，細胞內部的溫度將迅速上升，從而使細胞內部的壓力超過細胞壁膨脹所能承受的能力，結果細胞破裂，其內的有效成分自由流出從而可以顯著提高中草藥有效成分提取效率。而微波萃取本身是一種“體加熱”過程，即內外同時加熱，因而加熱均勻，熱效率較高。微波萃取時沒有高溫熱源，因而可消除溫度梯度，且加熱速度快，物料的受熱時間短，因而有利于熱敏性物質的萃取，所以一直吸引著研究人員的興趣[7，8]。我們通過實際的實驗結果也證明微波在20min就基本完成虎杖中白藜蘆醇的提取，提取效率較高，具有良好的應用前景。

參考文獻：

[1] 馬超，郝青南，馬兵鋼.白藜蘆醇的藥理功能及分離檢測研究進展[J].北方園藝，2008，25（4）：61～65.

[2] 孟雪蓮，楊靜玉，吳春福.白藜蘆醇的藥理作用研究進展[J].沈陽藥科大學學報，2008，25（2）：51～52.

[3] 張蘭勝，劉光明.白藜蘆醇的研究概述[J].大理學院學報，2007，6（4）：72～75.

[4] 李薊龍.虎杖中白藜蘆醇的藥理學活性[J].河北北方學院學報，2007，24（3）：79～80.

[5] 李文仙，劉兆平，于波.白藜蘆醇對卵巢切除大鼠骨丟失的抑制作用[J].衛生研究，2003，17（3）：415～416.

[6] 陳琛.白藜蘆醇提純技術研究進展[J].精細與專用化學品，2011，19（3）：39～40.

白藜蘆醇范文第4篇

[關鍵詞] 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體；白藜蘆醇；PC-3；凋亡

[中圖分類號] R285 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）12（c）-0008-04

前列腺癌是嚴重威脅男性健康的腫瘤之一，發病率居世界腫瘤第六位。雖然內分泌治療可以使大多數患者的病情得到控制和改善，但絕大多數患者會發展為激素抵抗性前列腺癌，患者生存率較低。因此，尋找有效的治療手段延長此類患者的生存期，成為目前前列腺癌治療的有效途徑。

腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand，TRAIL）屬于腫瘤壞死因子超家族成員，能夠高特異性地誘導腫瘤細胞的凋亡，且對正常組織細胞沒有作用[1-4]，因而成為腫瘤生物學治療新的熱點。白藜蘆醇（Resveratroi，Res）屬多酚類化合物，研究發現，其不僅具有抗炎、抗動脈粥樣硬化、抗氧化等作用，還可抑制乳腺癌、肝癌、肺癌等多種腫瘤細胞的生長[5-9]。本實驗利用人前列腺癌細胞PC-3，觀察聯合應用Res和TRAIL蛋白對PC-3細胞的凋亡情況，證實Res能夠促進TRAIL對PC-3細胞的凋亡作用。

1 材料與方法

1.1 材料

人前列腺癌細胞PC-3購自上海中科院細胞庫；Res購自天津邁迪瑞康公司；重組人TRAIL蛋白購自TEPROTEH公司；AnnexinV/PI凋亡檢測試劑盒購自天根生物公司；CCK8檢測試劑盒購自碧云天公司；caspase-8、caspase-3活性檢測試劑盒購自碧云天公司；其他試劑為國產分析純。

1.2 方法

1.2.1 CCK8檢測細胞增殖情況 將處于對數生長期的PC-3細胞以5×104/ml接種于96孔板，首先確定Res的用藥濃度，分別加入Res，濃度為12.5、25、50、100 μmol/L；TRAIL蛋白組每孔加入TRAIL蛋白，濃度分別為25、50、100、200 ng/ml；聯合用藥組加入Res 50 μmol/L后，每孔再分別加入上述濃度TRAIL蛋白。于細胞培養箱培養24 h后，每孔分別加入CCK8試劑各10 μl，酶標儀檢測OD值。以未處理的細胞作為正常組，以培養基作為空白組。細胞增殖率%=（實驗組OD值-空白組OD值）/（正常組OD值-空白組OD值）×100%。

1.2.2 流式細胞術檢測細胞凋亡情況 將PC-3細胞以2×105/ml接種于6孔板，培養12 h后，TRAIL蛋白組加入TRAIL蛋白100 ng/ml；聯合用藥組加入Res 50 μmol/L后加入TRAIL蛋白100 ng/ml，24 h后收集細胞，具體操作步驟按照AnnexinV/PI凋亡檢測試劑盒說明書進行，流式細胞儀檢測細胞凋亡情況。

1.2.3 caspase-8、caspase-3活性檢測 將PC-3細胞以2×105/ml接種于6孔板，培養12 h后，單獨應用TRAIL蛋白組加入TRAIL蛋白100 ng/ml；聯合用藥組加入Res 50 μmol/L后加入TRAIL蛋白100 ng/ml，12 h后收集細胞，分光光度法檢測caspase-8和caspase-3活性，具體操作步驟按試劑盒說明書進行。

1.3 統計學處理

采用SPSS 16.0統計學軟件進行數據分析，組間兩兩比較采用q檢驗，以P

2 結果

2.1 Res增強TRAIL蛋白對細胞增殖的抑制作用

Res組細胞CCK8實驗結果顯示，當Res濃度為50 μmol/L時，增殖率為（72.61±4.41）%，Res濃度為100 μmol/L時，增殖率為（70.16±3.73）%，較前差異無統計學意義（P>0.05）（表1）。TRAIL蛋白組的實驗結果顯示，當TRAIL蛋白的濃度為100 ng/ml時，增殖率為（69.05±6.97）%，而TRAIL蛋白濃度200 ng/ml時，PC-3細胞的增殖率為（67.72±5.68）%，較前差異無統計學意義（P>0.05）。當TRAIL蛋白濃度為100 ng/ml時，聯合用藥組PC-3細胞增殖率為（38.70±2.43）%，與TRAIL蛋白組相比，差異有統計學意義（P

2.2 Res促進TRAIL蛋白誘導的凋亡作用

2.2.1 流式細胞術檢測結果 TRAIL蛋白組PC-3細胞的凋亡率為（34.86±1.25）%，聯合用藥組PC-3細胞的凋亡率升高至（70.55±2.90）%，差異有統計學意義（P

2.2.2 caspase-8、caspase-3活性檢測試劑盒結果 TRAIL蛋白組caspase-8、caspase-3活性升高，聯合用藥組升高更明顯，與TRAIL蛋白組相比，差異有統計學意義（P

3 討論

前列腺癌為常見的惡性腫瘤，且發病率逐年上升，特別對晚期的前列腺癌目前缺少有效的治療方法，因而，尋求新的治療手段是目前急需解決的問題。應用有效藥物促進腫瘤細胞凋亡是目前治療腫瘤的重要途徑之一，也是前列腺癌治療的關鍵靶點。

TRAIL通過與細胞表面的TRAIL受體特異性結合發揮促凋亡作用[10-11]，但有些腫瘤細胞TRAIL受體表達量較低而限制了TRAIL蛋白的促凋亡作用的發揮，因而尋找和應用能夠提高TRAIL蛋白促凋亡作用的藥物使之能夠更好地發揮抗腫瘤作用[12]，成為抗腫瘤治療新的突破點。

Res的生物學作用非常廣泛，除具有強大的抗炎、抗氧化作用外，還對腫瘤的發生發展有明顯的抑制作用[13-17]，但具體機制尚不清楚，且由于Res具有雌激素樣活性，因而在前列腺癌的治療中備受關注。已有研究結果表明，Res能夠促進TRAIL蛋白對人肝癌細胞的凋亡作用[18]，因此，本研究通過實驗證實Res是否對TRAIL蛋白誘導的人前列腺癌細胞凋亡具有促進作用。

實驗結果顯示，Res能夠抑制PC-3細胞的增殖，且存在劑量依賴，當Res濃度為50 μmol/L時，作用較為明顯，濃度繼續增高，對細胞的增殖抑制作用不再增加，因而選用50 μmol/L為聯合用藥組Res的用藥濃度。TRAIL蛋白組的實驗結果表明，隨著TRAIL蛋白濃度增高，PC-3細胞的增殖率降低，在TRAIL蛋白濃度達到100 ng/ml后，對細胞增殖的抑制作用不再提高，因而聯合用藥組的TRAIL蛋白濃度選用100 ng/ml。在TRAIL蛋白濃度相同的情況下，聯合用藥組的細胞增殖率明顯低于TRAIL蛋白組，說明Res能夠加強TRAIL蛋白對細胞的增殖抑制作用。流式細胞術的檢測結果同樣顯示，Res能夠顯著提高TRAIL對PC-3細胞的凋亡作用。由于TRAIL蛋白是通過與死亡受體結合，活化caspase-8，繼而引發caspase級聯反應，最后激活下游凋亡執行分子caspase-3而引發凋亡[19-20]。因此，本實驗進一步檢測了caspase-8和caspase-3的活性，結果顯示，與單獨應用TRAIL蛋白相比，聯合用藥組caspase-8和caspase-3的活性明顯升高，進一步證實Res可以提高TRAIL對PC-3細胞的凋亡作用，為前列腺癌的治療提供了新的思路和實驗基礎。

[參考文獻]

[1] Simons MP，Nauseef WM，Griffith TS，et al.Neutrophils and TRAIL：insights into BCG immunotherapy for bladder cancer[J].Immunol Res，2007，39（1-3）：79-93.

[2] Zoog SJ，Ma CY，Kaplan-Lefko PJ，et al.Measurement of conatumumab-induced apoptotic activity in tumors by fine needle aspirate sampling[J].Cytometry A，2010，77（9）：849-860.

[3] Sanlioglu AD，Karacay B，Koksal IT，et al.DcR2 （TRAIL-R4） siRNA and adenovirus delivery of TRAIL （Ad5hTRAIL） break down in vitro tumorigenic potential of prostate carcinoma cells[J].Cancer Gene Ther，2007，14（12）：976-984.

[4] Zhao J，Lu Y，Shen HM，et al.Targeting p53 as atherapeutic strategyin sensitizing TRAIL-induced apoptosis in carlcer cells[J].Cancer Lett，2012，314（1）：8-23.

[5] Morizot A，Merino D，Lalaoui N，et al.Chemotherapy overcomes TRAIL-R4-mediated TRAIL resistance at the DISC level[J].Cell Death Differ，2011，18（4）：700-711.

[6] 金松，辛國榮，孟繁石，等.白藜蘆醇對人胃癌SGC7901細胞的抑制及其可能的機制[J].中國腫瘤生物治療雜志，2008，15（4）：365-368.

[7] 趙克森.白藜蘆醇的生物學特性和效應[J].中國病理生理雜志，2012，28（9）：1709-1711.

[8] 胡凌云，王海鈉，裴俊俊，等.白藜蘆醇防癌抗癌作用及其分子機制研究進展[J].山東醫藥，2010，50（5）：111-112.

[9] Wight RD，Tull CA，Deel MW，et al.Resveratrol effects on astrocyte function：relevance to neurodegenerative diseases [J].Biochem Biophys Res Commun，2012，426（1）：112-115.

[10] Smith MR，Jin F，Joshi I.Bortezomib sensitizes non-Hod-gkin′s lymphoma cells to apoptosis induced by antibodies to tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand （TRAIL） receptors TRAIL-R1 and TRAIL-R2[J].Clin Cancer Res，2007，13（18）：5528-5534.

[11] Pennarun B，Meijer A，de Vries EG，et al.Playing the DISC：turning on TRAIL death receptor-mediated apoptosis in cancer[J].Biochim Biophys Acta，2010，1805（2）：123-140.

[12] Kim MR，Lee JY，Park MT et al.Ionizing radiation can overcome resistance to TRAIL in TRAIL-resistant cancer cells[J].FEBS Lett，2001，505（1）：179-84.

[13] Ivanov VN，Partridge MA，Johnson GE，et al.Reserveratrol sensitizes melanomas to TRAIL through modulation of antiapoptotic gene expression[J].Exp Cell Res，2008， 314（5）：1163-1176.

[14] 黃笛鳴，單漢國，謝文彪.白藜蘆醇對人肝癌細胞轉移的影響及其分子機制[J].安徽醫科大學學報，2013，48（9）：1071-1074.

[15] 陳國良，單韋，徐穎，等.白藜蘆醇及其類似物的合成及抗TPA促癌作用研宄[J].沈陽藥科大學學報，2004，21（4）：261-263.

[16] 王偉，李覃，陳虹，等.白藜蘆醇調節STAT3抗急性髓性白血病作用的研究[J].中國藥理學通報，2010，26（3）：346-352.

[17] 陳洋，李巖，劉新莉，等.TRAIL聯合白藜蘆醇對乳腺癌MDA-MB-231細胞凋亡影響的研究[J].中華腫瘤防治雜志，2011，18（1）：14-17.

[18] 劉雯，尤紅娟，徐志輝，等.TRAIL聯合白藜蘆醇協同誘導人肝癌Huh7細胞凋亡的機制初探[J].免疫學雜志，2013，29（6）：461-464.

[19] GaUuzzi L，Kepp O，Kroemer G，et al.Caspase-3 and prost-aglandins signal for tumor regrowth in cancer therapy[J].Oncogene，2012，31（23）：2805-2808.

白藜蘆醇范文第5篇

[關鍵詞]白藜蘆醇；紫外線；紅斑

[中圖分類號]R758 [文獻標識碼]A [文章編號]1008-6455（2012）05-0754-03

Inhibitive effects of topical resveratrol on skin erythema induced by solar simulator ultraviolet irradiation

WU Yan1,JIA Li-li2,ZHENG Ying-na3,GAO Xing-hua1,CHEN Hong-duo1,LI Yuan-hong1

(1.Department of Dermatology,The First Hospital of China Medical University, Shenyang 110001,Liaoning,China;2.Department of Dermatology, The Fourth Hospital of Jilin University;3.Department of Dermatology, People's Hospital of Henan Province)

Abstract: Objective To investigate the effect of topical resveratrol on skin erythema induced by solar simulator ultraviolet irradiation. Methods Twenty volunteers were recruited and 6 experimental sites were separately marked on their bilateral backs. Sites 1 to 4 were topically applied with resveratrol combination with antioxidant, antioxidant, resveratrol, base, respectively. The products were applied to left-side followed by irradiation, and the products were applied to right-side after irradiation. Sites 5 and site 6 were separatedly designated as positive control and negative control sites. The irradiation last 4 days and skin erythema was observed. Results On the 1st and 2nd days after irradiation, no or only slight erythema were observed on site 1 to site 3. On the 3rd and 4th days, the erythema of site 1 and site 3 remained unchanged comparing to that on the 2nd day, whereas the erythema of site 2 became obvious than before and lighter than that of site 5. The erythema on left-side is slighter than that on right-side. Conclusion Topical resveratol could effectively prevent (more obviously) and reverse the skin erythema induced by solar simulator ultraviolet irradiation.

Key words: resveratol;ultraviolet;erythema

陽光中的紫外線（ultraviolet, UV）可減少皮膚中膠原合成，加速分解，改變皮膚微循環，從而導致皮膚光老化，同時UV可能抑制皮膚的免疫功能，導致光敏性皮膚病、皮膚腫瘤等[1-2]。隨著大氣臭氧層的破壞，人們戶外活動的增多，皮膚要接受更多的UV照射，因此保護機體免受光老化、光免疫抑制的影響到關重要。白藜蘆醇是植物界分布較廣的羥基二苯乙烯類化合物，最初作為一種葡萄類植物在受到真菌感染、UV照射等不利條件作用時產生的抗逆物質而被人認識，現已發現白藜蘆醇具有多種藥理活性[3-4]。

本研究旨在觀察白藜蘆醇外涂對模擬日光急性照射人體背部皮膚紅斑的預防或治療作用。

1 材料和方法

1.1 研究對象

1.1.1 招募20名健康女性志愿者，年齡45～58歲，Fitzpat rick皮膚分型均為Ⅳ型，均簽署了知情同意書。

1.1.2 入選標準：無系統性疾病或皮膚病；未接受系統性治療或皮膚局部治療；無光敏史；非妊娠或哺乳婦女。試驗于2009年1～2月（北方冬季）進行，以盡量減少外界環境中紫外線的影響[5]。

1.2 試驗樣品：白藜蘆醇+抗氧化劑、抗氧化劑、白藜蘆醇、基質均由雅詩蘭黛公司（美國紐約）提供。基質霜為保濕霜，不含防曬劑，SPF值

1.3 實驗儀器

1.3.1 數碼相機（Nikon, Coolpix 5700，日本）

1.3.2 日光模擬器（GS2006 3.0E版，中國計量科學研究院，北京），包括一個450 瓦的氙燈加上一個WG320 濾光片（Schott, Clichy, France），光線輸出模擬連續的290 nm 至400nm的日光紫外線輸出，可發射出15倍太陽光強度的模擬日光。

1.4 方法

1.4.1 試驗開始前兩周測定每位志愿者最小紅斑量（minimal erythema dose，MED）。

1.4.2 將每位研究對象的左、右側背部非曝光部位皮膚各劃出6個試驗部位。雙側各部位分別給予以下操作：①部位1～4分別涂抹白藜蘆醇+抗氧化劑、抗氧化劑、白藜蘆醇、基質；其中，左側涂抹半小時后予1.5倍MED的模擬日光照射，右側先接受1.5倍MED的光照然后再涂抹上述試驗樣品；②部位5僅予1.5倍MED的光照而不涂抹試驗樣品（陽性對照）；③部位6既不照射亦不涂抹試驗樣品（陰性對照）。各照光部位（即部位1～5）每天照光1次，連續照射4天。詳見表1。

2 結果

2.1 白黎蘆醇外涂對模擬日光照射所致紅斑的預防作用（左側背部）：1.5倍MED的模擬日光照射后第1天，分別涂抹白黎蘆醇+抗氧化劑、抗氧化劑、白藜蘆醇的部位1、2、3均未出現紅斑，涂抹基質的部位4出現隱約可見的淡紅斑，未涂抹任何物質的部位5出現清晰的淡紅斑。光照后第2天，部位1、2、3出現隱約可見的淡紅斑，部位4、5紅斑較前明顯，呈深紅色。光照后第3天及第4天，部位1、3淡紅斑仍不十分明顯，部位2為清晰的淡紅斑或深紅斑，部位4多數呈深紅色，部位5紅斑最明顯，呈深紅色甚至紫紅色。未經照光的陰性對照部位（部位6）皮膚顏色與周圍正常皮膚一致，無紅斑出現。見圖1。

2.2 白黎蘆醇外涂對模擬日光照射所致紅斑的治療作用（右側背部）：照射后第1天，部位1、2、3出現隱約可見的淡紅斑，部位4、5為清晰可見的紅斑。光照后第2天，部位1、2、3紅斑較前明顯，部位部位4、5為深紅色。光照后第3天及第4天，部位1、3紅斑較前無加深，部位2略加深，部位4、5可見明顯紅斑，呈紫紅色。未經照光的部位6無紅斑。見圖1。

3 討論

3.1 UV照射至皮膚后最初始的炎癥反應體現在皮膚血管擴張所致的紅斑。在照射完成前，即已產生即時紅斑；之后的1個小時，紅斑強度進一步加強；UVB光源24～48h達高峰，UVA光源72h達高峰。這種紅斑產生的時相性是由血管通透性時相性變化引起的：照射初血管通透性開始增加，隨后的30min恢復至正常水平，之后又進一步大量增加[6]。這種變化模式在大鼠、兔、豚鼠及人類皮膚均能觀察到，只是在時間上有輕微差異。UV誘導的這種皮膚血管擴張和隨后的紅斑反應是由多種因素參與的，其中最主要的是一氧化氮和前列腺素的產生，還包括炎癥性細胞因子。進而，通過改變細胞粘附性、常駐細胞群的細胞因子表達、非常駐細胞遷移至照射區等引發炎癥相關的免疫反應[6]。

3.2 白藜蘆醇是一種多酚類植物抗毒素復合物，在植物受到生物（如真菌感染）或非生物（如UV）威脅時合成急劇增加，廣泛存在于葡萄、松樹、虎杖、花生、決明子等天然植物或果實中，具有有益于人類健康的多種生物學活性及藥理作用[3-4]。本研究觀察了白藜蘆醇外涂對模擬日光急性照射人體背部皮膚紅斑的影響。研究結果表明，1.5倍MED的模擬日光照射后第1天，預防性外涂含白藜蘆醇或抗氧化劑產品的部位未出現紅斑，光照后外涂含白藜蘆醇或抗氧化劑產品的部位僅產生隱約可見的淡紅斑，提示外涂含白藜蘆醇或抗氧化劑產品可延緩紅斑出現時間或減輕紅斑強度；光照后第2天，外涂白藜蘆醇或抗氧化劑部位紅斑較相應部位第1天的明顯，但較陽性對照或基質對照部位的輕微；光照后第3天至第4天，外涂含白藜蘆醇產品（不加或加抗氧化劑）部位的紅斑較第2天的無加深，而僅外涂抗氧化劑部位紅斑較前一天有所加深，提示含白藜蘆醇產品可能較單純抗氧化劑效果更強，對UV照射誘發的皮膚炎癥反應所致的紅斑進展程度有很好的抑制作用。另外，在上述各時間點上，光照前外涂部位的紅斑較相應光照后外涂部位的紅斑均輕微，提示照射前外涂外涂含白藜蘆醇或抗氧化劑產品較照射后外涂效果更好。

3.3 由此可見，白藜蘆醇單獨外用或聯合抗氧化劑可有效地預防與治療模擬日光照射誘導的皮膚炎癥反應，尤以預防性應用效果更好。

[參考文獻]

[1]Afaq F, Mukhtar H. Botanical antioxidants in the prevention of photocarcinogenesis and photoaging [J]. Exp Dermatol,2006,15(9):678-684.

[2]Brenneisen P,Sies H,Scharffetter-Kochanek K.Ultraviolet-B irradiation and matrix metalloproteinases: from induction via signaling to initial events [J]. Ann NY Acad Sci,2002,973:31-43.

[3]Baliga MS,Meleth S,Katiyar SK.Growth inhibitory and antimetastatic effect of green tea polyphenols on metastasis-specific mouse mammary carcinoma 4T1 cells in vitro and in vivo systems[J].Clin Can Res,2005,11(5):1918-1927.

[4]Bhat KP,Pezzuto JM.Cancer chemopreventive activity of resveratrol[J]. Ann N Y Acad Sci,2002,957:210-229.

[5]Fitzpatrick TB. The validity and practicality of sun-reactive skin types Ⅰ through Ⅵ[J].Arch Dermatol,1988,124(6):869-871.